环氧化酶和多药耐药在肿瘤治疗中的研究及相互关系

环氧化酶(COX)是前列腺素合成过程中的关键酶,研究发现它参与肿瘤的发生发展,并在一定程度上影响肿瘤的转归,对多药耐药(MDR)基因的调控是它影响肿瘤转归的重要因素.了解COX在肿瘤中的作用,明确COX和MDR在肿瘤中的关系,对肿瘤治疗具有重要意义.     

丙戊酸钠抑制人多发性骨髓瘤U266细胞增殖及组蛋白乙酰化调控的研究

本研究探讨丙戊酸钠（valproic acid sodium,VPA）对U266细胞增殖的抑制作用及对组蛋白乙酰化修饰调控的影响。采用CCK-8法检测VPA对U266细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测VPA作用前后U266细胞周期的变化,半定量RT—PCR检测VPA作用后U266细胞中组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）mRNA的表达变化,Western blot方法检测VPA作用后HDAC1及组蛋白H3、H4乙酰化蛋白水平的变化。结果表明,VPA对U266细胞增殖的抑制作用呈时间一浓度依赖性;2．5mmol／L的VPA处理细胞48小时后,细胞周期检测显示G0／G1期细胞比例增高,S期细胞比例下降,细胞被阻滞在G0／G1期（P〈0．05）;RT—PCR证实VPA能够抑制HDAC1mRNA的表达水平;Western blot方法证实不同浓度VPA作用细胞48小时后HDAC1蛋白水平降低,组蛋白H3、H4乙酰化表达水平提高。结论：VPA能够抑制U266细胞增殖,使细胞阻滞于G0／G1期,这可能与VPA抑制HDAC1表达,上调组蛋白H3、H4乙酰化水平有关。     

核糖体蛋白RPL36A siRNA对U937细胞的促增殖、抑凋亡作用

本研究探讨RPL36A基因在急性髓系白血病(AML)病人的表达情况及可能的作用机制。应用RT-PCR检测急性髓系白血病细胞、正常人单个核细胞、U937细胞中RPL36A基因的表达情况;RPL36A siRNA经脂质体介导转入U937细胞,采用MTT法及DNA倍体分析检测细胞增殖,AO/EB、TUNEL、Annexin V/FITV检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blot检测RPL36A基因及蛋白表达水平的变化。结果表明:RPL36A在初治AML细胞和U937细胞中表达明显增高;MTT法及DNA倍体分析发现,U937细胞增殖受到抑制,细胞周期阻滞;AO/EB染色、TUNEL、Annexin V/FITV检测显示,转染RPL36A siRNA的细胞组凋亡率高于对照组;RPL36A siRNA作用可引起U937细胞的RPL36A的mRNA水平的降低和蛋白表达量的下降,且呈时间依赖性(r分别为0.9813和0.9537)。结论:AML细胞高表达RPL36A基因,RPL36A基因的高表达可能促进AML细胞的过度增殖并抑制其凋亡。     

中国15家医院慢性粒细胞白血病发病状况及目前诊断治疗模式调查分析

目的 探讨日前中国慢性粒细胞白血病(CML)患者的特征和诊断及治疗模式.方法 收集并分析分布于中国不同地区的15家医院血液科2005年住院CML患者病例资料和2006年7月至9月在这15家医院门诊的CML患者门诊资料.结果 共收集1824例患者资料,其中住院患者722例,门诊患者1102例;男女比例1.78:1,确诊时中位年龄40.02(2.45～83.29)岁.90.41%的患者为慢性期,但在凋查时段加速、急变期患者比例升至21.66%.93.20%的患者在诊断和监测时进行了血常规和骨髓细胞形态学检查,70.29%的患者在前两者的基础上联合染色体核型分析,只有51.54%的患者在前两者的基础上同时联合细胞遗传学和分子学检测.羟基脲依旧是治疗CML最常用的药物,37.45%的患者接受了伊马替尼治疗,25.55%的患者使用干扰素治疗,722例住院患者中164例(22.72%)进行了造血干细胞移植.伊马替尼在加速期和急变期的使用率分别为48.28%和48.42%,明显高于慢性期(35.94%)(P＜0.05),但是平均使用剂量与慢性期患者接近.门诊患者和住院患者伊马替尼的耐药率分别为6.87%和16.28%;门诊患者以继发耐药为主(68.75%),而住院患者以原发耐药为主(65.71%);门诊患者和住院患者不能耐受伊马替尼的比例分别为3.21%和11.63%.大部分接受伊马替尼治疗的患者未得到及时监测,3个月时63.38%的患者评价了血液学疗效,41.41%的患者6个月时进行了细胞遗传学评价,而12个月时进行了细胞遗传学评价的患者只有27.35%.移植所需的平均费用为(213092±125 890)元.结论 中国CML患者较西方患者年轻,确诊时绝大部分为慢性期,由于经费的限制,仅有三分之一的患者接受了伊马替尼治疗,大部分患者未得到及时有效的监测.加速/急变期患者对伊马替尼的耐药问题应引起临床医师的关注.     

