重组人内皮抑素30肽的抗肿瘤作用研究

目的：探讨重组人内皮抑素30肽对肝癌细胞的生物活性及其可能的作用途径。方法：建立HepG2肝癌细胞的单层细胞和多细胞球模型，采用MTT方法和流式细胞技术检测重组人内皮抑素30肽对单层细胞和多细胞球的生长抑制率和细胞调亡率；采用免疫组化和图像分析技术了解重组人内皮抑素30肽与肝癌细胞表面整合素结合的情况。结果：MTT实验表明，在二维细胞中，重组人内皮抑素30肽对HepG-2肝癌细胞表现出明显的抑制作用。在单层细胞和多细胞球中，重组人内皮抑素30肽均可导致细胞凋亡。免疫组化结果显示，无论在单层细胞还是多细胞球中，使用重组人内皮抑素30肽组HepG-2肝癌细胞表面的αtβ1整合素和αvβ3整合素的表达均比对照组明显降低（P〈0．05）。结论：重组人内皮抑素30肽对HepG2肝癌细胞具有直接的杀伤作用。重组人内皮抑素30肽可与HepG-2肝癌细胞表面的αtβ1整合素和αvβ3整合素结合发挥其抗肿瘤作用。     

假说：铁过量在乳腺癌变中的作用

游离铁作为一种前氧化剂可以导致氧化反应与DNA损伤。通过流行病学研究、动物学试验以及人体实验发现，铁过量以及体内铁平衡的破坏使游离铁增多，从而影响乳腺癌的发病。游离铁的升高会促进雌二醇、乙醇、电离辐射等这些已确定的乳腺癌危险因素的作用。为鉴定铁元素对乳腺癌的致癌作用，队列研究以血红素铁的吸收作为改良的生物标记来反映体内储存铁。鉴定乳腺癌患者的铁水平是否高于正常妇女有重要意义。     

三维与二维培养肝癌HepG2细胞的药物敏感性及生物学特性比较

目的：观察肝癌HepG2细胞株在不同培养模式下的生物学性质、耐药性。方法：采用琼脂糖预铺底法建立体外三维细胞模型,通过倒置显微镜、扫描电镜等方法证实三维细胞模型的成功建立;采用透射电镜、流式细胞术等技术方法,比较二维培养及三维培养细胞中细胞间连接、细胞周期、细胞凋亡的差异;采用MTT法获得不同培养模式下药物5-FU、DDP作用的细胞抑制率。结果：三维培养HepG2细胞第7天可形成直径160μm左右的多细胞球,悬浮生长;二维培养的HepG2细胞贴壁生长。三维培养与二维培养相比,存在细胞周期阻滞：G1期细胞增多[（59.23±1.28）%vs（39.45±1.21）%],G2期细胞减少[（12.47±0.14）%vs（36.15±1.09）%],早期自发凋亡细胞比例减少[（1.62±0.50）%vs（6.29±1.61）%],具有统计学差异（P〈0.05）;S期细胞比例变化不大[（28.30±0.93）%vs（24.40±0.96）%,P〉0.05],晚期自发凋亡坏死细胞比例变化不大[（0.65±0.17）%vs（0.66±0.29）%,P〉0.05]。二维培养细胞间连接少见,三维培养细胞连接结构丰富,可见桥粒连接、中间连接及紧密连接结构;三维培养下5-FU、DDP药物的细胞抑制率明显降低（与二维培养相比）。结论：经倒置显微镜和扫描电镜观察证实肝癌HepG2细胞体外三维培养模型成功建立,在三维培养条件下HepG2细胞对5-FU、DDP表现出多细胞耐药;与二维培养相比,三维培养的细胞间的相互作用有明显增强,且多细胞球生物学特性主要表现为细胞周期阻滞和早期凋亡减少,推测其可能与多细胞耐药有关。     

