抗癌铂(Ⅳ)配合物的结构及细胞摄入的动力学和机制的研究

目的分析抗癌铂(Ⅳ)配合物的结构,研究人红细胞摄入这些配合物的动力学和机制.方法利用分子图形模拟方法计算5种口服抗癌铂(Ⅳ)配合物的结构;利用动力学方法测定细胞摄入配合物的速率常数;根据细胞膜蛋白巯基含量和内源性荧光的改变,探讨这些铂(Ⅳ)配合物与人红细胞的作用.结果计算出了5种口服抗癌铂(Ⅳ)配合物的结构;得到了细胞摄入配合物的一级动力学常数;配合物与细胞膜作用过程中,膜蛋白巯基含量变化很小,但膜蛋白的内源性荧光发生了改变.结论人红细胞摄入4个铂(Ⅳ)配合物服从简单扩散的一级动力学过程,速率常数不同,细胞摄入配合物(JM221)不符合一级动力学过程.配合物与细胞膜作用使膜蛋白的构象发生了变化,与膜蛋白和膜脂发生了较弱的作用.     

小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长与血硫氧还蛋白还原酶活性的相关性

背景与目的：研究表明硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase，TrxR）在肿瘤组织中的表达较正常组织中明显增多且活性升高．但关于肿瘤生长与血TrxR活性的关系报道却很少。本实验的目的是研究小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长与血TrxR活性的关系。方法：建立H22肝癌昆明小鼠皮下移植瘤动物模型，分为5组：空白组不接种肿瘤细胞，模型组接种肿瘤细胞，这两组小鼠均给予5％。羧甲基纤维素钠灌胃作为对照；乙烷硒啉低、中、高剂量组均接种肿瘤细胞，并分别灌胃给予36mg／kg、72mg／kg、216mg／kg乙烷硒啉。于肿瘤接种前、肿瘤生长至100mm，给药前、给药第1天、给药第4天及给药第10天5个时间点行眼眶取血，二硫代双硝基苯甲酸（dithio-bis-nitrobenzoic acid，DTNB）法测定血浆TrxR活性。处死小鼠剥离皮下肿瘤，DTNB法测定肿瘤组织TrxR活性。结果：给药结束时低、中、高剂量乙烷硒啉组小鼠的抑瘤率分别达到59．5％、74.3％、74．9％。空白组小鼠血TrxR活性稳定：接种肿瘤后小鼠血TrxR活性随肿瘤体积增大而增加，呈明显正相关；给药结束时，低、中、高剂量乙烷硒啉组小鼠血TrxR活性抑制率分别为59．2％、68．4％、68．9％，而肿瘤组织中TrxR活性抑制率分别为15．3％、25．8％、29．8％。结论：H22肝癌小鼠血TrxR活性与其肿瘤生长呈正相关；不同剂量的TrxR抑制剂乙烷硒啉干预后,血TrxR活性能够被不同程度地抑制，与肿瘤生长的抑制呈一致性．     

稀土离子La3+、Ce3+、Tb3+、Y3+对肌醇磷脂信号系统中蛋白激酶C的作用

以往的研究证明稀土离子(Ln)具有类似磷脂酶C(PLC)的作用[1,2],促进肌醇磷脂(PIP2)水解产生三磷酸肌醇(IP3)和甘油二酯(DAG).已知IP3和DAG分别激活肌醇磷脂信号系统中的IP3/Ca2 和DAG/蛋白激酶C(PKC)两条信号传递途径.DAG激活PKC转位,以磷酸化形式对许多蛋白质和酶类进行修饰,从而调节和控制一系列生理反应.本工作以大鼠肝脏、人红细胞以及K562细胞为研究对象,采用免疫组织化学方法、酶联免疫法(ELISA)以及激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)研究稀土离子La3 、Ce3 、Tb3 和Y3 对PKC的含量、分布和转位的影响.     

一类双哌嗪季铵盐的合成及镇痛活性

以97-9-G4为先导物，设计并合成一系列双哌嗪季铵盐，测定其镇痛活性，研究其构效关系。合成了8个双哌嗪季铵盐5a-h，测定了它们的体内镇痛活性，结果表明先导物97-9-G4中的苯乙基结构为必需的活性基团，苯环上引入吸电子基团有利于提高活性，苯环和哌嗪氮原子的距离为两个碳原子时镇痛活性最好。所合成的化合物具有一定的镇痛活性，但弱于先导化合物97-9-G4，总结出的构效关系对该类化合物的进一步结构修饰具有重要的指导意义。     

选择性封闭卡那霉素A耐药酶羟基衍生物的合成

为寻找能抵抗耐药酶作用的氨基糖苷类抗生素，本文对卡那霉素A的3＇-OH，4＇-OH和2＂-OH位点进行了修饰。合成路线中的关键中间体为引入双苄叉保护基的卡那霉素A衍生物。目标羟基通过苄基化，甲基化和烯丙基化的方法进行修饰。最后通过多步反应脱保护，得到目标产物。活性结果显示，目标产物对敏感菌和耐药菌未显示出良好的抗菌活性。     

