《医学伦理学》实践性教学的探索与研究

医学伦理学的实践性教学是决定该课程教学效果的关键。我院的医学伦理学教学经过27年的努力和探索,逐步形成了案例教学、小组讨论、科研活动、案例考核、医学伦理学教师与临床教师讲授相结合等实践性教学的基本形式,但仍然需要关注和研究以下问题：构建科学的医德素质评价体系;注重实践性教学的连续性和系统性;设置专门的医学伦理学实践课程;直面现代医疗卫生实践中出现的新问题。     

神经干细胞移植治疗Alzheimer病的研究进展

阿尔茨海默病（AD）的神经干细胞（NSC）治疗目的是修复和替代受损神经细胞,重建细胞环路和功能。主要有2种途径：一是内源性途径,即诱导内源性神经干细胞增殖与分化,使损伤的中枢神经系统进行自我修复;二是外源性途径,即直接替代缺损组织或植入基因工程细胞,这一类细胞能分泌促进干细胞增殖与存活的因子。目前,还没有应用NSC治疗人类AD获益的证据,尚缺乏足够的证据来评价NSC移植在人类神经功能恢复方面所起的作用。     

Genistein对APP695转染PC12细胞凋亡的保护作用

目的观察Genisteint（GST）对APP695转染PCI2细胞凋亡的保护作用。方法将培养的PC12细胞分为正常对照组、APP695转染组、GST干预组。采用流式细胞术检测PC12细胞凋亡率。结果APP695转染组与正常对照组比较,PC12细胞存活率明显降低,凋亡率明显升高（P〈0,01）。GST干预组与APP695转染组比较,细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低,其中1μmol／LGST组与APP695转染纽此较,细胞凋亡率降低（P〈0．05）,5μmol／LGST组较APP695转染组细胞凋亡率则明显降低（P〈0．01）。结论GST对APP695基因转染引起的PC12细胞损伤有一定的保护作用。     

速读速记心智潜能开发对青少年基本认知能力的影响

目的观察速读速记心智潜能开发对青少年基本认知能力的影响。方法采用《基本认知能力测验》软件以及速读速记效果测试手册,对经过全脑速读记忆法训练的六年级学生（珠心算与非珠心算）以及本科一年级学生进行测验。结果①全脑速读记忆法对青少年各项认知能力及阅读效率都有所提高,只是针对教育程度的不同,提高的方面略有不同。②全脑速读记忆法对3组认知能力提高程度除了汉字旋转效率之外没有明显差异。结论全脑速度记忆法训练对青少年基本认知能力和阅读效率的提高效果显著。     

SOD、脂质过氧化物、CP与自然流产的相关性

目的通过对体内超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化物及还原物质铜蓝蛋白（CP）的测定,探讨SOD、脂质过氧化物及cP与自然流产的关系。方法用Elisa法测定30例正常早孕、先兆流产、胚胎停育妇女血清中SOD水平,用化学比色法测定其脂质过氧化物水平,用酶学法测定其CP水平。结果与正常早孕妇女相比．先兆流产与胚胎停育妇女血清中脂质过氧化物水平都升高（P〈0．05）,SOD,CP水平都下降（P〈0.05）;胚胎停育与先兆流产患者相比血清脂质过氧化物水平升高（P〈0．05）,SOD,CP水平下降,但差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论体内SOD,脂质过氧化物,CP的水平与自然流产具有相关性。     

mIL-21／PcDNA3．1真核表达载体的构建及鉴定

目的构建mIL-21／PcDNA3．1真核表达载体。方法从ConA活化的BALB／c小鼠脾细胞中抽提总RNA,RT—PCR方法扩增小鼠IL-21基因,XhoⅠ和HindⅢ双酶切后克隆入真核细胞高效表达载体pcDNA3．1中,构建小鼠IL-21真核表达载体mIL-21／PcDNA3．1,并经PCR、限制性酶谱分析和DNA序列分析对重组子的正确性进行鉴定。结果构建的小鼠IL-21真核表达载体mIL-21／PcDNA3．1经PCR、限制性酶谱分析和DNA序列分析证明获得了目的基因,其序列与Genbank中登录的小鼠IL-21基因序列完全一致。结论成功构建了。mIL-21／PcDNA3．1真核表达载体,为IL-21分子的进一步研究奠定了基础。     