注射用左亚叶酸钙联合治疗晚期胃癌和结直肠癌的Ⅱ期临床研究

目的：以注射用亚叶酸钙为对照，评价注射用左亚叶酸钙联合治疗晚期胃癌和结直肠癌的安全性和有效性。方法：采用多中心、随机、平行对照试验设计。入组患者按胃癌与结直肠癌分别随机分为试验组和对照组，左亚叶酸钙（Ｌ-ＬＶ）联合氟尿嘧啶（５-ＦＵ）、奥沙利铂（Ｌ-ＯＨＰ）或顺铂（ＤＤＰ）以及亚叶酸钙（ＬＶ）联合５-ＦＵ、Ｌ-ＯＨＰ（ＤＤＰ）治疗晚期胃、结直肠癌，比较其临床有效性和毒性。结果：胃癌试验组和对照组有效率分别为２５.００％和２３.０８％，临床获益率分别为６５.６３％、６６.１５％；结直肠癌试验组和对照组有效率分别为２１.９５％和１９.５１％，临床获益率分别为７８.０５％和70.７3％。两组之间疗效比较差异皆无统计学意义（Ｐ＞０.０５）。结论：注射用左亚叶酸钙联合５-ＦＵ治疗晚期胃癌和结直肠癌，其使用剂量为注射用亚叶酸钙一半时达到的疗效与注射用亚叶酸钙联合化疗方案相当，发生的毒副反应多与联合化疗药物有关，其发生率与注射用亚叶酸钙联合化疗方案相似。     

肝癌组织中p27蛋白表达与肿瘤增殖凋亡活性的研究

研究肝细胞癌组织中p27表达对细胞增殖与凋亡活性的影响.采用Elivision法检测47例肝癌及相应癌旁肝组织中p27及PCNA的表达,TUNEL法检测原位细胞凋亡.结果显示肝癌组织中细胞增殖与凋亡指数明显高于癌旁肝组织.肝癌组织中p27染色指数明显低于癌旁肝组织与正常肝组织.低分化肝癌组织中p27表达和凋亡指数均明显降低.存在肝外转移的肝癌组织中p27表达降低而增殖指数明显增高.进一步研究显示,p27高表达组肝癌组织中凋亡指数明显高于低表达组,而增殖指数却显著降低.提示p27蛋白表达降低与肝癌的发生和进展有着密切关系,并可能是导致肝癌细胞增殖凋亡失衡的因素之一.     

肛周胃肠间质瘤1例

<正>患男,53岁。肛周包块3年,疼痛1月就诊。3年前无意中发现肛门周围花生米大小包块,质韧,无疼痛及其它不适,未在意,此后包块缓慢增大,但一直未行检查及治疗。1月前肛门周围出现阵发性疼痛,程度中等,此时包块增大至核桃大小,随后在外院住院治疗,查体发现肛门偏左处可见一枚直径约5cm、     

LEF-1截短型基因真核荧光表达载体的构建及其在SW480细胞系中的功能研究

目的 构建LEF-1截短型基因的真核表达荧光质粒,在真核细胞中表达,并检测其对人结肠癌细胞系SW480增殖和凋亡的影响.方法 利用PCR方法从人淋巴结cDNA文库中克隆LEF-1截短型的编码基因,插入到真核表达载体pcDNA3.1中,同时插入红色荧光示踪片段mRFP.用脂质体将重组质粒pcDNA3.1-LEF-1-mRFP瞬时转染Hela细胞,通过Western blot和流式细胞仪检测LEF-1截短型的表达,同法瞬时转染SW480细胞,观察细胞形态变化,MTT检测对细胞生长的影响,CSFE染色检测细胞的增殖情况,Annexin V方法检测细胞凋亡情况,PI染色检测细胞周期.结果 克隆LEF-1截短型的编码基因,经测序比对证实与GenBank中给出的序列一致,以含有LEF-1截短型的编码基因的真核表达荧光载体瞬时转染Hela细胞.LEF-1截短型基因的表达产物通过Westemblot和流式细胞仪方法得到证实,转染SW480细胞.光镜下观察发现部分细胞中出现颗粒,失去正常形态,细胞数目明显减少;MTT检测显示细胞活性下降,流式检测显示细胞增殖受到抑制,凋亡水平增加,细胞在G_(0/1)期发生阻滞.结论 成功构建LEF-1截短型的编码基因的真核荧光表达载体,证实其在真核细胞HeM中可以表达.同时可以抑制SW480细胞的活性和增殖,促进其凋亡,细胞被阻滞在G_(0/1)期,

