高温致畸与热休克反应、凋亡相关关系的研究进展

高温是常见的物理致畸因素之一 ,对多种哺乳动物包括人类具有致畸作用 ,但高温致畸机制尚不明确。在高温致畸过程中 ,细胞凋亡增加 ,同时伴有热休克蛋白表达增强 ,表明高温致畸与热休克反应 ,凋亡之间的关系非常密切。     

bFGF、NGF对高温影响神经细胞存活的保护作用

目的 :研究高温对原代培养神经细胞存活的影响以及bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活的保护作用。方法 :应用神经细胞原代培养、MTT、NSE ELISA测定技术。结果 :①高温处理后神经细胞活性明显降低 ;②外源性bFGF、NGF均不同程度地增加了神经细胞活性 ,其抗体均不同程度地使神经细胞活性降低 ,但二者联合应用神经细胞活性增加不明显 ;③NSE ELISA检测结果与MTT检测结果一致 ,但特异性和敏感性更高。结论 :外源性bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活具有保护作用。     

PI3K/AKT/Bcl-2通路在吡格列酮保护缺血再灌注损伤心肌细胞中作用的研究

目的 研究吡格列酮对缺血再灌注损伤心肌细胞的保护作用机制中PI3K/AKT/Bcl-2信号通路的作用.方法 取Wistar大鼠乳鼠心室肌细胞进行体外培养,缺氧、复氧各3 h后建立缺血再灌注损伤细胞模型.采用免疫细胞化学染色法检测细胞内Bcl-2蛋白含量,采用Western-bloting检测细胞内Bcl-2蛋白表达水平.结果 免疫细胞化学染色法及Western-bloting结果均显示：与Ⅰ组比较,P组Bcl-2表达明显增加（P〈0.05）;与P组比较,P＋Ly组Bcl-2表达明显减少（P〈0.05）.结论 吡格列酮减轻心肌缺血再灌注损伤保护机制与其激活PI3K/AKT/ Bcl-2信号通路有关.     

细胞旋转培养器的研制与使用

在匀速旋转细胞培养中,需要一种匀速旋转的细胞旋转培养器。厂家生产的匀速细胞旋转培养箱体积大,结构复杂,价格高,不易购置。经过长时间的研究,我们制作了一个细胞匀速旋转培养器,经我院组织学与胚胎学教研室人员使用,达到了匀速旋转培养细胞的要求,现将制作及使用介绍如下。1器材不锈钢长方管(290mm×75mm×45mm,290mm×30mm×10mm)2条,旧闹钟芯、3V直流马达、线绕电位器(100Ω)、电源开关(推推开关)、干簧管、圆形磁铁、发光二极管、塑料电池盒、充电器各1个,按钮开关2个,充电电池8节,厚0.3mm及1mm不锈钢片、不锈钢丝、自行车辐条、导线…     

地高辛标记的金黄地鼠RPL30cDNA探针的制备和应用

目的制备地高辛标记的核糖体蛋白RPL30cDNA探针并用其研究RPL30在神经管发育过程中的表达状况。方法利用分部分排除技术（SSS法）从金黄地鼠神经管cDNA文库中逐级筛选得到RPL30cDNA的全长序列；随机引物法制备地高辛标记RPL30cDNA探针，点杂交法检测探针的灵敏度；Northern杂交检测神经管发育过程中RPL30mRNA的表达状况。结果本研究从构建的神经管cDNA文库中得到RPL30cDNA片段，全长535bp；制备探针的浓度达到50mg／L；Northern杂交检测发现E8d～E12d神经管中RPL30mRNA的表达均处于较高水平。结论该研究结果为进一步探讨RPL30与神经管发育和神经管畸形发生之间的关系奠定基础。     

