SYBR Green荧光定量PCR检测外源ATP7B对于内源CP基因转录的影响

[目的]应用SYBR Green荧光定量PCR检测在正常BRL细胞中短暂转染人ATP7B cDNA后CP基因的转录情况.[方法]分为空质粒组(转染空质粒Kbpala/Alb)和处理组(转染野生型Kbpala/Alb-ATP7B),分别于转染后0、4、8、12、24、48、72、168 h提取mRNA,逆转录后行SYBR Green荧光PCR检测人ATP7B cDNA及大鼠CP基因的转录情况.SAS11.0统计软件进行数据处理和分析.[结果]人ATP7B cDNA在短暂转染后约48h转录达高峰,可持续至转染后7 d以上;经方差分析,空质粒组转染后各时间点CP基因的转录水平与t=0 h相比较P＞0.05;处理组亦是.[结论]外源ATP7B cDNA的转染及表达对于内源性CP基因的转录无影响.     

神经内镜治疗脑室内病变

目的探讨脑室内病变的神经内镜治疗。方法应用神经内镜对68例脑室内病变进行治疗,其中松果体区肿瘤16例,囊性颅咽管瘤15例,丘脑肿瘤14例,脑室内囊肿16例,侵及室管膜下的胼胝体肿瘤3例,侧脑室脉络丛乳头状瘤2例,侧脑室猪囊尾蚴病1例,侧脑室内分流管脱落1例。结果随访17～69个月,56例有效,12例死于肿瘤扩散。无严重并发症。结论对脑室内病变选择性应用神经内镜治疗安全、有效。     

年轻人腹主动脉瘤九例临床分析

目的探讨年轻人腹主动脉瘤(AAA)的临床特征、治疗和预后。方法回顾性分析244例AAA中9例(37%)年龄小于35岁的年轻患者的诊治经过。结果本组男7例,女2例,年龄21～35岁,临床表现腹部或腰背部痛、腹部搏动性肿物。瘤体直径(65±09)cm。4例行择期手术均成功,3例急诊手术1例成功,2例入院后未能手术治疗者均死亡。结论年轻人的AAA有病程短、瘤体较大且较多累及腹主动脉近端,症状重的特点,应尽早手术治疗。     

Rosiglitazone down-regulates lipopolysaccharide-induced expression of CD40 and intercellular adhesion molecule 1 in rat peritoneal mesothelial cells through a NF-κB dependent mechanism

Objective To investigate the effect and mechanism by which PPARγ ligand, rosiglitasone, regulates the expression of CD40 and intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) in the rat peritoneal mesothelial cells (RPMCs) induced by lipopolysaccharide (LPS). Methods RPMCs were harvested from Sprague-Dawley rat peritoneal cavity and maintained under defined in vitro conditions. The cells were randomly divided into groups as follows: medium, LPS (5 mg/L), LPS (5 mg/L)+BAY11-7085(5 μmol/L, NF-κB inhibitor), rosiglitazone (10 μmol/L or 20 μmol/L, peroxisome proliferator-activated receptor γ activator), LPS (5 mg/L)+rosiglitazone (10 μmol/L)+GW9662 (3 μmol/L, peroxisome proliferator-aetivatcd receptor γ antagonist), and LPS (5 mg/L)+vehicle (DMSO 0.2 ml/L). The expressions of CD40 and ICAM-1 RNA in RPMCs were examined by RT-PCR after 3 hour treatment, and the protein expressions of CD40, ICAM-1, p-NF-κB p65 and p-IκBα were examined by Western blot or immunofluorescence after 24 hour treatment. Results Following treatment with LPS, both the expressions of CD40 and ICAM-1 protein in RPMCs were up-regulated significantly (P<0.05), and the phosphoralation of p65 was increased greatly (1.10±0.17 vs 0.55±0.06, P<0.05). BAY11-7085 (5 μmol/L) significantly decreased the protein expression of p-p65 (0.22±0.11 vs 1.10±0.17, P<0.01), CD40 (0.34±0.02 vs 0.50±0.06, P<0.05) and ICAM-1 (0.35±0.16 vs 0.74±0.03, P<0.05). Pretreated with rosiglitazone for 3 h then added with LPS for 1 h, the levels of p-p65, CD40 and ICAM-1 in RPMCs were significantly decreased compared with those of LPS group (0.77±0.08 vs 0.90±0.10, P相似文献   

2003年10个引人关注的肿瘤临床试验

本工作由Pennsylvania大学Abramson癌症中心在2004年1月肿瘤新闻简报中评选而出，其共同特点如下：1．文献的主要来源是2003年度的NEJM(5篇)、ASCO(3篇)、JCO(2篇)。2．各入选文献都是结果有统计学意义的多中心大样本量研究。3．都使肿瘤学家对原来的标准治疗模式重新思考和质疑。4．关心的主要焦点是乳腺癌、结直肠癌、肺癌和白血病。5．显示出对靶向治疗的关注。编译者在此基础上参照原文进行了改写。     

