高效液相色谱-质谱联用法用于二亚油酰磷脂酰胆碱血浆浓度测定的探讨

目的研究高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定血浆中二亚油酰磷脂酰胆碱(DLPC)浓度测定的方法。方法 2010年11月-2011年1月,7例受试者,3例服用多烯磷脂酰胆碱软胶囊(试验制剂),3例服用多烯磷脂酰胆碱胶囊(参比制剂),1例未服药;采集服药者血浆,对各种检测方法、样品预处理条件进行考核;用建立的方法对6例服药者和1例未服药者血浆DLPC浓度进行测定。结果最终建立的方法为:采用API 3000型HPLC-MS/MS液质联用系统,多反应离子检测模式,正离子扫描,大气压化学电离源,色谱柱为Ultimate CN分析柱(50.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇︰水︰甲酸(80︰20︰0.05,V/V/V),流速为0.5 mL/min,格列齐特作为内标。受试者口服多烯磷脂酰胆碱软胶囊试验制剂与参比制剂后,DLPC血浆浓度水平均未见明显的变化规律。未服药者血浆DLPC浓度也有较高浓度水平。结论所建立的HPLC-MS/MS法,未能用于多烯磷脂酰胆碱软胶囊生物等效性评价。     

埃索美拉唑肠溶胶囊人体生物等效性试验

目的采用高效液相色谱法测定受试者口服埃索美拉唑肠溶胶囊与埃索美拉唑镁肠溶片后血药浓度,评价埃索美拉唑肠溶胶囊的生物等效性。方法 2009年9月-10月,36例健康男性受试者单次交叉口服埃索美拉唑肠溶胶囊(试验制剂)和埃索美拉唑镁肠溶片(参比制剂),测定给药后不同时间点血浆中埃索美拉唑经时血药浓度,采用DAS 2.0软件进行药物代谢动力学参数计算和生物等效性评价。结果受试者单次口服试验制剂与参比制剂后,达峰时间分别为(2.19±0.96)、(2.43±0.92)h,峰浓度分别为(1 748.86±615.81)、(1 442.92±476.41)μg/L,药时曲线下面积(AUC)0-t分别为(3 927.14±1 839.10)、(3 878.79±1 734.84)μg/L.h,AUC0-∞分别为(3 998.36±1 866.22)、(3 918.31±1 773.44)μg/L.h。试验制剂与参比制剂的生物等效性为94.0%,其90%CI为(82.3%,107.2%)。结论埃索美拉唑肠溶胶囊与埃索美拉唑镁肠溶片生物等效。     

盐酸戊乙奎醚气雾剂人体药动学研究

目的 建立液质联用方法测定人体血浆中戊乙奎醚的浓度,并用于人体药动学研究.方法 28名健康志愿受试者,分为两组进行盐酸戊乙奎醚(PHC)单次和多次喷雾药动学研究.采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定给药后不同时间点戊乙奎醚浓度,用DAS2.0药代动力学计算程序处理经时血药浓度数据,计算主要药动学参数...     

反相高效液相色谱法测定血清中甲硝唑浓度

本文报道用反相高效液相色谱法测定血清中甲硝唑浓度。采用Beckman344系列高效液相色谱仪,包括114型泵,160型固定波长254nm紫外检测器,yWGC_(18)不锈钢分析柱(250±4.6mm,10μm)。以甲醇:水:pH5.0饱和磷酸盐缓冲液(34.5:65:0.5为流动相,流速1.0ml/min,检测器灵敏度置0.005aufs。样品血清200μl,加入内标工作液100μl     

血浆头孢曲松HPLC测定法及其在胸外术后患者的应用

建立血浆中头孢曲松反相ＨＰＬＣ测定法,用于胸外术后患者头孢曲松血药浓度的测定。血浆样品经乙腈沉淀蛋白等预处理后,于ＯＤＳ柱上,以甲醇－０．１ｍｏｌ／Ｌ 到铵缓冲液（２０：８０）为流动相进行分离测定。线性范围０．２～８９ｍｇ／Ｌ,沉淀蛋白上率９１．６～９４．４％,加样回收率１０１．５％～１０３．２％,日蚋ＲＳＤ１．０９％～２．６５％。日间ＲＳＤ４．４２％～５．１３％。本法准确可靠,用于胸外术后患者头     

RP—HPLC法测定人血浆中阿昔洛韦的方法改进

目的 :用改良高效液相色谱法测定人血浆中阿昔洛韦浓度。方法 :以甲醇 重蒸馏水 (5∶95 )为流动相 ,检测波长 2 5 0nm ,鸟苷作内标 ,血浆样品采用 2 0 %高氯酸沉淀蛋白后进样。结果 :阿昔洛韦在 0 .0 31～ 2 .0mg·L-1范围内线性关系良好 ,最低检测浓度为 0 .0 1mg·L-1,高、中、低浓度日内RSD分别为 2 .5 % ,1.2 %和 2 .3% ;日间RSD分别为2 .4% ,5 .8%和 2 .7%。结论 :该法操作简便 ,灵敏度高 ,色谱峰分离好。     

