PLA2R 真核表达细胞株的构建及其在膜性肾病诊断中的应用

目的 构建表达磷脂酶A2受体（phospholipase A2 receptor, PLA2R）的稳定细胞株并对其在膜性肾病（membranousnephropathy，MN）诊断中的应用进行初步评价。方法 人工合成pIRES-PLA2R 真核表达质粒并稳定转染CHO 细胞，筛选后分别进行RT-PCR,Western 免疫印迹和细胞免疫荧光方法（immunofluorescence assay，IFA 法）鉴定。以构建的稳定细胞株建立PLA2R 自身抗体IFA 法并对2018~2019 年收集的97 例肾病患者血清样本进行初步检测。结果 成功构建表达PLA2R 蛋白的稳定细胞株CHO-PLA2R 并以该细胞株为基础建立PLA2R 自身抗体IFA 法。与ELISA 试剂盒检测结果相比，阴性样本符合率为100%（55/55）；阳性样本符合率为76.2%（32/42）；总体符合率为89.7%（87/97）。Kappa 检验具有一定的一致性（P ＜ 0.05）。结论 成功构建表达PLA2R 蛋白的稳定细胞株，并应用该细胞株建立了检测PLA2R 自身抗体的IFA 检测方法。     

大环内酯类不敏感卡他莫拉菌的分子流行病学特点及耐药机制

目的 研究大环内酯类不敏感卡他莫拉菌的分子流行病学特点及耐药机制.方法 从2岁以下健康婴幼儿鼻咽部共分离出383株卡他莫拉菌,利用Etest法测定383株卡他莫拉菌对大环内酯类的最低抑菌浓度( MIC);采用头孢硝噻吩色原法测定β内酰胺酶的产生情况;利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对菌株分型;通过聚合酶链反应(PCR)及序列分析对大环内酯类耐药机制进行研究;采用X2检验对6个城市(北京、上海、济南、南京、武汉、东莞)卡他莫拉菌对抗菌药物的不敏感率进行分析比较.结果 按照美国临床和实验室标准化协会( CLSI)判定折点,383株卡他莫拉菌对红霉素和阿奇霉素的不敏感率分别为40％和23％;按照药物代谢动力学/药物效应动力学(PK/PD)判定折点,其对红霉素和阿奇霉素的不敏感率分别为59％和60％.不同城市间卡他莫拉菌对大环内酯类的不敏感率存在显著差别,相对靠北部城市如北京和济南,其不敏感率明显高于相对靠南部城市(P＜0.05).在383株卡他莫拉菌中,有92％( 353/383)的菌株β内酰胺酶阳性;用PFGE方法将选取的37株高耐大环内酯类(MIC ＞256 mg/L)卡他莫拉菌分为14个型,其中有43％ (16/37)的菌株被认为与A型相关.但未发现ermA、ermB、mefA及mefE等耐药基因.在23S rRNA中,A2982T、A2796T及A2983T等突变位点与大环内酯类耐药可能有关.其中A2982T和A2796T突变可能主要介导高水平耐药,A2983T突变可能介导低水平耐药.结论 本研究发现大量大环内酯类不敏感的卡他莫拉菌;其耐药机制可能与23S rRNA位点发生突变有关,且突变位点与大环内酯类的MIC值存在一定关系.     

月售卡业绩超过20万的足疗店客服经理是怎么“炼”成的

1、我的手机通讯录里有1500名顾客的联系方式。 客源数量决定了销售质量!有人肯定会问我怎么存这么多联系方式？这是个信息化时代,掌握了信息就掌握了一切!除了我保证每位到房间消费的顾客都有我至少两张名片之外,我还将二维码打在了＂笑脸牌＂上。这样日积月累我的微信好友都有近千人。我没事就发发朋友圈、QQ空间,自己拍点员工照片、店铺照片、个人照片等。     

母婴床旁护理模式在产科的实施效果观察

目的探讨母婴床旁护理模式在产科的实施和临床效果。方法选择在我院分娩的单胎初产妇250例,按住院病区分为观察组和对照组,各125例。观察组实施母婴床旁护理模式,对照组采用传统的母婴同室护理模式。结果采用母婴床旁护理的观察组产妇对护理工作的满意度高于对照组（P〈0．01）;观察组产妇相关技能掌握率明显高于对照组（P〈0．01）。结论母婴床旁护理是推动现代产科护理模式发展的重要方法,体现了产科服务模式突出人文关怀的特点,在产科护理工作中具有积极的推广意义。     

