EB病毒LMP1抗原肽段LALLFWL对人细胞免疫功能的影响

目的了解EB病毒LMP1抗原肽段LALLFWL对鼻咽癌患者及正常人的细胞免疫功能的影响。方法用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人外周血单个核细胞(PBMC)在LALLFWL肽段作用后IFN-γ分泌斑点数量,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测该肽段与人PBMC一起培养后上清液中IFN-γ的含量。结果鼻咽癌患者及正常人外周血单个核细胞在LALLFWL肽段作用后,其IFN-γ斑点数和含量明显低于无抗原肽段作用的PHA 对照组(P<0.001),在单个细胞水平上,NPC患者分泌IFN-γ能力低于正常人(P<0.05),在培养上清液中,NPC 患者和正常人的IFN-γ浓度差异无显著性(P>0.05)。结论抗原肽段LALLFWL具有降低PBMC分泌IFN-γ的能力,提示该短肽能够抑制细胞免疫功能。     

环境设置对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围神经丝蛋白、突触膜糖蛋白表达的影响

目的观察学习环境对局灶性脑梗死大鼠神经丝蛋白(NF)、突触膜糖蛋白(Syn)表达的影响。方法 SD大鼠110只,随机分为假手术对照组(对照组,10只)和大脑中动脉阻塞(MCAO)组(100只)。MCAO组大鼠采用电凝法造成右侧MCAO模型后,再随机分为独居亚组(30只)、社会交往亚组(社交亚组,40只)和探索学习亚组(探索亚组,30只)。于术后7d、14d、21d、28d分批处死大鼠,用免疫组化染色观察梗死灶周围皮质NF、Syn阳性表达。结果 MACO后7d不同环境设置亚组动物NF的表达水平均低于对照组(P<0.05),但其表达逐渐增高,28d时,探索亚组、社交亚组高于对照组(P<0.05);MCAO后7d、28d不同环境设置亚组梗死灶周围皮质Syn阳性表达均高于对照组(P<0.05);探索亚组于MCAO术后各时间点梗死灶周围皮质NF、Syn表达均明显优于独居亚组和社交亚组(P<0.05,P<0.01);第7天、21天、28天社交亚组NF表达均优于独居亚组(P<0.05),第7天、14天、21天社交亚组Syn表达均优于独居亚组(P<0.05)。结论探索学习环境、社会交往环境能促进梗死灶周围NF、Syn的表达。     

医源性胆管损伤47例

目的探讨医源性胆管损伤的原因、重建时机及胆道重建技术等对疗效的影响。方法回顾性分析47例医源性胆管损伤患者的临床资料。结果本组无手术死亡病例。随诊2～10年,疗效优者41例,优良率达93．6％。结论熟悉解剖关系、丰富的手术经验和思想重视对预防医源性胆管损伤至关重要,胆管损伤的治疗效果主要受再次手术的时间、胆道修复技术等因素的影响。     

依达拉奉对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子和肿瘤坏死因子水平的影响

目的 探讨依达拉奉对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响.方法 84例急性脑梗死患者随机分为依达拉奉组和对照组;在脑梗死常规治疗的基础上,依达拉奉组加用依达拉奉60 mg/d静脉滴注14 d.治疗前、治疗后14 d及28 d应用改良爱丁堡斯堪的那维亚量表( SSS)对患者进行临床神经功能缺损程度评分;应用酶联免疫吸附测定法检测患者发病3d、7d及14 d血清VEGF及TNF-α水平.结果 两组患者治疗14 d及28 d时SSS评分均较治疗前明显降低(P＜0.05 ～0.01),依达拉奉组各时间点SSS评分明显低于对照组(均P＜0.05).两组血清VEGF及TNF-α水平发病后各时间点较正常值明显增高,发病第7d时明显高于第3d和第14 d(均P＜0.05);依达拉奉组各时间点血清VEGF水平明显低于对照组(均P＜0.01);两组各时间点血清TNF-α水平差异无统计学意义.结论 依达拉奉可明显降低急性脑梗死患者血清VEGF水平,减轻脑梗死后自由基导致的脑损害.     

H5N1型流感病毒M2蛋白全长编码基因的克隆与原核表达

目的:构建H5N1流感病毒基质蛋白M2基因的原核表达系统,为研究其在体液免疫中的作用奠定物质基础。方法:应用PCR方法从流感病毒H5N1cDNA中扩增出M2的全基因序列,插入至表达质粒载体pGEX6P-3上,构建重组原核表达质粒pGEX-6p-3/M2。重组质粒经测序分析确认后,转化感受态大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达M2蛋白后,对其表达产物进行SDS-PAGE和Western Bloting分析。结果:PCR扩增的M2基因长度为297bp,经酶切和测序分析,插入到载体的基因与GeneBank公布的序列相似性达100%;SDS-PAGE和Westem Bloting分析显示,经IPTG诱导出分子质量为37.2 KD的目的蛋白。结论:成功构建了H5N1流感病毒基质蛋白M2原核表达载体pGEX-6p-3/M2,并在大肠杆菌中获得表达。     

