转化生长因子β1异常表达与肝癌早期诊断

转化生长因子 (TGF) β是一类多肽二聚体 ,具有调节细胞生长、分化及功能的细胞因子。人类TGF β家族有 3种异构体 (TGF β1、2、3 ) [1 ] ,它们的生物学特性非常相近 ,分别由特定的基因编码 :即内皮细胞及结缔组织表达TGF β1 ,上皮细胞及神经元细胞表达TGF β2 ,间质性细胞表达TGF β3 。肝细胞增殖有赖于正向和负向调节因子间的动态平衡 ,在肝细胞增殖调节方面 ,TGF β1 (2 5KD)具有负向调节作用。TGF β信号通路紊乱 ,可使肝细胞逃避TGF β1 介导的生长抑制效应而致肝癌 (HCC)发生。本文着重综述TGF β1 信号通路异常在…     

小鼠病毒性心肌炎中Fas/FasL异常表达的研究

目的探讨柯萨奇病毒B3(CVB3)所致小鼠病毒性心肌炎(VM)心肌细胞损伤的变化,观察Fas/FasL介导的细胞凋亡在心肌损伤中的作用.方法采用CVB3制备小鼠病毒性心肌炎动物模型,心肌组织切片HE染色了解心肌损伤情况;电镜检测观察心肌组织中的细胞凋亡;同时采用免疫组化、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)两种方法检测心肌炎小鼠不同时期心肌组织中Fas与FasL基因转录与蛋白的表达.结果光镜观察见对照组小鼠心肌组织无异常改变,实验组病鼠可见心肌细胞坏死和单核、淋巴细胞浸润,后期可见纤维化;电镜观察对照组心肌中未检出凋亡细胞,而病鼠心肌凋亡细胞检出率较高58.33%(7/12例),且细胞凋亡多存在于炎症病灶周围的心肌细胞及病灶处炎性浸润细胞;感染后第7～14天的病鼠心肌组织中,主要表达于心肌细胞的Fas mRNA及蛋白和主要表达于浸润淋巴细胞的FasL mRNA及蛋白均明显增强;FasL蛋白表达水平与心肌病变积分呈正相关(r=0.9082,P＜0.001).结论小鼠病毒性心肌炎中心肌损伤坏死与心肌细胞凋亡共存,通过Fas/FasL基因路径介导的心肌细胞凋亡与病毒性心肌炎的发病过程有关.     

足叶苦素抑制胰岛素样生长因子Ⅰ受体表达对肝癌细胞增殖与运动的影响

目的 观察足叶苦素(PPP)抑制胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-IR)后对肝癌细胞增殖和运动的影响. 方法 体外培养肝细胞L02和肝癌细胞(Bel-7404、Bel-7402、HepG2和Huh-7),以Western blot分析IGF-IR表达,以磺酰罗丹明B法分析细胞活性;在PPP抑制IGF-IR后,以流式细胞术分析细胞周期,以AnnexinV-FITC法分析细胞凋亡;在z-VAD-FMK抑制caspases后,以均质发光法检测caspase-3/7活性;划痕试验分析细胞运动能力.对数据进行析因设计方差分析,采用t检验或one-way ANOVA法进行组间比较.结果 肝细胞L02中几乎检测不到IGF-IR,各肝癌细胞中IGF-IR呈不同程度表达.PPP抑制肝癌细胞增殖呈时间和剂量依赖性,经1.0μmol/L PPP处理HepG2细胞24h,G1、S期和G2/M期细胞比例分别为2.1％±0.4％、11.0％±0.7％和87.1％±0.6％,且划痕不愈合;caspase-3/7活性显著增加(t=11.83,P＜0.01);HepG2细胞凋亡率为16.4％±0.4％,明显高于对照组的5.8％±0.2％ (t=14.05,P＜ 0.01);z-VAD-FMK抑制caspases表达,HepG2细胞凋亡率为11.3％±0.7％,明显高于对照组的5.8％±0.2％ (t=11.83,P＜0.01). 结论 IGF-IR表达与肝癌细胞增殖、运动和凋亡相关,可能是肝癌分子靶向治疗的有效靶点.     

慢性乙型肝炎患者血清瘦素表达及临床意义

目的 观察慢件乙型肝炎(慢乙肝)患者血清瘦素表达水平及其在发病、进展中的意义.方法 65例慢乙肝组、肝硬化组患者和15名健康体检(对照)组,酶联免疫吸附试验(ELISA)榆测血清瘦素水平,全自动生化分析仪检测肝功能.结果 血清瘦素水平两肝病组明显高于对照组(P＜0.01),三组女性均明显高于男性(P＜0.01);肝病患者随着肝功能好转,血清瘦索水平显著下降(P＜0.01).结论 慢乙肝患者血清瘦素水平随病情程度加重趋于升高,随着肝功能好转而降低,可作为疗效观察及预后判断的指标.女性瘦素水平显著高于男性.     

