共价药物靶蛋白活性结合位点研究综述

共价药物以其对靶蛋白的高抑制率而在临床中广泛使用,并逐渐引起药学家的重视。本文总结四种不同类型的共价结合位点,被“酸性氨基酸-碱性氨基酸-丝氨酸/苏氨酸”三元体结构活化的丝氨酸/苏氨酸残基是共价药物的潜在共 价结合位点,活性口袋附近半胱氨酸巯基同样是潜在的亲核基团,这两类氨基酸残基都能共价结合药物中的亲电基团。因此这些活性结合位点的发现是研发共价键药物的关键,尤其适合于具有新骨架和新结构的海洋天然产物的药物研发。     

Scopuquinolone A, 一种来源于柳珊瑚真菌Scopulariopsis sp.中的新萜类二氢喹啉酮生物碱

摘 要：目的 从一株来源于柳珊瑚的真菌Scopulariopsis sp.中分离获得一种新萜类二氢喹啉酮生物碱Scopuquinolone A（1）。方法 新化合物1的结构确定是通过广泛的波谱数据,包括二维核磁和高分辨质谱。1的绝对构型是通过CD以及计算旋光结合实验数据得以确定的。结果 化合物1鉴定为一种新萜类二氢喹啉酮生物碱。结论 中国南海柳珊瑚来源的真菌是产生结构新颖、活性显著的次级代谢产物的重要来源。这是首次从Scopulariopsis属真菌中分离获得新的萜类二氢喹啉酮生物碱。     

海洋微生物次级代谢产物及其抑菌活性研究进展

海洋微生物能够产生大量结构新颖、活性独特的次级代谢产物,这为药物先导化合物的发现提供了重要来源,已成为海洋药物研究的热点。本文综述了自2000年至今从海洋真菌、细菌、放线菌报道的具有抑菌活性次级代谢产物的研究进展,共涉及到活性化合物101个,结构类型主要包括大环内酯类、生物碱类、醌类、肽类和萜类等,其中26个化合物含有氯、溴或硫元素;体外抑菌活性测试结果表明,有33个化合物的MIC<5μg.mL-1。     

半红树植物黄槿中的三萜和甾醇成分(英文)

目的:研究半红树植物黄槿(Hibiscus tiliaceus L.)的化学成分。方法:分离纯化采用硅胶色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、高效液相色谱等方法。结构鉴定通过理化常数和波谱数据与文献对照确定。结果:从黄槿中共分离鉴定了10个化合物,分别为:木栓酮(1)、粉蕊黄杨二醇(2)、β-粘霉烯醇(3)、羽扇豆醇(4)、日耳曼醇(5)、豆甾-4-烯-3-酮(6)、豆甾-4,22-二烯-3-酮(7)、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(8)、β-谷甾醇(9)和豆甾醇(10)。结论:化合物3～5和8为首次从该植物中分离得到。     

清热解毒方体外抗人乳头瘤病毒感染及作用机制

目的:采用高危型人乳头瘤状病毒16(human papillomavirus 16,HPV16)体外假病毒感染模型评价清热解毒方体外抗HPV16感染活性及作用方式,并探讨清热解毒方的作用机制。方法:首先,将HPV16假病毒加入到293T/17细胞中,建立HPV假病毒体外荧光感染模型,以此模型评价清热解毒方(20~1 000 g·L~(-1))体外抗HPV16作用,探讨清热解毒方抗HPV感染的量效关系;其次,采用HPV假病毒模型,通过预处理细胞、与病毒同时作用于细胞、病毒处理后作用于细胞的不同处理方法,探讨清热解毒方(20 g·L~(-1))抗HPV的作用方式;最后,从清热解毒方作用后HPV转化的He La细胞中提取致癌蛋白E7,细胞外信号调节激酶(ERK)以及核转录因子-κB(NF-κB),用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测E7,ERK,NF-κB蛋白表达,探讨清热解毒方(3. 33~20 g·L~(-1))在肿瘤相关蛋白水平上的作用机制。结果:与病毒组比较,清热解毒方可以明显抑制HPV16假病毒的感染(P 0. 05),且呈现明显的浓度依赖关系;且清热解毒方能够通过保护细胞、抑制病毒吸附并抑制病毒感染后过程的多种方式发挥其抗HPV16作用,其中保护细胞的效果更显著(P 0. 01),说明清热解毒方能够显著预防HPV16感染;与空白组比较,清热解毒方能够明显抑制E7致癌蛋白的表达,并抑制ERK,NF-κB蛋白的表达(P 0. 05,P 0. 01),达到抗肿瘤的作用。结论:清热解毒方具有较好的抑制HPV病毒的效果,该研究为清热解毒方清除HPV病毒和防治宫颈癌提供了创新性的理论依据。     

