八肽胆囊收缩素对正常及脑缺血大鼠大脑皮层NO水平的调节作用

目的 探讨中枢八肽胆囊收缩素(CCK—8)对正常及脑缺血大鼠脑组织一氧化氮(NO)水平的影响及其可能的机制。方法 给正常或局部脑缺血1h再灌注24h大鼠脑室内(icv)分别注射体积均为5μl的溶剂(人工脑脊液)、CCK—8、丙谷胺或丙谷胺十CCK—8。给药后25h分别取正常大鼠的大脑皮层及脑缺血大鼠缺血中心区、半暗区、非缺血半球皮层，检测脑组织NO水平及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果 (1)与假手术组相比，缺血溶剂组大鼠脑缺血中心区及半暗区NO水平显著增加(P＜0．05)，缺血CCK—8组NO水平无明显变化；与缺血溶剂组相比，缺血CCK—8组脑缺血中心区及半暗区NO水平显著降低(P＜0．05或0．01)；缺血CCK—8组非缺血半球皮层NO水平显著高于假手术组(P＜0．05)，而缺血溶剂组非缺血半球NO水平的升高不明显。(2)正常大鼠给CCK—8后，脑皮层NO水平、NOS活性明显升高(P＜0．05或0．005)，丙谷胺可部分拮抗这一作用；单独给丙谷胺对NO水平、NOS活性无影响。结论 中枢给予CCK—8对局部脑缺血再灌注引起的脑皮层缺血中心区及半暗区NO水平的升高具有抑制作用；对正常脑皮层组织NO水平、NOS活性有上调作用，丙谷胺可部分拮抗这一作用。     

八肽胆囊收缩素对家兔内毒素休克时主动脉及肺动脉反应性改变的影响

目的 观察八肽胆囊收缩素（CCK-8）对脂多糖（LPS）引起的家兔内毒素休克（ES）时肺循环，体循环血压变化以及离体主动脉，肺动脉反应性变化的影响。方法 健康新西兰大耳白色雄性家兔，体重2.0-2.1kg，乌拉坦静脉麻醉（1g/kg bw)，随机分为5组（每组8只），生理盐水组（对照组）；LPS组；LPS8mg/kgi.v复制家兔ES模型；LPS CCK组：CCK-815μg/kgi.v.15min后注入LPS；LPS 丙谷胺（Pro)组；Pro1mg/kgi.v,15min后注入LPS；CCK组；CCK-815μg/kgi.v，利用多导生理记录仪持续监测肺动脉压（PAP）和平均动脉压（MAP）的变化；5h后放血处死，制备主动脉环（TARs)和肺动脉环（PARs)。应用血管张力测定技术，检测离体主动脉，肺动脉反应性。结果 （1）CCK-8在ES时可部分逆转MAP降低，完全翻转肺PAP增高；而Pro加剧ES的上述效应。（2）在离体实验中，LPS组的PARs对苯肾上腺素（PE）的收缩反应增强，PE（10^8-10^-5mol/L)剂量反应曲线左移；对乙酰胆碱（ACh)内皮依赖性舒张反应降低，ACh(10^-8-10^-5mol/L)剂量反应曲线右移；CCK-8逆转子LPS的上述作用，CCK-8对正常肺动脉舒缩反应无明显影响。在实验条件下，各组的TARs对PE的收缩反应无明显差异。可能与本实验整体观察时间较短有关，对ACh的舒张反应各组有所差异。结论 CCK在整体水平时ES发病时肺循环，体循环血压具有调节作用，并从离体水平揭示了CCK可通过对肺动脉，主动脉反应性改变的影响来调节ES时的肺循环，体循环血压。     

