B型钠尿肽基因的克隆和原核表达载体构建及纯化

目的: 克隆人B型钠尿肽(脑钠素,B-type natriuretic peptide,BNP)基因,纯化其表达蛋白并制备多克隆抗体。方法: 用PCR技术从正常成人心脏组织cDNA库中扩增出人BNP基因,将其克隆进pUCm-T中并测定核苷酸序列。构建大肠埃希菌分泌性表达载体pGXE4T-2/BNP,用异丙基β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,GSH-agarose亲和纯化表达蛋白,用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。结果: 经PCR扩增成功获得96bp的BNP基因,测序正确,在大肠埃希菌中融合表达后,该蛋白的表达量占菌体总蛋白的19%,用SDS-PAGE和Westernblot鉴定大肠埃希菌中的表达产物,显示其相对分子量29500。经亲和纯化后GST-BNP的纯度可以达到95%,500ml菌液中得到纯化蛋白9.6mg。多克隆抗体的效价为1:32000。结论: BNP基因的克隆、表达和纯化成功以及多抗的获得,为建立BNP检测方法奠定了基础。     

液相杂交技术在聚合酶链反应酶联免疫检测的应用

目的采用液相杂交技术,简化核酸杂交过程,建立乙肝病毒（HBV）的液相杂交的聚合酶链反应-酶联免疫检测（PCR-ELISA）方法。方法将5′端标记生物素的PCR扩增产物与5′端标记地高辛的探针呈液相混合,90℃2min,55℃1min杂交。杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定,经酶标记抗地高辛标记抗体结合、显色。结果液相杂交酶联免疫检测条件优化探针浓度3pmol/次,酶标记抗体稀释度1∶1000。液相杂交时间3min,固相杂交时间120min,但其检测结果无明显差别。检测灵敏度1×10     

上海市某区中学生抑郁与失眠的相关性分析

目的 了解上海市某区中学生抑郁与失眠的发生情况,探索两者之间的关系.方法 采用多阶段分层整群抽样的方法,在上海市某区随机抽取初中学生304人、高中学生176人和职业学校学生99人进行问卷调查.问卷内容包括人口学特征、抑郁与失眠发生情况等.结果 在579名调查对象中,轻度抑郁的有110人(19.0％),中度抑郁的有64人...     

范忠泽辨治小儿神经母细胞瘤经验

范忠泽教授认为小儿神经母细胞瘤的病因分为胎产因素及外感六淫、邪毒侵袭、饮食失节、情志所伤、接触有毒之品等导致气血运行不畅,痰凝气滞血瘀,聚而成瘤。临床难点是小儿五脏六腑形气皆不足,中医辨证为肺脾肾气虚,治则是调补肺脾肾,扶正为本不忘祛邪。临床谨守病机,辨证论治,颇有良效。     

周端治疗高血压病经验

周端教授认为血瘀阳亢为高血压病的基本病机,强调治疗高血压病辨病与辨证相结合;注重活血潜阳法治疗高血压病。根据高血压病的不同阶段,把活血化瘀贯穿于治疗的全过程;组方遵循通补兼施,动静结合;重视治疗高血压病力求寻找中医药有效作用靶点。     

基层突发公共卫生事件应急处置能力建设探讨

突发公共卫生事件不仅造成较大的经济损失,还给人们的生命健康带来了较大的威胁。因此,基层突发公共卫生事件的有效防控引起了各基层单位的重视和关注。各基层单位在加强体系建设、构建突发公共卫生机制、提升各方面的能力、补齐公共卫生服务短板、构建基层互联网+防疫的新模式等后,力求全面提升基层突发公共卫生事件的应急处置能力,在完善社区治理的前提下能够保障各项突发卫生事件的有效防控,确保患者能够第一时间接受到治疗,提高救治率。     

