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目的利用CRISPR/Cas9技术构建敲除G6PD基因常见突变位点——c.392G>T(p.131G>V)突变位点的HEK293T细胞,
为后期研究其基因修复提供可靠的细胞模型。方法针对G6PD基因c.392G>T(p.131G>V)突变位点靶向设计4对向导RNA
(sgRNA),构建表达Cas9-sgRNA的外源PX458质粒,将其转染至HEK293T细胞内,通过流式细胞术分选表达GFP荧光蛋白的
细胞进行培养,利用T7核酸内切酶1(T7E1)酶切验证CRISPR/Cas9的剪切效率,有限稀释法筛选单克隆细胞,测序鉴定并检测
G6PD mRNA、蛋白表达和细胞功能的改变。结果成功构建基于G6PD基因c.392G>T(p.131G>V)突变位点的Cas9-sgRNA外
源PX458 质粒,T7E1 酶切检测四对sgRNA 的编辑效率分别为6.74%、12.36%、12.54%、2.94%。测序鉴定敲除G6PD 基因
c.392G>T(p.131G>V)突变位点的细胞株构建成功,细胞G6PDmRNA、蛋白表达和G6PD酶活性降低,细胞增殖能力下降,维生
素K3诱导细胞死亡增加。结论本研究成功构建敲除G6PD基因c.392G>T(p.131G>V)突变位点的HEK293T稳定细胞模型,
为后期研究基因的修复奠定了基础。 相似文献
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目的 通过对医院各类岗位价值的评估.为薪酬设计提供客观、公平的依据,使各岗位的薪酬分配更具有公平性.方法 采用海氏分析法,兼顾技术难度、风险大小等因素,选择了99个岗位作为本研究的模拟对象进行评估;在医院的各类人员中选择了20名在院工作时间长,对各岗位工作内容与基本的履职要求比较了解的员工作为调查对象.结果 得出了99个岗位的价值评分,客观地反映了不同岗位之间的价值差异.结论 海氏分析法可以比较不同职能部门的不同职务的相对价值,既排出了岗位价值大小的顺序,又表现出了岗位间价值的具体差异,有利于提高绩效分配的科学性和合理性,有利于提高职工对薪酬分配的满意度. 相似文献
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目前,当归补血汤在我国有着比较广泛的应用,具有促进造血、抗纤维化、促进骨组织修复、保护肾组织、调节免疫及改善微循环等作用。笔者将着重分析当归补血汤在血液疾病中的作用机制,以供临床参考。 相似文献
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某综合性医院人力资源配置的现状分析及对策 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]了解某综合性医院人力资源现状,为人力资源规划提出合理化建议和措施。[方法]调取该院人力资源管理系统的数据库,通过分类、筛选、汇总,对统计数据进行分析。[结果]该院病床与工作人员之比为1:1.62,病床与卫技人员之比为1:1.24,专业技术人员占职工工总数的82.78%,管理人员占职工总数为8.65%,工勤人员占职工总数的14.97%。[结论]该院药、检、放及其他卫技人员严重不足,中青年高层次领军人才不足,人岗匹配的管理人员相对不足。‘ 相似文献
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目的 优化酒炙两头尖的炮制工艺。方法 在单因素基础上,以黄酒用量、浸润时间、炮制温度、炮制时间为考察因素,以竹节香附素A的含量为评价指标,采用响应面法优化酒炙两头尖的炮制工艺。 结果 酒炙两头尖的最佳炮制工艺为黄酒用量32.79 %,浸润时间61.59min,炮制温度81.55 ℃,炮制时间43.85 min。结论 该优化工艺简便、预测性良好,可用于两头尖酒炙饮片的制备。 相似文献
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缓解有创护理操作所致新生儿疼痛的方法研究 总被引:2,自引:0,他引:2
近年来,有关新生儿疼痛的问题备受关注,调查表明,新生儿早期强烈的疼痛刺激会导致近期和远期的副作用;近期会对患儿的呼吸、循环、代谢、免疫、神经等方面产生影响;远期可能与成年期发生的神经症或心理障碍疾病有直接关系. 相似文献
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目的:通过对编外聘用人员实行年度考核,促进聘用人员的成长和全面发展。方法:个人总结、科内述职、民主评议、科干会集体评定考核等级、反馈考核结果。结果:有效地调动了编外聘用人员的工作积极性,优化了编外聘用技术人员队伍素质。结论:对编外聘用人员实行年度考核是必要的,而且须不断完善考核的综合评价体系。 相似文献