人神经元特异性烯醇化酶蛋白表达及抗体制备

目的克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断。方法经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Westernblotting和免疫组化鉴定。结果所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性。Westernblotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白。结论NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究。     

参苓白术散加减对比西药治疗溃疡性结肠炎的疗效和安全性Meta分析

通过探讨参苓白术散加减治疗溃疡性结肠炎(UC)的有效性和安全性,为临床推广提供科学依据。计算机检索CNKI,CBM,万方,维普等数据库,纳入参苓白术散加减对比单用西药治疗溃疡性结肠炎的随机对照试验文献(randomized control trials,RCTs),用Cochrane评价方法进行风险偏倚评估;收集纳入研究的有效率、主要症状(腹泻、腹痛、便脓血、发热)的改善时间和肠镜下黏膜疗效,并进行Meta分析。本研究共纳入13篇RCTs,总例数1 285例,参苓白术散组659例,单用西药组598例。对比单用西药,参苓白术散加减有较高临床疗效(RR=1.17,95%CI[1.13,1.22],P0.001),能明显缩短腹泻、腹痛、便脓血、发热症状的改善时间,其合并效应量分别为(RR=-12.32,95%CI[-14.27,-10.37],P0.001),(RR=-8.06,95%CI[-9.88,-6.24],P0.001),(RR=-9.89,95%CI[-10.77,-9.00],P0.001),(RR=-8.29,95%CI[-9.59,-6.98],P0.001),减少不良反应事件的发生(RR=0.06,95%CI[0.01,0.40],P=0.004)。参苓白术散加减治疗UC的肠镜下黏膜疗效比较没有统计学意义。对比单用西药,参苓白术散加减治疗溃疡性结肠炎有更好的疗效和安全性,适合临床推广使用,但由于纳入文献数目较少,质量较低,需要高质量的大样本双盲随机对照试验的支持。     

中医证候诊断量表研究技术和方法探索

为研究与建立中医证候诊断量表,课题组依托973计划项目基金的资助,以冠心病痰瘀互结证诊断量表的可行性,初步证实:文献系统评价和临床调查是中医证候诊断量表本底资料的重要来源,德尔菲法是筛选中医证候诊断量表条目达成共识的有效方法,层次分析法定权重能实现中医证候量化诊断的目标,采用诊断性试验设计的敏感度、特异度和ROC曲线下的面积来评价中医证候诊断量表的效能,后续研究,证明了这些技术和方法是可行性的,供同行借鉴参考。     

胞二磷胆碱对大鼠局部脑缺血后空间学习和记忆的影响

目的 探讨胞二磷胆碱对大鼠局部脑缺血后空间学习和记忆能力的影响。方法 实验分为正常对照组、缺血对照组和胞二磷胆碱组。线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,术后2周内腹腔注射胞二磷胆碱,第15天开始采用Morris水迷宫装置评价大鼠的空间学习和记忆能力。结果 脑缺血对照组大鼠在定向航行试验和空间探索试验中均表现出明显的空间认知功能的障碍,胞二磷胆碱组大鼠平均逃避潜伏期与缺血对照组比较明显缩短（P〈0．01）。在空间探索试验中,胞二磷胆碱组大鼠原平台象限停留时间百分比以及穿过原平台位置次数均大于脑缺血对照组（P〈0．01）。缺血对照组多采用边缘式和随机式搜索策略;正常对照组多采用直线式和趋向式搜索策略;胞二磷胆碱组采用趋向式和随机式搜索策略的频数较多。结论 胞二磷胆碱可以明显改善大鼠永久性局部脑缺血后空间学习和记忆能力。     

基于SWATH蛋白定量技术研究溃疡性结肠炎脾虚湿蕴证的差异表达蛋白

目的:筛选溃疡性结肠炎(UC)脾虚湿蕴证的差异表达蛋白,为进一步研究病证机制提供物质基础.方法:纳入UC脾虚湿蕴证患者4例和对照人群7例,采集受试者的肠黏膜组织,采用SWATH蛋白定量技术对蛋白进行定量鉴定,llog2 fold-changel＞1,而且调整P值(FDR)≤0.05的蛋白质被认为是差异表达蛋白;并对差异...     

脾胃系疾病PRO量表的计量心理学特性考核

【目的】对脾胃系疾病PRO量表进行计量心理学考核,以考评量表测量结果的可信性、有效性。【方法】采集现场调查的201例脾胃系疾病患者和99例健康志愿者的数据,考核脾胃系疾病PRO量表的分半信度、克朗巴赫系数、内容效度、结构效度、区分效度和可行性。【结果】整个量表的分半系数为0.881,生理、独立性、心理和环境各领域的分半系数分别为0.846、0.855、0.646、0.722。整个量表的Cronbach’sα系数为0.943,4个领域的Cronbach’sα系数分别为0.917、0.853、0.739、0.795。各领域积分与总分的相关系数大于0.7。生理领域除早饱、腹中重坠感这2个条目外,各条目与其所属方面、领域的相关系数大于0.5;其余3个领域各条目与所属方面、领域的相关系数大于0.7。整个量表模型的拟合优度指数为0.950,4个领域的拟合优度指数分别为0.791、0.996、0.911、0.953。健康志愿者与脾胃系疾病患者总分及各领域得分的差异均具有统计学意义(P<0.01)。【结论】脾胃系疾病PRO量表是一个具有良好的信度、效度和区分度的疾病专用量表,可操作性强,可用于中医、中西医结合脾胃系疾病的临床疗效评价。     

多水平模型在癌痛随机对照试验中的应用

【目的】采用重复测量的方差分析和多水平模型分析随机对照试验的资料,比较两种方法的优缺点,探讨多水平模型在随机对照试验数据分析中的应用。【方法】收集双柏散(治疗组)和安慰剂(对照组)治疗原发性肝癌癌痛患者随机对照试验研究的资料,以疼痛数字评价量表(NRS)为结局变量,使用SPSS 13.0软件建立重复测量的方差分析,HLM6.02软件建立多水平模型(无条件模型、多水平模型)分别对资料进行分析。【结果】重复测量资料方差分析的主效应、时间和处理的交互效应之间比较差异均有统计学意义(P<0.05),治疗组的NRS分数下降明显。无条件模型的组内相关系数(ICC)为0.613,说明该数据适合构建多水平模型。多水平模型显示所有个体NRS分数在每个时间点平均下降0.165(P<0.05),其下降速度受到组别因素的影响,与对照组相比,治疗组可使每个时间点的NRS分数下降0.330(P<0.05)。【结论】多水平模型比重复测量资料的方差分析在处理纵向资料方面更具有优势,适合于随机对照试验纵向数据的分析。     

复杂干预概述

Key Laboratory of Ecology and Environmental Science in Guangdong Higher Education, College of Life Sciences, South China Normal University, Guangzhou 510631, China     

复杂干预的设计和评价方法

简单介绍复杂干预的常用设计：阶梯试验设计、病人偏好试验设计、N-of-1试验设计和整群随机试验设计,介绍复杂干预混合效应和多水平评价的整群特异模型（CS模型）与总体平均模型（PA模型）,期待复杂干预在临床试验研究中能得到重视及广泛应用。