蝙蝠SARS样冠状病毒S蛋白受体结合域在昆虫细胞中的表达和纯化

目的：在昆虫细胞表达系统中表达蝙蝠SARS样冠状病毒Spike蛋白的受体结合域,并探讨其表达动力学和纯化条件。方法：以PCR扩增蝙蝠SARS样冠状病毒Spike基因的受体结合域片段,产物连接到pMD-T载体,再亚克隆至供体质粒pFAST—HTB,经序列测定确认基因正确克隆,进一步将其转座入Bacmid中,在昆虫细胞S西中进行表达,采用SDS—PAGE和Westernblotting对表达产物进行分析,并通过镍离子螯合树脂纯化重组蛋白。结果：在昆虫细胞表达系统中表达出蝙蝠SARS样冠状病毒Spike蛋白的受体结合域片段,当感染复数（multiplicityofinfectiin,MOI）为2时,重组病毒感染细胞56h后,重组蛋白的表达量达到峰值。结论：蝙蝠SARS样冠状病毒Spike蛋白的受体结合域片段在昆虫细胞表达系统中得到了有效表达,并可通过镍离子螯合树脂纯化重组蛋白。     

针刺对绝经后骨质疏松症伴腰椎压缩性骨折患者临床疗效及生活质量的影响 ——附180例临床资料

目的:观察骨质疏松常规治疗及联合唑来膦酸基础上加用针刺对绝经后骨质疏松症(PMO)伴腰椎压缩性骨折患者临床疗效及生活质量影响。方法:360例PMO伴腰椎压缩性骨折患者随机分为治疗组和对照组,每组180例。对照组予骨质疏松常规西医治疗联合唑来膦酸,治疗组在对照组治疗的基础上加用针刺治疗,2组疗程均为4周。观察并比较2组患者治疗前后L1～L5腰椎和股骨颈骨密度(BMD)值、骨代谢生化指标以及生活质量量表(SF-36)评分的变化,并评估临床疗效,记录不良反应发生率及治疗结束1个月后疼痛复发率。结果:治疗组总有效率为91.67%,明显优于对照组的80.56%(P0.05)。治疗组治疗后L1～L5腰椎和股骨颈BMD值、血清钙浓度、SF-36评分中身体疼痛评分、总体健康评分、活力评分、社会职能、精神健康评分均明显高于对照组(P0.05,P0.01),血清碱性磷酸酶浓度明显低于对照组(P0.01)。治疗组治疗期间不良反应及治疗结束1个月后疼痛复发率均明显低于对照组(P0.01,P0.05)。结论:在骨质疏松常规治疗及联合唑来膦酸治疗基础上加用针刺疗法治疗绝经后骨质疏松症伴腰椎压缩性骨折能改善患者骨质疏松症骨代谢,提高生活质量,减少不良反应发生,降低疼痛复发率,提高临床疗效。     

2种取血方式下SD大鼠血常规及生化指标变化的探讨

目的了解成年雌雄SD大鼠在应激与麻醉两种取血方式下,血常规及生化指标变化趋势。方法初离乳SD大鼠400只,雌雄各半,分20批,喂饲30 d后,禁食16 h,不禁水,前10批应激状态下取静脉血,后10批麻醉后取静脉血,进行血常规及生化共14项指标测定,比较两种方式下各项指标的差异。结果 2种取血方式下,雌雄SD大鼠共有10项指标同时出现差异。结论了解雌雄大鼠在应激与麻醉两种状态下血常规及生化指标差异,对其安全性毒理学评价有重要意义。     

上转换介孔二氧化硅多功能肝癌诊疗纳米复合体系的构建

本研究旨在设计一种用于肝癌诊疗用光激发载药上转换介孔二氧化硅纳米复合体系。首先应用油相法制备掺杂镱(Yb~(3+))、铒(Er~(3+))的上转换纳米颗粒(UCNP),并在颗粒表面包裹介孔二氧化硅(mSiO_2),其次在UCNP@mSiO_2中负载肝癌分子靶向治疗药物索拉菲尼(S)和光热荧光染料吲哚箐绿(ICG)。本研究利用可见光紫外光光谱,热成像等方法对纳米颗粒进行表征,并检测其载药性能和光热性能等。通过人肝癌细胞(HepG2)检测该纳米颗粒安全性、内吞效果及杀伤效果。实验结果表明该纳米颗粒具有较好的生物安全性,可在细胞内实现上转换荧光成像,并可有效杀伤肝癌细胞。本研究为该纳米颗粒在肝癌中的诊疗作用提供了有力支持。     

社区卫生服务项目标化工作量技术难度和风险程度的精准赋值方法研究

背景　标化工作量的计算公式中包含人力时、技术难度和风险程度三个变量,其中技术难度和风险程度是一种主观的度量,不同部门和工种的业务人员会有自己的度量衡,一般来说,相同工种的业务人员度量衡相对一致,但不同部门和工种的人员之间则难以获得相同的度量衡,这使得不同部门之间的技术难度和风险程度度量值不可比。目的　本研究拟在测算社区卫生服务项目标化工作量背景下解决跨部门的技术难度和风险程度主观度量衡均一化问题。方法　从标化工作量的内涵出发,选择专业的、有代表性的业务人员,获取其对所在科室各项目人力时、技术难度和风险程度的原始赋值,按照最小值和平均值原则进行转换,再将转换后的技术难度和风险程度取值乘以使用串联法得到的科室间转换系数,得到不同科室间可比的技术难度和风险程度最终取值,并使用排序法解决确定最终取值前的争议。结果　选择的专家权威程度基本大于0.7,结果科学可信,得到了各科室间的技术难度和风险程度转换系数,得到了各个科室所有项目可比的技术难度和风险程度最终取值。结论　标化工作量的技术难度和风险程度等参数的测量取值,需要选择有代表性的业务人员,获得其赋值结果,测得各人的原始赋值后,通过最小值及平均值原则、串联法、排序法,可以顺利地获得各个项目在全院范围内可比的技术难度和风险程度最终取值。