进展期霍奇金病经化疗达完全缓解后,巩固放疗的Meta分析

目的 应用Meta分析的方法评价进展期霍奇金病经化疗达完全缓解后巩固放疗的作用。材料和方法 在MEDLINE、CBMdisc数据库检索进展期霍奇金病化疗达完全缓解行巩固性放疗或不行巩固性放疗的前瞻性随机对照研究。对入选研究的总生存、无事件生存优势比进行Meta分析。结果 4项研究入选，以α=0．05为检验水准，巩固性放疗组与对照组(不作巩固性放疗)相比，5年总生存优势比=1．18，P=0．46；5年无事件生存优势比=1．05．P=0．83：巩固性侵犯野放疗组与对照组相比，5年总生存优势比=0．96，P=0．87。结论 进展期霍奇金病经化疗达到完全缓解后，巩固性放疗对总生存及无事件生存均无益处。     

血利钾心停搏液和双向灌注心肌保护的实验研究

目的 通过与三种经典心肌保护方法比较，探讨含血利多卡因高钾(血利钾)心停搏液和双向灌注心肌保护法的心肌保护作用。方法 犬20只，随机分成四组(n=5)，分别用晶体心停搏液(CGI)、冷稀释血心停搏液(CG2)、常温稀释血心停搏液(CG3)及血利钾心停搏液(EG)。每组均经历120min心脏缺血。观察心脏停搏情况、冠状静脉窦回流血量及心肌酶浓度、心肌细胞内钙离子(Ca^2 )和丙二醛(MDA)及三磷酸腺苷(ATP)含量、心肌形态学改变。结果 ①实验组(EG)心脏停搏时间短，心停搏液用量少，冠状静脉血流量及心肌氧摄取率在缺血前后无明显变化；②血清心肌酶水平各组间无显著差异；③EG再灌注心肌Ca^2 超负荷及ATP含量下降较CG3明显，与CG2相似；④EG再灌注心肌MDA水平较CGI显著降低。⑤心肌形态学改变各组间无显著差异。结论 血利钾心停搏液和双向灌注具有确切的心肌保护作用。     

甘油三酯对血管内皮细胞GRK2表达时序性的研究

[目的]探讨甘油三酯对血管内皮细胞G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)时序性表达的影响.[方法]体外培养人血管内皮细胞(EAhy926),在培养基中加入终浓度为150mg/L的甘油三酯进行时间效应实验,于0、3、6、12、24、36h收集细胞后立即进行蛋白抽提,用Westernblot检测甘油三酯作用后血管内皮细胞GRK2的改变.[结果]0、3、6、12、24和36h组GRK2/Actin灰度比值分别为0.31±0.02、0.41±0.02、0.49±0.03、0.54±0.04、0.61±0.11、0.59±0.05.随着甘油三酯作用时间延长,GRK2含量呈时间依赖性增加,24h达到高峰.[结论]甘油三酯可能通过上调血管内皮细胞的GRK2,导致内皮细胞功能障碍,从而参与了动脉粥样硬化的发生发展进程.     

Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因第2外显子核酶对靶RNA的体外切割活性的研究

目的 体外研究锤头型α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段核酶对各自靶RNA分子的切割活性及反应条件。同时观察两反义核酶对瘢痕中成纤维细胞胶原合成的影响。方法 将含α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段的重组质粒(pT-Ⅰ、pT-Ⅲ)，经体外^32P标记转录后形成产物靶RNA。同时将含特异性核酶基因的重组质粒(pT-gⅠ、pT-gⅢ)进行非标记的体外转录，产物(核酶)与各自的^32P-靶RNA按不同的条件混和反应，电泳后放射自显影观察结果。将构建好的核酶以脂质体包裹后导入培养的成纤维细胞内，采用图像分析法观察核酶对成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA合成的影响。结果 两种核酶在37℃、42℃均能有效切割各自的靶RNA，对Mg^2 浓度的要求范围较宽(10～20mmol／L)；反应温度从65℃逐渐降至并维持在37℃的条件下核酶切割活性显提高。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达明显降低，胶原蛋白生成降低，胶原生成明显受抑制。结论 针对α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段的核酶能有效地在体外对靶RNA进行切割并能有效地抑制瘢痕中成纤维细胞胶原的合成。     

应用超声刀行腹腔镜下全子宫切除术103例分析

【目的】探讨应用超声刀进行腹腔镜下全子宫切除术的方法及优点。【方法】对103例使用超声刀进行腹腔镜下全子宫切除的患进行回顾性分析。患年龄38—60岁，平均45．5岁，其中难治性功能性子宫出血7例，子宫内膜不典型增生3例，子宫肌瘤69例，子宫腺肌症24例，36例患既往曾有下腹剖腹手术史。【结果】103例患中，全子宫加双侧附件切除术8例，加单侧或双侧卵巢囊肿剔除术16例，需行盆腔粘连分解及盆腔子宫内膜异位症术中处理14例，单纯全子宫切除术65例，所有患均经腹腔镜下完成手术。无中转开腹患，无手术并发症发生。【结论】使用超声刀进行腹腔镜下全子宫切除术是一种安全、快捷的手术方式。值得推广应用．