氧化石墨烯负载多柔比星对多发性骨髓瘤细胞的杀伤作用

BACKGROUND: Cytotoxicity of graphene oxide to normal cells is relatively low, but whether graphene oxide loaded with doxorubicin has some effects on malignant cells is rarely reported. OBJECTIVE:To explore the cytotoxicity of graphene oxide loaded with doxorubicin on multiple myeloma cells. METHODS:Multiple myeloma cell line RPMI8226 in logarithmic phase was selected, cultured and divided into four groups, including graphene oxide loaded with doxorubicin, doxorubicin and graphene oxide groups as well as control group with no intervention. After 24 hours of culture, the cell activity was detected by cell counting kit-8 method, and the cell cycle and apoptosis were detected using flow cytometry. RESULTS AND CONCLUSION: Plump-shaped cells with translucent and clear cytoplasm were found in the control group; cells with relatively translucent cytoplasm, and even a few shrunken cells appeared in the graphene oxide group; cellular morphology was in a heterogeneity, apoptotic bodies appeared in the doxorubicin group; the cells was significantly reduced in size, presenting more obvious shrinkage and apoptotic bodies in the group of graphene oxide loaded with doxorubicin. The cell survival rate in the graphene oxide loaded with doxorubicin, doxorubicin and graphene oxide groups was significantly lower than that in the control group (P < 0.05), and this indicator was significantly lower in the group of graphene oxide loaded with doxorubicin than the graphene oxide group (P < 0.05). The apoptotic rate in the group of graphene oxide loaded with doxorubicin and doxorubicin group was significantly higher than those in the graphene oxide and control groups (P < 0.05), respectively. Additionally, there were no significant differences in the cell cycle among groups. These results show that graphene oxide loaded with doxorubicin has a stronger cytotoxicity, and can induce apoptosis in human multiple myeloma cells.     

PTEN基因转染对白血病细胞VEGF调控作用的影响

目的:探讨在白血病细胞中与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin hemology deleted on chromosome ten gene,PTEN)对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体1(VEGF receptor 1,VEGFR1)调控作用的影响.方法:将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血病急变细胞株K562,实时荧光定量PCR法检测不同转染组细胞中PTEN、VEGF和VEGF1 mRNA表达水平,Western印迹法检测PTEN、VEGF、Akt和磷酸化Akt蛋白的表达水平,并采用Transwell小室侵袭实验检测不同转染组细胞的侵袭性.通过MTT实验及FCM法检测PTEN基因对脐静脉内皮细胞株ECV304增殖和凋亡的影响.通过鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)体内血管生长实验检测PTEN基因对鸡胚血管生成的影响.结果:与空载体腺病毒(Ad-GFP)相比,Ad-PTEN-GFP 转染人白血病细胞K562后,VEGF及其受体的表达被明显抑制,并呈剂量依赖性负相关;同时,Ad-PTEN-GFP 转染后K562细胞侵袭能力明显减弱.PTEN基因转染能够抑制血管内皮细胞ECV304增殖,并促进其细胞凋亡,细胞周期阻滞在S期.PTEN基因转染可明显抑制CAM血管生长.结论:肿瘤抑制基因PTEN能够抑制内皮细胞增殖和白血病细胞侵袭,其作用机制可能是负调控白血病细胞VEGF表达以及抑制肿瘤血管新生.     

细胞因子受体-JAK激酶信号通路与骨髓增殖性疾病

0引言 细胞因子受体-JAK-STAT通路是一条重要的细胞增殖信号转导通路,该通路的激活对促进细胞增殖、抑制细胞凋亡具有重要作用.上述信号通路中血小板生成素受体(MPL),JAK激酶突变的发现为真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性骨髓纤维化(IMF)等BCR/ABL融合基因阴性的骨髓增殖性疾病(MPD)的分子发病机制研究奠定了基础.研究发现JAK2V617F组成性激活活性需要Ⅰ型细胞因子受体的参与才能发挥作用.细胞冈子受体突变亦可引起某些MPD的发生,如MPLW515L.下面对细胞因子受体-JAK信号转导通路在MPD中的作用作一综述.     