血必净对合并全身炎症反应综合征呼衰患者炎症介质及预后的影响

目的:观察血必净注射液对合并全身炎症反应综合征(SIRS)的肺部感染、呼吸衰竭患者炎性介质及预后的影响。方法:将存在SIRS的呼吸衰竭重症患者71例随机分为血必净观察组与对照组:观察组加用血必净100ml静脉点滴,每天2次,共7天,其余治疗两组相同。于机械通气前和机械通气第1、2、3天取动脉与中心静脉血查血气分析,入室当天与机械通气后第3d取静脉血查C反应蛋白、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)。结果:经治疗两组SIRS症状均能改善。观察组C反应蛋白、TNF-α、IL-6较前明显降低(P<0.05)。治疗后第1d始两组缺氧即明显改善(P<0.01)。组织氧合方面:治疗后第2、3d中心静脉氧饱和度两组较前均有所改善(P<0.01),观察组改善更著(P<0.01);动脉血乳酸(Lac)观察组治疗后第2、3d明显降低(P<0.01)。观察组5d脱机成功及14d好转出科例数明显高于对照组(P<0.05)。结论:血必净注射液能调控机体炎症反应过程,明显改善SIRS症状,较好改善患者的氧代谢,取得满意的疗效。     

大鼠肝细胞癌变过程中热休克蛋白gp96的异常表达及变化特征

目的 探讨大鼠肝细胞癌变过程中热休克蛋白(HSP)gp96的表达与变化特征.方法 以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲SD大鼠诱发肝癌,以免疫组化染色及Western blot观察大鼠肝组织中Sp96蛋白的定位及表达水平.结果 SD大鼠在喂饲2-F从后,在诱癌早期肝细胞发生颗粒样变性,中期出现不典型增生,后期见大量癌巢结节.癌变过程中肝组织gp96蛋白主要定位于细胞浆,表达水平从变性组到癌前组到癌变组呈明显的梯度增加,均显著高于对照组肝组织(P＜0.01).结论 gp96参与肝细胞的癌变过程,癌变初期的过度表达有助于肝癌的早期诊断.

Abstract：

Objective To investigate the character of expression and alteration of heat shock protein (HSP) gp96 during hepatocellular carcinoma(HCC) development.Methods Rat HCC models were induced with 2.acetamidoflurene(2-FAA) in male SD rats.The location of gp96 in rat liver tissues were analyzed by immunohistochemistry and the expression levels were semi-quantitatively detected by Western blot.Results Histological examinations suggested that hepatocytes in rats fed with 2-FAA showed vacuole-like denaturations at the early stages,then dysplastic nodules appeared at the middle stage,and finally progressed to tubercles of cancerous nest.During the process,the liver gp96 protein was mostly located in cytoplasm and an increasing tendency of its levels Was found from degeneration to precancerous to cancerOUS tissues,all of them were significant higher than that in normals(P<0.01).Conclusion HSP gp96 involved in HCC development and its overexpression could be a useful marker for early diagnosis of HCC.     

RNAi抑制肝癌分子通路及靶向治疗

肝细胞肝癌(HCC)发生发展是由遗传学和表遗传学改变引起原癌基因激活和抑癌基因失活,相关信号传导通路活化以及增殖、凋亡平衡破坏,使肝细胞生长失控而致癌变,经启动、促进、演变的多阶段过程.RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术是由内源或外源性的双链RNA介导的,序列特异性地在mRNA水平上关闭相关基因表达转录的过程,属于转录后的基因沉默,是一项新兴的基因阻断技术.     

肝细胞癌变过程中端粒酶的表达及动态改变

［目的］探讨端粒酶在肝癌发生过程中的表达与动态改变。［方法］SD大鼠以2－FAA喂饲制备肝癌模型,观察肝细胞癌变过程中瑞粒醇和总RNA的表达与改变;并收集人肝癌组织,匀浆后以PCR-ELISA法定量分析了癌和远癌组织中端粒酶活性。［结果］鼠肝癌模型证实：在肝细胞癌变过程中,随组织学改变端粒酶表达逐步增加,并与总RNA浓度是正相关（r＝0．59,P＜0．01）;人肝癌组和远癌组间的端粒酶表达水平,若以△A／mgP表示其差别无显著性（P＞0．05）;但以△A／RNA计算结果,则肝癌组酶活性明显高于远癌组（P＜0．05）。［结论］分析肝癌组织中端粒酶活性有助于监测肝细胞癌变和肝癌的早期诊断。     

人肝癌组织GGT异常表达与逆转录巢式PCR分析

为探讨肝癌组织中γ-谷氨酰转肽酶（GGT）的表达与改变,将自身配对的肝癌、癌周及远癌组织总RNA纯化,分析不同分子形式GGT表达,并以逆转录巢式PCR（RT－PCR）扩增GGT5’-末端非编码区基因。结果：肝癌、癌周和远癌组总RNA浓度呈明显的梯度升高趋势（P＜0．05）;肝癌组总GGT比活性和不同分子形式GGT均明显高于癌周和远癌组（P＜0．05）;RT－PCR扩增GGT基因片段,在肝癌、癌周和远癌组阳性率分别为95．8％、87．5％和79．2％。提示肝癌组织中GGT呈异常表达,GGT基因分析可望成为监测肝细胞癌变的灵敏方法。     

肝癌特异性GGT-Ⅱ抗原纯化及免疫电泳分析的临床应用

本研究直接纯化肝癌ＧＧＴ酶蛋白并以此作为抗原，免疫动物制得抗人肝癌特异性ＧＧＴ抗血清，建立免疫电泳法用于肝癌的临床诊断。取肝癌患者（ＧＧＴ－ｏ强阳性）血清，以制备型聚丙烯酞胺梯度凝胶电泳分离、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶过柱、ＤＥＡＥ纤维素（ＤＥ５２）离子交换层析等生化方法提取和纯化肝癌特异性ＧＧＴ，并将该ＧＧｒｒ－０抗原与福氏佐剂充分混匀，以皮下多点注射免疫新西兰兔制备抗血清，对ＧＧＴ－０进行免疫电泳及酶呈色分析，绝大部分肝癌患者出现阳性的红色火箭峰。ＧＧｒＩ－０免疫分析的临床应用显示：在原发…