自体树突状细胞活化的骨髓细胞对慢性粒细胞白血病骨髓的净化

为考察慢性粒细胞白血病(CML)患者自体树突状细胞(DCs)活化骨髓细胞、净化骨髓的作用,采用免疫磁珠从2例血液学缓解的CML骨髓单个核细胞(BMMNCs)分离DCs,另取BMMNCs置T-25塑料培养瓶建立Dexter培养体系,分为3份,第1份为对照,第2份加rhIL-2,第3份加自体DCs.每周取半量非贴壁细胞、计数、行CFU-GM检测,然后加等量新鲜培养基继续培养.当非贴壁细胞总数＜2×105时终止培养,收集贴壁细胞做CFU-GM集落形成试验并检测CD34和P210表达.取贴壁细胞形成的CFU-GM集落,抽提RNA,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测BCR/ABL的表达.结果发现,在DCs加入CML骨髓Dexter培养体系培养后1-2周,非贴壁细胞的CFU-GM产量明显下降,与rhIL-2的体系基本平行,同时体系中的P210阳性细胞显著减少.不过,培养3周后含DCs的体系CFU-GM产量下降减缓,而含rh-IL-2的体系CFU-GM产量持续下降.在含自体DCs的Dexter体系,贴壁细胞中CD34+细胞和P210+细胞比例最低,只是贴壁细胞产生的CFU-GM集落中,BCR/ABL(+)的集落比例与不合DCs的体系比较无明显差别.这些结果说明自体DCs加入CML骨髓Dexter培养体系能减少白血病的祖细胞,包括成熟的祖细胞和原始的祖细胞,自体DCs有可能用于CML骨髓的体外净化.     

项目教学法在临床血液学检验教学中的尝试

临床血液学检验是临床血液病学的重要组成部分,具有很强的实践性。项目教学法是以学生为主体、以能力为主线的新兴的教学模式。将项目教学法融入临床血液学检验教学当中,有利于调动学生的学习热情,加深学生对知识的理解和记忆,增强学生的实践能力,从而提高教学质量,促进医学检验教学的可持续发展。     

HSV1-TK、HSV1-SR39TK及GCV、ACV对小鼠T淋巴细胞的杀伤作用研究

 目的 观察慢病毒载体携带的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶（HSV1-TK）和突变型单纯疱疹病毒1型胸苷激酶（HSV1-SR39TK）基因在小鼠T淋巴细胞的表达及前体药物丙氧鸟苷（GCV）、无环鸟苷（ACV）对小鼠T淋巴细胞的杀伤效应。方法 用亚克隆技术将PCR扩增的HSV1-TK、HSV1-SR39TK基因分别连接至慢病毒载体,在TK、SR39TK基因后以内部核糖体进入位点（IRES）连接绿色荧光蛋白（GFP）基因,采用三质粒包装系统包装病毒,将病毒感染刀豆蛋白A激活的小鼠T淋巴细胞,然后通过CCK-8方法观察其对前体药物GCV、ACV的敏感性。结果 慢病毒载体携带的HSV1-TK 及HSV1-SR39TK 基因均可在小鼠T淋巴细胞内高效表达,GCV和ACV对转导TK基因的淋巴细胞均有杀伤作用,含突变型TK基因的淋巴细胞对前体药物敏感性更高,后者对GCV的IC50值比野生型小2.5倍,对ACV的IC50值比野生型小17.4倍。结论 表达HSV1-SR39TK基因的T细胞对GCV有更高的敏感性,对ACV也较敏感,应用HSV1- SR39TK基因进行防治GVHD的研究是更好的选择。     

用溴化乙锭改良脐带血染色体制备方法

目的用溴化乙锭改良脐带血染色体制备。方法采用标本放置过夜,加入一定量的溴化乙锭等方法。结果改良法脐带血染色体分散良好、长度适中、G显带深浅带纹清晰,提高了染色体核型分析结果的准确性和可靠性。     

福建汉族急性淋巴细胞白血病及慢性粒细胞白血病HLA-DRB1基因分析

目的探讨HLA-DRB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性粒细胞白血病（CML）之间的关联。方法用聚合酶链反应-序列特异引物（PCR-SSP）方法，对32例ALL、33例CML患者和104例健康志愿者的HLA-DRB1基因进行分型并分析HLA-DRB1基因的分布。结果与正常对照组相比，ALL患者的HLA-DRB1＊06的基因频率明显增高，为15．63％，RR=3．84，χ^2=8．01，P〈0．001；CML患者的HLA-DRB1＊09的基因频率明显增高，为24．24％，RR=3．14，χ^2=7．82，P〈0．01，结论HLA-DRB1＊06与急性淋巴细胞白血病有关联，HLA-DRB1＊09与慢性粒细胞白血病有关联。     

老年恶性组织细胞病1例报告

近来随着免疫组化、分子和细胞遗传学技术的进展,我们对恶性组织细胞病(MH)的认识较以往有了较大的提高.恶性组织细胞病是十分罕见的疾病,20世纪80年代末以前所谓的恶性组织细胞病绝大多数是淋巴瘤、噬血细胞综合征以及其他疾病,国内报道的病例尤其如此.其病程进展迅速,任何年龄均可发病,但老年人较少见[1].近期我院收治1例老年恶性组织细胞病患者,现报告如下.