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目的 研究人转化生长因子β1(TGFβ1)基因修饰对大鼠骨髓树突状细胞(DC)免疫功能的影响。方法 构建TGFβ1-pcDNA3质粒并转染未成熟DC。检测转染后DC的TGFβ1表达及其功能变化,输注1周后柃测TGFβ1-DC在受者脾和淋巴结的分布、T细胞凋亡水平及T细胞端粒酶表达。结果 TGFβ1-pcDNA3质粒转染DC能有效抑制DC的成熟和分化,并下调Dc的多种功能。TGFβ1基因转染不仅能降低DC对LPS的反应,同时抑制DC在MLR中刺激T细胞增殖的能力。TGFβ1-DC输注受者后,1周内可在脾和淋巴结内形成微嵌合,并有效诱导T细胞的凋亡,抑制T细胞端粒酶的活性和表达。结论 TGFβ1基因能有效抑制DC的多种功能,可用于诱导机体免疫耐受。 相似文献
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目的在中国汉族类风湿关节炎(RA)患者中,检测细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)基因中的单核苷酸多态性(SNPs)并进行关联分析。方法用变性梯度凝胶电泳法(DGGE)在326例RA患者和250名健康志愿者提供的血样中检测CTLA-4基因的SNPs(MH30,+49,CT60和J031).分析单个位点的等位基因和基因型频率是否与RA相关。结果在RA患者中,CTLA-4的+49和CT60的等位基因频率及它们的基因型频率显著高于健康对照组(P=0.028和0.007);此两种SNPs构成的4种单倍体的分布状态两组间差异有统计学意义(x^2=10.58,d.f=3,P=-0.014)。结论CTLA-4基因上2个SNPs及单倍体型与中国汉族RA之间存在显著的相关性。 相似文献
3.
目的 分离和克隆肝癌相关基因。方法 我们用高通量功能筛选和RACE(rapidamplificationofcDNAends)方法从人肝cDNA文库中克隆到一个与酵母长寿保障基因LAG1高度同源的人类新基因LASS2 (homosapienslongevityassurancehomologue 2ofyeastLAG1)。结果 LASS2在正常人肝组织和肾组织中高表达 ,其表达谱不同于早先在人中克隆到的另一个与酵母LAG1高度同源的人类长寿保障基因LAG1Hs- 1。放射杂交基因定位显示LASS2位于人类染色体 1q11,酵母双杂交和GST结合实验发现LASS2蛋白能与细胞中的几个膜相关受体或转运体相互作用 ;另外 ,LASS2在体外对人肝癌细胞的克隆形成具有抑制作用 ,提示该基因可能参与细胞的生长调控。结论 LASS2是一个新的肝癌相关基因。 相似文献
4.
一种新的血管生成抑制因子-TSF的设计及表达 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 选择PF4和TSP1的高活性片段设计融合基因-TSF,在大肠肝菌表达,细胞水平上检测表达产物的生物学活性。方法 PF4的C-末端13肽和TSP1的429-459片断31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白-TSF。采用pGEX-2T载体在E.coli JM109中表达TSF蛋白。采用MTT方法测定TSF及其相关性GST-TSF,PF4(58-70),TSP1(429-459)等对血管内皮细胞,平滑肌细胞,QGY7721人肝癌细胞,HLF人肺成纤维细胞等生长的抑制效应。结果 合成的TSF融合基因,克隆到pGEX-2T载体,转化E .coli JM109,获得了TSF蛋白的高效表达。建立了TSF蛋白的纯化复性方法,获得了GST-TSF融合蛋白及TSF蛋白。TSF,GST-TSF,PF4(58-70)和TSP1(429-59)均特异抑制血管内皮细胞的生长,其中TSF的活性最强,活性大小次序为TSF>GST-TSF>PF4(58-70)>TSP1(429-459)。结论 融合表达蛋白-TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长。 相似文献
5.