胰高血糖素样肽-1保护内质网应激诱导的胰岛β细胞凋亡

目的探讨胰高血糖素样肽-1（GLP-1）对毒胡萝卜素（TG）诱导的胰岛13细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法体外培养大鼠胰岛β细胞系-19细胞,采用TG诱导内质网应激,并比较存在GLP-1和GLP-1受体激动剂exendin-4的条件下胰岛B细胞凋亡情况。实验分为正常对照组、TG组（100nmol／L）、GLP-1（10nmol／L）＋TG（100nmol／L）组和exendin-4（100nmol／L）＋TG（100nmol／L）组,通过DNA片段化、原位转移酶缺口末端标记法（TUNEL）染色、AnnexinV—PI（膜连蛋白V／碘化丙啶）双染流式细胞仪检测4组细胞凋亡率的差异。采用Westernblot检测细胞色素c的释放。通过荧光探针DCFH—DA检测细胞活性氧簇（ROS）水平。罗丹明-R110（Z—DEVD—R110）染色检测细胞Caspase-3活性。2组间均数比较采用t检验,4组间比较采用单因素方差分析。结果DNA片段化检测和TUNEL染色实验均显示后两组细胞凋亡较TG组明显减少（F=2．16;t值分别为6．13和6．73,均P〈0．01）。AnnexinV—PI双染流式细胞仪检测显示TG组细胞的凋亡率为26％,在GLP-1和exendin-4存在的条件下,TG诱导的细胞凋亡明显减至19．7％和19．2％。进-步实验表明GLP-1和exendin-4能降低内质网应激过程中细胞色素c释放、活性氧簇ROS的产生和Caspase-3活性。细胞浆蛋白的Westernblot检测结果显示,给予GLP-1和exendin-4能降低内质网应激过程中细胞色素c释放（F=0．875;t值为5．37和7．26,P〈0．01）。细胞浆中凋亡蛋白酶Caspase-3的检测结果显示,GLP-1和exendin-4能抑制Caspase-3的激活和释放（F=0．838,t值为3．46和4．52,P〈0．01）。细胞线粒体活性氧的释放检测结果显示,正常情况下,细胞浆中可检测到-定量的活性氧,给予TG后释放的活性氧明显增多（61．67±7．64,t=22．13,P〈0．01）,给予GLP-1和exendin-4能减少活性氧的释放（32．3±3．21,t值分别为12．41和15．28,P〈0．01）。结论GLP-1对TG诱导的B细胞凋亡具有保护作用,其机制可能通过与内质网应激导致的细胞色素c释放、Caspase-3的激活和ROS的产生有关。     

不同举办主体社区卫生服务机构员工满意度调查

工作满意度是指来自于职工个人对其工作或工作经历评价后所感受到的一种愉悦或积极的情感状态[1].研究表明,医务人员的工作满意度是检验社区卫生服务质量的敏感指标,也是衡量社区卫生服务可持续发展的重要指标[2].本研究对不同举办主体的社区卫生服务机构的员工满意度进行比较,为进一步提高员工满意度和社区卫生服务质量,明确社区卫生服务的发展方向提供建议.     

超声检测下婴儿股骨头骨化中心出现时间分析

目的 探讨超声检测下婴儿股骨头骨化中心出现时间.方法 对2010年5月至12月到天津市妇女儿童保健中心进行髋关节筛查、且超声筛查结果为正常的10116例婴幼儿(20232髋)骨化中心显示情况进行统计学分析.结果 婴儿年龄为10～226 d,平均年龄(67±0.46)d；其中男婴5531例,女婴4585例.所有超声检查正常的婴儿当中,共有1716例(17.0％)名婴儿双侧股骨头均出现骨化中心,最早出现在1月龄(30d),最晚226天龄仍未出现；骨化巾心集巾出现在2～5月龄(60～179 d)；左右髋差异无统计学意义(P＞0.05).多因素Logistic回归分析显示,骨化中心是否出现与婴儿的年龄、性别、出生体重、出生胎龄、出生身长、目前体重、目前身长、宫内体位、喂养方式有关.结论 超声可较早地显示骨化中心,对临床一些疾病的诊断有一定的帮助.     

三小定点整脊技术治疗腰椎间盘突出症疗效观察

[目的]观察三小定点整脊技术治疗腰椎间盘突出症的疗效。[方法]选取144例(脱落6例,实际完成138例),随机分为观察组72例(2例脱落,实际完成70例),男23例,女47例,采用三小定点整脊技术治疗;对照组72例(4例脱落,实际完成68例),采用牵引法治疗。[结果]两组疗效比较,观察组疗效明显高于对照组(P<0.05),治疗期间无明显不良反应。[结论]三小定点整脊技术可明显改善患者症状,缓解疼痛。     

王忠民主任医师辨治重度痛经反复发作经验撷箐

王忠民主任医师系硕士研究生导师,天津市王忠民中医传承工作室导师,中国优生优育网主编.在长期的妇科临床中,积有丰富的研究经验,对妇科疑难病、危急重症等多有新的思路与见解,疗效显著,每起沉疴.笔者随师侍诊中发现,其治疗女大学生重度痛经反复发作,采用活血祛瘀、益阳温经、行气消滞等法,效果显著,兹整理报告如下,谨供同道参考.