整合素信号转导通路对K562细胞凋亡的影响

目的探讨整合素介导的细胞凋亡抑制途径是否参与了慢性粒细胞白血病（CML）急变期细胞株K562细胞的凋亡耐受机制,以求为CML的治疗提供新思路。方法流式细胞术和丫啶橙双色荧光显微镜分析检测抗整合素α5β1单抗（Anti-α5β1）对K562细胞凋亡的影响,Western blot 技术和RT-PCR技术分析Anti-α5β1对K562细胞内凋亡相关因子PI3K、AKT和survivin表达的影响。结果Anti-α5β1可通过抑制K562细胞内PI3K和survivin mRNA的表达,下调AKT和PI3K蛋白表达水平及蛋白磷酸化水平诱导K562细胞凋亡。抗整合素α5β1抗体的促凋亡能力强于IFNα-2b,其原因可能与IFNα-2b不能显著降低PI3K和p-AKT表达水平有关。结论整合素α5β1介导的PI3K-AKT-survivin信号转导通路参与了K562细胞的凋亡耐受。     

整合素α5β1介导的PI3K-AKT信号分子在CML发病机制中的作用

摘 要　目的：研究整合素α5β1介导的PI3K-AKT信号转导通路在慢性髓细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）发病机制中的作用。方法：流式细胞术检测不同剂量抗整合素α5β1单抗（Anti-α5β1）作用后白血病K562细胞的凋亡率, Western blotting检测健康志愿者、CML急变期患者、K562细胞和Anti-α5β1处理的K562细胞中PI3K和AKT蛋白的表达水平。结果：Anti-α5β1可诱导K562细胞凋亡,并呈剂量依赖性。与健康志愿者比较,CML急变期患者骨髓单个核细胞和K562细胞中PI3K和AKT蛋白的表达水平明显增高（P<0.05）;Anti-α5β1处理后,K562细胞内PI3K、AKT蛋白表达水平明显降低,其磷酸化水平也下降（P<0.05）。结论: 整合素α5β1可能通过影响PI3K-AKT信号转导通路中关键分子PI3K和AKT的表达水平诱导CML祖细胞凋亡耐受,参与了CML的发生、发展过程。     

急性白血病患者化疗前后IL-2及IL-6水平的变化及临床意义

目的研究急性白血病患者化疗前后免疫功能的变化,探讨IL-2L-6的水平与患者预后的关系,并为临床治疗提供理论依据。方法应用放射免疫分析法对84例急性白血病患者进行化疗前后血清IL-2、IL-6含量检测,并与30例正常健康人作对照。结果急性白血病初治组及短期CR组IL-2水平分别为(18.76±9.43)ng/L,(29.48±6.39)ng/L明显低于长期CR组(46.73±8.26)ng/L及正常对照组(53.61±8.92)ng/L;初治组及短期CR组IL-6水平分别为(126.38±15.62)ng/L,(82.34±10.18)ng/L明显高于长期CR组(30.35±7.65)ng/L及正常对照组(23.52±6.25)ng/L。初治组IL-2和IL-6水平与长期CR组及正常对照组比较,差异有显著性,P<0.05。结论初治及短期CR急性白血病患者体内以Th2型细胞因子占优势,造成免疫抑制状态,与IL-2、IL-6水平有关,白血病易于复发。随着CR时间的延长免疫状态逐渐恢复。IL-2、IL-6的水平可作为临床上评估患者免疫状态和预后的指标。     

整合蛋白β1在藻蓝蛋白抑制白血病细胞系K562细胞增殖中的作用

本研究观察不同浓度藻蓝蛋白（phycocyanin）对K562细胞增殖的影响，并检测藻蓝蛋白处理后细胞表面整合蛋白β1表达和胞内黏着斑激酶（FAK）基因表达的变化，探讨整合蛋白β1在藻蓝蛋白抑制K562细胞增殖中的可能作用机制。用流式细胞术（FCM）检测藻蓝蛋白处理前后K562细胞表面整合蛋白β1表达变化；MTT法测定不同浓度藻蓝蛋白对K562细胞增殖的影响；RT—PCR检测不同浓度藻蓝蛋白对K562细胞内FAK基因表达的作用。结果表明：整合蛋白β1在K562细胞上高表达；藻蓝蛋白不能改变其表达量。不同浓度藻蓝蛋白对K562细胞的增殖均有抑制作用。藻蓝蛋白可上调胞内FAK的基因表达水平，恢复整合蛋白β1介导的细胞增殖抑制信号。结论：藻蓝蛋白可能通过增强细胞基质与K562细胞表面的整合蛋白β1结合，上调K562细胞内FAK基因表达水平，恢复整合蛋白β1介导的细胞增殖抑制信号而发挥抑制K562细胞增殖的作用。