星形胶质细胞与神经元间通讯的研究进展

星形胶质细胞在中枢神经系统发挥重要作用,特别是与神经元之间网络通讯起关键作用。星形胶质细胞与神经元之间通讯主要包括隧道纳米管、小囊泡、缝隙连接、突触等。在神经退行性疾病中,由于星形胶质细胞与神经元间的通讯障碍,导致神经元发生退行性变性。因此,研究星形胶质细胞与神经元通讯对阐明神经退行性疾病的发病机制及临床治疗具有指导性的意义     

大鼠骨骼肌植块诱导脊髓神经干细胞向运动神经元样细胞的分化

目的:分离大鼠胚胎的脊髓神经于细胞进行体外培养,探讨骨骼肌植块诱导其向运动神经元样细胞分化.方法:应用无血清培养技术分离培养脊髓神经干细胞,通过5-溴-2-脱氧尿苷标记、免疫荧光染色检测细胞增殖、分化情况;通过与骨骼肌植块共培养观察神经干细胞向运动神经无样细胞的分化情况.结果:大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原;诱导分化后结果显示.骨骼肌植块组有7.87%的细胞呈胆碱乙酰基转移酶阳性.与10%胎牛血清组(0.94%)比较具有统计学意义.结论:从大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,骨骼肌植块可诱导脊髓神经干细胞分化为运动神经元样细胞.     

氯化汞对金黄地鼠胚胎发育的影响

目的 探讨氯化汞(HgCl2)对金黄地鼠胚胎发育的影响.方法 实验组于妊娠第6天开始经口灌服不同浓度的氯化汞水溶液,连续灌服5d,对照组在同一时间经口灌服蒸馏水.于孕第14天处死取胎,计录活胎数、死胎数、吸收胎数、植入数、畸形数,对活胎逐个检查外观并称重,测量其顶臀长;用HE染色方法对第8,9,10天胎鼠神经管进行形态学观察.结果 与对照组比较,经口灌服2mg/kg体重的氯化汞水溶液,对金黄地鼠胚胎体重和顶臀长的影响无显著差异,3mg/kg体重和4mg/kg体重的氯化汞水溶液对金黄地鼠胚胎的发育有一定的抑制作用,随着氯化汞剂量的增加,体重相应降低,但各实验组均未发现胎鼠畸形,HE染色结果显示,神经管形态与对照组相比无显著差异.结论 氯化汞对金黄地鼠胚胎发育有一定抑制作用,未检测到各种畸形.     

鼠胚神经上皮细胞原代培养的形态学观察

应用倒置相差显微镜、扫描电镜、透射电镜和免疫细胞化学技术，对原代培养的神经细胞进行形态学观察。结果显示：接种后１０ｈ，少数细胞开始贴壁；２４ｈ时，大部分细胞贴壁，突破延长并互相连接，部分细胞ＮＳＥ免疫染色呈阳性；３ｄ时，胞体增大，突破互相连接成神经网络，胞核大，形态规则，胞质内含较多的粗面内质网和线粒体，高尔基复合体发达；７ｄ时神经细胞晕光明显，胞体饱满，ＮＳＥ免疫阳性细胞增多；１４ｄ时，神经细胞     

缺氧对体外培养的鼠胚神经干细胞分化的影响

目的分离大鼠胚胎皮质神经干细胞（NSCs）进行体外培养,探讨缺氧对体外培养的鼠胚大脑皮质神经干细胞分化的影响。方法对孕14d（E14d）大鼠取鼠胚脑皮质用无血清培养技术分离培养神经干细胞,血清：培养基贴壁诱导分化。通过免疫细胞化学染色检测细胞分化情况;NSCs采用三气培养箱予以不同缺氧干预,缺氧培养后再用10％胎牛血清培养基进行贴壁分化,用MAP2免疫荧光染色检测缺氧对NSCs向神经元方向分化的影响。结果①大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原;②缺氧干预实验中,5％O2组尤以72h组可诱导NSCs向神经元方向分化。结论从大鼠胚胎皮质可成功分离NSCs,缺氧可影响NSCs的分化,适度缺氧可诱导离体培养的大鼠脑皮质NSCs向神经元方向分化。