碱提灵芝多糖的分离纯化、结构表征及免疫活性评价

目的从赤芝Ganoderma lucidum中提取、分离和纯化获得碱提多糖组分,在表征其基本理化性质和精细结构的基础上,对其体外免疫调节活性进行研究。方法赤芝子实体干燥粉碎后,利用碱提醇沉法提取粗多糖,经Q-Sepharose Fast Flow离子交换色谱柱纯化得到灵芝多糖组分(LZJ-0.15)。采用PMP柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)及高效凝胶渗透色谱-十八角度激光光散射联用法(HPGPC-MALLS)测定LZJ-0.15的单糖组成及相对分子质量特征,并通过核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)及二维谱(1H-1H COSY和1H-13C HSQC)对LZJ-0.15的精细结构进行表征。采用小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红实验对灵芝多糖LZJ-0.15进行免疫活性评价。结果 LZJ-0.15的相对分子质量、分子半径及Mw/Mn分别为24 700、46.6 nm和1.019,其单糖组成分析显示以葡萄糖为主(92.3%),核磁谱图显示LZJ-0.15为→3)Glc(β1→及→6)Glc(β1→连接为主的葡聚糖。RAW264.7细胞吞噬中性红实验显示LZJ-0.15具有较好的免疫调节活性。结论赤芝碱提灵芝多糖相较于水提多糖组分具有较优的免疫活性,有望开发成重要的免疫调节剂。     

中药研发策略及思路

中医药是中华民族文明与智慧的结晶,必须继承和发展好。中药研发挑战与机遇并存,新思路、新技术、新方法不断涌现,推动了中医药更好的发展,本文综述了近年来中药研发主要策略及关注点,为中药深入研究提供参考。     

1株链霉菌产胞外多糖ZS-11的结构表征及抗氧化活性研究

目的 对来源于南海深海海泥链霉菌Streptomyces pratensis OUCMDZ-3159所产胞外多糖的结构和抗氧活性进行研究。方法 利用醇沉法和柱色谱法对菌株所产胞外多糖进行分离纯化,利用多种仪器分析方法,包括PMP柱前衍生高效液相色谱法、红外光谱法和气相质谱联用法等分析了多糖的化学组成和结构,通过测定DPPH自由基清除活性、超氧阴离子自由基清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力,对多糖的抗氧化活性进行评价。 结果 从链霉菌Streptomyces pratensis OUCMDZ-3159发酵液中得到了1种分子量为25.0 kDa的多糖组分ZS-11,它是由甘露糖和半乳糖以14.5:1的比例构成;糖链中包含(1→)-Manp,(1→2)-Manp,(1→3)-Manp,(1→6)-Manp,(1→2,3)-Galf和(1→2,6)-Manp连接方式;多糖ZS-11具有良好的抗氧化活性,在测定的4种活性指标中,清除DPPH自由基的能力最强。结论 首次从深海海泥放线菌Streptomyces pratensis OUCMDZ-3159中分离得到抗氧化活性显著的胞外多糖ZS-11,它是1种结构新颖的半乳甘露聚糖。     

CE-EMMA法测定乙脑灭活疫苗中乙二胺四乙酸二钠残留量

建立毛细管电泳（CE）结合电泳中介微分析（EMMA）测定乙脑灭活疫苗中乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）残留量的方法。方法：运行缓冲液为0.025 mol·L-1磷酸氢二钠缓冲液（pH 2.5）,在线络合金属离子为1.5 mg·mL Fe3+,孵育时间3 min,分离电压-25 kV,紫外检测波长257 nm,压力进样5 000 Pa×5 s,检测温度为25.0 ℃。结果：EDTA-2Na在0.01~0.5 mg·mL-1的浓度范围内呈现良好的线性关系,r为0.999 9,最低检测限为5 μg·mL-1,测定样品RSD小于2.87%,加样回收率为94.13%~105.56%。结论：该方法操作简便,准确度高,稳定性好,可用于乙脑灭活疫苗中EDTA-2Na残留量的测定。     

枸橼酸坦度螺酮口腔速溶膜的制备与质量评价

采用溶剂浇铸法制备枸橼酸坦度螺酮口腔速溶膜(ODFs)。通过单因素试验筛选了成膜材料、掩味剂和增塑剂,确定优化处方为：10.8%的枸橼酸坦度螺酮、37.5%的HPMCE5、7.5%的羟丙纤维素、27.0%的羟丙基倍他环糊精、15%的甘油和2.2%的三氯蔗糖。所得ODFs成膜性好,崩解时间约40 s,含量均匀度和有关物质符合规定,15 min时水中的溶出率超过85%,与市售片剂的溶出行为相似。基于羟丙基倍他环糊精的包合作用,药物的掩味效果较好。在光照、高温和高湿条件下进行ODFs的稳定性试验。结果显示,除60℃高温条件外,ODFs在其他条件下稳定性良好,外观、含量和有关物质未发生显著变化。在40℃、相对湿度75%条件下放置1个月,ODFs中的药物晶型保持稳定。