目的 研究宫内干细胞移植技术在血友病治疗中的应用前景.方法 采用宫内干细胞移植技术将RFP转基因小鼠骨髓单核细胞注射到胎鼠腹腔,在受体小鼠出生后,采用RT-PCR技术检测其嵌合率.结果 在普通昆明幼鼠的移植方面,共注射53只胎鼠,29只出生,受体胎鼠出生率为55%,嵌合频率为79%,单只小鼠平均嵌合率可达5%,最大嵌合率可达21%.在血友病A小鼠的治疗方面,共对21只怀孕母鼠进行了手术,只有5只母鼠成功生产,共产下18只幼鼠,有11只是血友病A(FⅧ基因缺陷)纯合子.11只纯合子代幼鼠有8只在出生时或出生后死亡.所有纯合子代的嵌合率都在1%以下,纯合子代幼鼠的出血时间达10 min以上,并没有凝血迹象.结论 通过宫内干细胞移植技术成功将供体干细胞植入受体胚胎内,并参与了受体胚胎的生长发育过程,证明了该技术在血友病治疗上的可行性,但由于受各种因素的限制,导致目前嵌合率还达不到可治疗的水平,移植方法仍需改进. 相似文献
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目的探讨肿瘤侵袭相关基因EMP3和PCDH-γ-A11的mRNA在原发人脑胶质瘤组织中的表达情况,分析其表达变化与胶质瘤恶性程度的关系。方法分别应用传统的RT-PCR和SYBR Green实时定量PCR检测方法检测EMP3和PCDH-γ-A11基因mRNA在30例原发胶质瘤(WHO分级:Ⅱ级10例,Ⅲ级10例,Ⅳ级10例)和10例正常脑组织中的表达情况。统计学分析两个基因在胶质瘤和正常脑组织间的表达差异,并进一步结合临床资料分析不同分级、不同性别和不同年龄组间的表达差异。结果在各级别胶质瘤中EMP3和PCDH-γ—A11的mRNA与正常脑组织相比均表达下调,并具有显著意义(P〈0.01);EMP3在Ⅱ级和Ⅳ级及Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤间的表达也存在统计学差异(P〈0.05);PCDH-γ—A11在Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤相互之间的表达无统计学差异(P〉0.05)。结论各级别胶质瘤中EMP3和PCDH-γ—A11的mRNA表达均显著低于正常脑组织,并随胶质瘤恶性程度的增加表达量逐渐降低。EMP3基因的表达下调与胶质瘤的恶性程度密切相关。 相似文献
7.
近年来发现一些表观遗传调节方式以及表观遗传特征变化与多种疾病相关。表观遗传机制的失调将影响染色质结构和基因表达,导致复杂的综合征、多因素疾病及癌症。文章就几种常见疾病的表观遗传机制研究进展作一综述。 相似文献
8.
表观遗传调节与常见疾病的发生 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来发现一些表观遗传调节方式以及表观遗传特征变化与多种疾病相关.表观遗传机制的失调将影响染色质结构和基因表达,导致复杂的综合征、多因素疾病及癌症.文章就几种常见疾病的表观遗传机制研究进展作一综述. 相似文献
9.
[目的]评价结核分支杆菌重组Rv3425蛋白在结核病血清学诊断中的价值。[方法]以重组Rv3425作为抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测151份确诊结核病人、143份健康人、38份卡介苗接种阳转者和42份非结核病人血清中的抗结核抗体水平,并与结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)、Ag85B蛋白及TB—DOT、TB-CHECK-1试剂盒的检测结果进行比较,以此来评价重组Rv3425蛋白在结核病诊断上的价值。[结果]Rv3425与PPD和Ag85B抗原一样能够诊断结核病人,但PPD不能有效区分结核病人和BCG接种者,Rv3425和Ag85B蛋白可以明确区分。[结论]虽然重组Rv3425蛋白对结核病的阳性率尚不能与试剂盒媲美,但由于其能够有效区分结核病人和BCG阳转者,在结核病诊断方面具有很大的应用价值,可以作为结核病诊断的备选抗原之一。 相似文献
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As2O3对NB4细胞增殖及凋亡的影响 总被引:6,自引:1,他引:6
目的研究不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对急性粒细胞白血病细胞株NB4(APLM3)凋亡及细胞周期的影响。方法采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测As2O3对NB4的细胞毒活性,流式细胞仪AnnexinVFITC-PI检测细胞凋亡率,溴化丙碇(PI)染色法检测细胞周期。结果1~8μmol/LAs2O3能显著抑制NB4细胞增殖,且这些变化呈明显的时间和浓度依赖关系(时间一剂量效应)。2~8μmol/LAs2O3能显著诱导NIM细胞凋亡,处理时间为12h,其早期凋亡率和总凋亡率均与剂量呈线性正相关;处理时间为24h,其早期凋亡率、中晚期凋亡率和总凋亡率与剂量呈线性正相关;As2O3处理时间为36h和48hNB4细胞以中晚期调亡为主。流式细胞检测表明,不同浓度的As2O3均使NB4细胞周期阻滞在G2/M期。结论As2O3能抑制人白血病NB4细胞增殖,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖使细胞受阻于G2/M期。其诱导凋亡作用具有时间和浓度依赖关系。 相似文献