Abstract：

Objective To construct a eukaryotic fluorescent expression vector of truncated lymphoid enhancer-binding factor 1 (LEF-1) gene and investigate its effect on the proliferation and apoptosis of human colonic carcinoma cell line SW480. Methods Truncated LEF-1 gene was obtained by PCR and DNA recombination from human lymphoid node cDNA library. The PCR product of LEF-1 gene was inserted into the plasmid pMD-18T and sequenced. The truncated LEF-1 gene was inserted into the eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1 and fused with mRFP for tracing. Using Lipofectamine~(TM) 2000, the plasmid pcDNA3.1 -LEF-1 -mRFP was transfected into Hela cells and detected by Western blotting and fluorescence activated cell sorting (FACS). The changes in the growth, proliferation and apoptosis of the SW480 cells were observed after transfection with the plasmids. Results The truncated LEF-1 gene was successfully cloned. After transfection with the plasmid pcDNA3.1-LEF-1-mRFP, the Hela cells expressed the product of LEF-1 as detected by Western blotting and FACS. The growth and proliferation of SW480 cells was inhibited and the cell apoptosis increased after transfection with the plasmid pcDNA3.1-LEF-1-mRFP, which also caused cell cycle arrest in G_(0/1) phase. Conclusion The eukaryotic expression fluorescent vector pcDNA3.1-LEF-1-mRFP has been constructed and expressed in eukaryotic cell line successfully. The truncated LEF-1 protein expressed in the transfected SW480 cells results in inhibition of the cell growth and proliferation with increased cell apoptosis and cell cycle arrest in G_(0/1) phase.     

心理社会因素与肿瘤细胞免疫研究进展

肿瘤与心理社会因素及心理治疗的关系越来越受到人们关注。心理对肿瘤的影响是通过神经内分泌及免疫调节来实现的，对心理社会因素与肿瘤细胞免疫及机制几个方面进行简要综述。     

国产托烷司琼治疗由顺铂引起恶心呕吐的临床观察

目的:探讨国产托烷司琼治疗由顺铂(DDP)引起的消化道反应的临床疗效.方法:采用多中心、随机、自身交叉对照的方法,对72例接受含顺铂的联合化疗肿瘤患者,随机分为A、B两组.止吐方案:国产托烷司琼5mg,静滴,第1～5天,欧必亭5mg,静滴,第1～5天.结果:国产托烷司琼控制急性呕吐(第1～3天)的有效率分别为96.9%(63/65)、89.2%(58/65)、81.5%(53/65),欧必亭控制急性呕吐(第1～3天)的有效率分别为96.9%(63/65)、90.8%(59/65)、83.1%(54/65),两组无统计学差异(P＞0.05).国产托烷司琼控制第4～5天呕吐的有效率分别为73.8%、81.5%,欧必亭控制第4～5天呕吐的有效率分别是80.0%、83.1%,无统计学差异(P＞0.05).两组不良反应相似.未见头痛、腹部不适及锥体外系症状发生.结论:国产托烷司琼与欧必亭治疗以顺铂为主的化疗方案所致的恶心、呕吐,均取得相似的效果,且不良反应轻微,具有很好的耐受性,可作为预防含有顺铂联合化疗所致恶心、呕吐的一线治疗.