杨氏絮刺火罐联合电针治疗风寒痹阻型退行性腰椎管狭窄症的临床随机对照研究

目的观察杨氏絮刺火罐联合电针治疗风寒痹阻型退行性腰椎管狭窄症(DLSS)的临床疗效。方法将60例DLSS患者随机分为治疗组与对照组,每组30例。治疗组予杨氏絮刺火罐结合电针治疗,对照组予经皮神经电刺激疗法联合物理牵引。两组疗程均为8周,观察临床疗效,比较简化中文版腰椎管狭窄特异性评价量表(SC-SSS)评分的变化情况。结果①试验期间,治疗组脱落1例,最终完成试验者59例。②治疗组、对照组总有效率分别为89.66%、80.00%,组间总有效率比较,差异无统计学意义(P0.05)。组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。③组间治疗4周时及治疗8周时比较,症状严重度、生理功能评分差异有统计学意义,治疗组明显低于对照组(P0.05)。结论与单纯物理疗法相比,杨氏絮刺火罐联合电针治疗风寒痹阻型DLSS的疗效更佳,可明显改善患者的腰腿痛及间歇性跛行,减轻下肢麻木。     

上海市大气污染对小学生肺功能小气道指标的急性效应研究

目的 分析上海市复合型大气污染对儿童肺功能小气道指标的急性影响。方法 在上海市内环、中环和外环各选择一所小学（A、B和C）,每所学校各随机抽取3~5年级一个班级学生为研究对象（共233人）;A、B两校于2013年12月和C校于2014年12月测试肺功能3次,各校分别于次年5-6月测试第4次肺功能。同时收集同期三校就近环境空气质量监测点大气细颗粒物（PM_2.5）、可吸入颗粒物（PM₁₀）、二氧化硫（SO₂）和二氧化氮（NO₂）污染物数据和气象监测数据;采用线性混合效应模型分析大气污染对肺功能小气道指标的影响。结果 控制气象因素和个体因素后,PM_2.5、PM₁₀滞后2 d和累计滞后2 d、SO₂累计滞后2 d和NO₂检测当日浓度每增加一个四分位间距（IQR）,儿童25%肺活量最大呼吸流速（MEF_25%）、50%肺活量最大呼吸流速（MEF_50%）、75%肺活量最大呼吸流速（MEF_75%）和用力呼气中段流速（FEF_25%~75%）均有不同程度的降低（P<0.05或P<0.01）;双污染物模型分析显示SO₂和NO₂分别叠加PM_2.5和PM₁₀污染时,滞后效应值大于SO₂和NO₂单独存在时（P<0.05）。结论 上海市大气污染物短期暴露与儿童肺功能小气道指标变化呈负相关,并存在滞后效应及累计滞后效应。     

上海市社区老年人轻度认知障碍的潜在危险因素

目的探寻社区老年人轻度认知功能障碍(MCI)的潜在危险因素,为MCI的一级预防提供依据。方法对上海市社区的老年人进行一项横断面研究。选择了368名年龄在65~80岁的受试者,完成简易智力状态检查量表(MMSE)、基本信息问卷调查和体格检查。采用Logistic回归分析MCI的潜在危险因素。结果所有参与调查的368名受试者中,共53例MCI患者,患病率为14.4%。单因素分析发现:高龄,受教育程度低,无叶酸补充,中风,骨质疏松症和高脂血症是MCI的危险因素。Logistic回归分析显示,高龄[OR=1.146(95%CI:1.052~1.249)]和骨质疏松症[OR=2.371(95%CI:1.042~5.396)]是MCI独立危险因素,高教育程度[OR=0.073(95%CI:0.011~0.478)]是保护因素。年龄可以影响MMSE评分各方面(所有P值<0.05)。定期补充叶酸的受试者MMSE评分更高,特别是语言能力得分(P=0.002)。骨质疏松症患者注意力和计算力得分较低(P=0.022)。结论MCI患病率随年龄增长而增加,教育程度低、骨质疏松症可能是老年人MCI的独立危险因素。叶酸补充剂虽与MCI间未观察到相关性,但可以改善其语言和实践表现。     

小细胞肺癌预防性脑放射治疗

小细胞肺癌经过前期治疗有效者需要进行预防性脑放射治疗,然而临床应用时临床医生仍存在一定顾虑。本文就近年来临床研究数据阐明了预防性脑放射治疗(PCI)临床价值,回答了一些临床应用的疑问并给出了PCI应用的推荐。