缺氧对体外培养的鼠胚神经干细胞分化的影响

目的分离大鼠胚胎皮质神经干细胞（NSCs）进行体外培养,探讨缺氧对体外培养的鼠胚大脑皮质神经干细胞分化的影响。方法对孕14d（E14d）大鼠取鼠胚脑皮质用无血清培养技术分离培养神经干细胞,血清：培养基贴壁诱导分化。通过免疫细胞化学染色检测细胞分化情况;NSCs采用三气培养箱予以不同缺氧干预,缺氧培养后再用10％胎牛血清培养基进行贴壁分化,用MAP2免疫荧光染色检测缺氧对NSCs向神经元方向分化的影响。结果①大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原;②缺氧干预实验中,5％O2组尤以72h组可诱导NSCs向神经元方向分化。结论从大鼠胚胎皮质可成功分离NSCs,缺氧可影响NSCs的分化,适度缺氧可诱导离体培养的大鼠脑皮质NSCs向神经元方向分化。     

超声引导单击冷循环射频消融治疗肝癌的临床研究

目的探讨超声引导单击冷循环射频消融（cooling cycle radio frequency Ablation,RFA）治疗肝癌的疗效。方法对124例肝癌患者的146个肿瘤在超声引导下行多点扇形立体定位法经皮穿刺RFA治疗,在局部或硬膜外麻醉后,将射频电极穿刺肿瘤至肿瘤底部,根据肿瘤大小由深至浅进行消融治疗,每点治疗5～12min,当肿瘤完全被强回声覆盖超出正常肝组织0．5cm时停止治疗,封闭针道。治疗后15min行超声造影（CEUS）,判断肿瘤是否完全灭活,如果造影显示灭活不完全,可重复以上治疗;治疗后1个月行增强CT（CECT）或CEUS评估治疗效果。结果本组治疗后1个月CECT复查146个肿瘤,肿瘤内无强化者为125例（85．62％）,其中〈3cm者125例,-5cm者34例（85.00％）,～6cm者34例（80．95％）,-10cm者13例（81．25％）。CEUS复查126个肿瘤,肿瘤内无增强者106例（84．13％）,其中〈3．0cm者31例（86．11％）,-5cm者31例（85．29％）,-6cm者35例（83．33％）,-10cm者3例（78．57％）。CECT与CEUS比较,差异无显著性。结论超声引导单极冷循环RFA治疗肝癌疗效可靠,安全性高、适应范围广、创伤小、提高了较大肝癌灭活率。     

人釉成熟蛋白Amelotin基因的启动子活性区域分析

目的构建人牙釉质蛋白（Amelotin,AMTN）基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因载体,比较不同的启动子片段在成釉细胞及Hela细胞中的活性,为进一步判定上游启动子的转录调控区奠定基础。方法以PCR方法获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3．Basic中,瞬时转染成釉细胞及Hela细胞,通过检测荧光素酶活性来分析启动子区域的转录调控能力。结果成功地获得了不同长度的Amelo—tin基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功,不同长度的启动子在不同的细胞中活性不同,-190～-358与-35～-93区域为特异的转录调控作用区。结论成功构建了不同长度的Ame｜otin基因启动子的pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,初步确定Amelotin基因启动子的转录活性区,为进一步研究Amelotin基因转录调控特点奠定基础。     

Tet—onAdvanced调控Amelotin基因表达成釉细胞系的建立

目的应用Tet-OnAdvanced。基因表达系统构建由强力霉素（D0x）诱导Amelotin基因表达的成釉细胞系,为进一步研究Amelotin基因的生物学功能奠定基础。。方法通过fIT—PCT法从出生后7d的小鼠牙胚中克隆得到Amelotin的全长基因,测序正确后将其亚克隆入pTRE-Tight裁体中,利用Tet—onAdvanced基因表达系统先后将调控质粒pTet—OnAdvanced和反应质粒pTRE-Tight-Amelotin转入成釉细胞,分别用G418和潮霉素进行筛选．克隆扩增得到可诱导表达Amelotin基因的成釉细胞系j用RT-PCR法检测不同Dox浓度下转染成釉细胞中Amelotin基因的表达。结果连续两个回合的转染及筛选后获得了引入pTet-onAdvanced系统的细胞系,能够高诱导低背景表达Amelotin,在强力霉素诱导48h可从使Amelotin的表达显著增加,强力霉素在一定浓度范围内可以诱导Amelotin的表达呈剂量依赖性增加。结论成功构建了受强力霉素调控的双重稳定表达Amelotin．成釉细胞系,为进一步研究Amelotin与釉质矿化之间的关系奠定了基础。