反相离子对HPLC法测定人血浆中苯溴马龙的浓度

目的　采用反相离子对HPLC法测定人血浆中苯溴马龙的浓度。方法　血浆样品中苯溴马龙及内标美洛昔康经氯仿提取 ,在SymmetryC18柱上 ,以乙腈 - 0 .0 1mol·L-1NH4H2 PO4(含 0 .5mmol·L-1四辛基溴化铵 ) (73∶2 7)为流动相 ,于 35 0nm检测。结果　标准曲线线性范围 0 .0 312 5～ 4 .0mg·L-1,萃取回收率 81.9%～ 89.5 % ,加样回收率 99.7%～ 10 0 .3% ,日内测定RSD为 1.4 1%～ 2 .0 9% (n =7) ,日间测定RSD为 2 .5 9%～ 5 .16 % (n =7)。结论　所用方法简便、准确 ,重复性好 ,用于苯溴马龙在人体药动学研究中的血药浓度测定结果良好。     

DMOG对间充质干细胞生物学特性影响的研究

[目的]探讨二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的影响。[方法]以DMOG作用于P4代MSCs,分为DMOG 0、20、40和80μmol·L~(-1)组,以CCK-8法、流式细胞术、Transwell迁移法和Real-time q PCR依次检测不同浓度的DMOG对MSCs增殖能力、细胞周期、迁移能力以及成骨、成脂、成软骨和成神经分化能力的影响。[结果]DMOG各浓度组细胞生长曲线均接近S型,与DMOG 0μmol·L~(-1)组比较,20μmol·L~(-1)对MSCs增殖能力具有促进作用,40μmol·L~(-1)促进作用最明显,差异具有统计学意义(P0.05)。与DMOG0μmol·L~(-1)组比较,DMOG处理可提高处于S期+G2/M期的MSCs细胞比例,差异具有统计学意义(P0.05)。与DMOG 0μmol·L~(-1)组比较,DMOG20μmol·L~(-1)时促迁移作用显著(P0.05)。DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的成骨、成脂、成软骨、成神经分化能力,DMOG 20μmol·L~(-1)可显著促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制MSCs成脂分化能力,差异具有统计学意义(P0.05),对MSCs成神经分化能力无显著影响(P0.05)。[结论]不同浓度DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的多向分化能力,其中20μmol·L~(-1)DMOG可促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制其成脂分化能力,对其成神经分化能力无显著影响,同时可显著提高MSCs增殖、迁移能力。     

血管内皮生长因子与肺疾病

血管内皮生长因子 (VEGF)属于血小板源生长因子家族 ,是由两个相同多肽链通过二硫键形成的同源二聚体糖蛋白。多种细胞可分泌VEGF ,特异性作用于内皮细胞 ,调节内皮细胞有丝分裂 ,增加血管通透性和血管紧张性 ,还可促进胚胎期血管形成并影响多种作用于血管的分子的产生 ,它在多种肺疾病的发生发展中起重要作用。1　VEGF及其受体在正常肺组织中的表达VEGF可有多种细胞产生 ,在肺组织中主要存在于肺泡Ⅱ型细胞 ,肺巨噬细胞 ,中性粒细胞。至少有三种酪氨酸激酶flt 1.flk 1/KD .flt 4被确认为VEGF受体 ,正常情况下肺组织可高表达flt 1m…     

LC-MS/MS法测定人血浆中阿奇霉素的含量

[目的]建立一种简便、快速的液相-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人血浆中的阿奇霉素浓度。[方法]采用API3000型LC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(100×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70︰30︰0.001,用氨水调pH=3.5),流速0.4ml·min-1。样品在碱性条件下用二氯甲烷提取浓集后进样,MRM模式检测(离子对794.5/591.4),莫沙比利(422.1/198.0)为内标,按内标法定量。[结果]阿奇霉素和内标的保留时间分别为2.8、3.6min,标准曲线在1～1024ng·ml-1范围内线性良好,最低定量限1ng·ml-1,日内、日间RSD分别小于6.6%和9.1%,方法回收率96.4%～108.9%,预处理回收率66.3～78.2%。[结论]本法具有快速简便、灵敏准确等特点,与已有文献报道相比有更好的灵敏度和特异性,适用于血浆中阿奇霉素含量测定及药代动力学、生物利用度研究用。