壳聚糖对胰岛素透过Caco-2细胞单层的影响

目的：利用Caco-2细胞单层模型研究胰岛素的吸收机制。方法：利用Caco-2细胞单层模型研究壳聚糖浓度、胰岛素初始浓度、合用壳聚糖与羟丙-β-环糊精（HP-β-CD）、转运方向等条件对表观渗透系数的影响，测定了合用壳聚糖与HP．B。CD对跨上皮细胞电阻（TEER）的影响。结果：当壳聚糖浓度增加时，胰岛素的渗透量也随之增加，其中0％，0．5％及1．0％壳聚糖三者问的渗透系数有显著差异（P〈0．05），而1．0％及1．5％壳聚糖间的渗透系数没有差别（P〉0．05）；当胰岛素初始浓度增加时，胰岛素在单位时间内的累积渗透量也随之增加；5％HP—β—CD与1％壳聚糖共用时与单用1％壳聚糖相比，其渗透系数有所提高（P〈0．05）；顶端到底端方向上的渗透系数大于底端到顶端方向上的渗透系数（P〈0．05）；当1．0％壳聚糖与5％HP—β—CD台用时与单用1．0％壳聚糖相比，其跨上皮细胞电阻进一步降低（P〈0．05）。结论：胰岛素是以被动扩散的方式通过细胞旁路进行转运的，在吸收促进剂5％HP—β—CD和1％壳聚糖联合作用下，药物经细胞旁路的转运量增加。     

4，6—二氯—2—甲基—5—[（1—乙酰基—四氢咪唑—2—亚基）氨基]嘧啶合成工艺改进

4,6-二氯 - 2 -甲基 - 5- [(1 -乙酰基 -四氢咪唑 - 2 -亚基 )氨基 ]嘧啶 (1 )是合成抗高血压药物莫索尼定(moxonidine)的重要中间体。文献 [1] 以 4,6-二氯 - 2 -甲基 - 5-氨基嘧啶 (2 )和 1 -乙酰基 - 2 -四氢咪唑酮 (3)在三氯氧磷中 ,于 50°C反应 48h,蒸除三氯氧磷 ,残留物倒入冰水中 ,用碳酸氢钾调至 p H8,以氯仿萃取 ,蒸除氯仿后以甲醇 -乙酸乙酯重结晶得产品 ,收率 52 %。我们按文献操作时 ,发现因后处理所用碳酸氢钾碱性太弱 ,因而用量多 ,且产生大量的气泡 ,操作繁琐。中和后析出很多固体 ,造成萃取困难 ,氯仿用量大 ,提取次数多…     

对甲氨基苯甲酰谷氨酸二乙酯的合成方法

目的:寻找一条合成N-[4-(甲氨基)苯甲酰基]-L-谷氨酸二乙酯的最佳方法.方法:以对氨基苯甲酰谷氨酸二乙酯(2)为起始物,经苄基化、甲基化组合成的"一锅"反应,高产率地制备了N-[4-(N-苄基-N-甲氨基)苯甲酰基]-L-谷氨酸二乙酯(3),化合物3经Pd/C催化氢化脱苄基,得到了目标化合物N-[4-(甲氨基)苯甲酰基]-L广谷氨酸二乙酯(1).结果:合成目标化合物只需2步反应,反应时间仅6 h,总产率达到88%,目标化合物通过1HNMR和Ms鉴定结构正确.结论:利用上述方法可以方便高效地制备N-[4-(甲氨基)苯甲酰基]-L-谷氨酸二乙酯.     

稀土离子及其柠檬酸配合物诱导人红细胞的溶血作用

目的:研究稀土离子Ln3+及其柠檬酸根配合物[Ln(Cit)2]3-诱导人红细胞的溶血作用.方法:将不同浓度的Ln3+或[Ln(Cit)2]3-与人红细胞温育后,用分光光度法测定离心上清液中的血红蛋白浓度,计算相对溶血率H%.用外推法确定临界溶血浓度cH0.结果:14种稀土离子对人红细胞的临界溶血浓度cH0已经确定;发现[Ln(Cit)2]3-的H%～c关系曲线为非对称的"钟"型曲线,结论:稀土离子Ln3+具有较低的临界溶血浓度,这说明Ln3+与红细胞有较强的作用及细胞毒性.[Ln(Cit)2]3-诱导的人红细胞相对溶血率H%与稀土离子在介质中的物种分布有关.     

牛血清白蛋白、柠檬酸根和二价金属离子对人红细胞和兔小肠刷状缘囊泡摄取稀土离子的影响

目的:研究人红细胞(human erythrocytes,HRC)和兔小肠刷状缘囊泡(rabbit intestinal brush-border membrane vesicles,BBMV)对稀土离子Ln3+的摄入,以及牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、柠檬酸根(Cit3-)和二价金属离子(M2+)的影响.方法:在溶液中有或无BSA (或Cit3-、Cu2+、Co2+、Zn2+、Cd2+、 Pb2+)的条件下,在HRC或提取的BBMV与Ln3+温育后,用ICP或ICP-MS测定HRC胞浆及膜或BBMV中Ln3+及M2+的含量.结果:被研究的Ce3+、Gd3+、Yb3+离子都能跨膜进入人红细胞,BSA 对Ce3+和Yb3+的跨膜输运有促进作用,但对Gd3+无影响.Pb2+、Cu2+、 Co2+、 Zn2+对HRC膜结合Ce3+量无影响,但Cu2+促进Ce3+跨膜进入细胞内.Ce3+促进细胞对Co2+摄入,但Co2+和Zn2+几乎完全抑制了Ce3+的跨膜输运.BBMV可以结合Ce3+、Gd3+、Lu3+和Cu2+、Pb2+、Cd2+ ; Cit3-抑制Ln3+的结合,抑制率随[Ln(Cit)2]3-稳定性增加而增加;Ce3+和Pb2+或Cd2+之间相互抑制其与BBMV的结合,但Cu2+促进Gd3+与BBMV的结合.结论:在HRC和BBMV对Ln3+和M2+的摄取中,Ln3+和M2+间存在着某些拮抗或协同作用,这些作用与Ln3+和M2+的性质有关.