成人骨髓基质干细胞体外定向诱导分化为软骨细胞的实验研究

目的 建立临床成人骨髓基质干细胞(MSCs)体外培养、定向诱导分化为软骨细胞的途径。方法抽取成人骨髓，Percol密度梯度离心法进行体外培养，贴壁细胞传代，取第3代细胞在培养基中添加软骨分化诱导剂地塞米松、维生素C和不同剂量转化生长因子-β(TGF-β)，培养16d后,在倒置显微镜观察细胞形态，甲苯胺蓝染色蛋白多糖，逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学(SABC法)检测Ⅱ型胶原表达，诱导后MSCs与新型材料聚乳酸和羟基乙醇共聚物(PL-GA)复合。结果 Percoll密度梯度离心法培养可获得均一的。MSCs；5、10ng TGF-β诱导分化的MSCs生长迅速。呈典型的软骨细胞形态，甲苯胺蓝染色阳性，Ⅱ型胶原表达阳性，MSCs对材料PL-GA黏附力强。结论 可以从成人骨髓中培养出MSCs，并可定向诱导分化为软骨细胞，5～10ng TGF-β为最佳诱导剂量，成人MSCs可用作临床自体软骨组织工程种子细胞。     

高等医学院校专科研究所信息系统的设计

本阐述了在目前建立高等医学院校专科研究所信息系统的迫切性及可行性，明确了医学专科研究所信息统一管理的目标，提出了建立医学专科研究所信息系统的总体设计方案，以及当前实施研究所信息化建设应采取的关键步骤。     

骨切片固定液和脱钙剂的筛选及效果观察

在研究某些骨病及骨组织内的各种成分时,尽量减少对骨组织内成分的损伤,选择合适的固定液、固定时间和脱钙液,对骨组织制片非常重要。我们查阅了国内外70年代以来的有关文献,找出固定方法40余种,脱钙方法     

可注射型骨修复材料对兔MSC增殖及分化的影响

目的：观察以纤维蛋白胶为载体的骨修复材料对兔骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC)增殖及分化的影响。方法；采用细胞培养及组织化学等方法对各材料组兔MSC的增殖、碱性磷酸酶（alkaline phosphase,ALP)的活性和染色、细胞贴壁率及I型胶原表达进行研究。结果：（1）各组材料对细胞贴壁率及促增殖作用的影响总体上由强到弱依次是：对照组2→实验组→对照组1[纤维蛋白胶（fibrin sealant,FS)]→对照组3→单纯对照组，差异有显著性（P＜0．05）。（2）各组细胞的I型胶原表达水平和ALP活性由强到弱依次是：实验组→对照组3→对照组1→对照组2→单纯对照组，差异有显著性（P＜0．05）。结论：以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料可显著保进MSC贴壁率和向成骨细胞方向的分化水平。     

抗感染重组合异种骨对兔胫骨骨髓炎的治疗作用

目的研究抗感染重组合异种骨(anti-infectivereconstitutedbonexenograft,ARBX)对骨髓炎的治疗作用。方法采用兔胫骨近端骨髓炎模型,于胫骨近端开骨窗注入金葡球菌2周后,再次手术行病灶清除,分别在残留骨缺损中植入ARBX(ARBX组)、植入重组合异种骨(reconstitutedbonexenograft,RBX)并肌注庆大霉素(RBX+全身用药组)、单纯植入RBX(RBX组)以及不植骨(不植骨组)。治疗术后8周取材,通过解剖学、放射学、组织学、细菌学检查,比较上述各组方法对骨髓炎的治疗作用。结果(1)ARBX组细菌计数及改良X线Norden骨髓炎分值极低,明显小于其他各组(P<0.01);其解剖学和组织学观察均无明显的骨髓炎表现。(2)RBX+全身用药组与RBX组的细菌计数、改良X线Norden骨髓炎分值均较高,明显大于ARBX组及不植骨组(P<0.01);其解剖学和组织学均显示出严重的骨髓炎表现。结论(1)在病灶清除后,一期将ARBX植入残留的感染性骨缺损是治疗慢性骨髓炎的较理想方法;(2)传统的全身抗生素应用方法虽较不用抗生素好,但不能确保一期植骨有效治疗慢性骨髓炎。(3)在不用药或传统的全身用药条件下,一期植骨反而会加重骨髓炎。     

两种不同方法提高椎弓根螺钉稳定性的体外生物力学研究

目的 比较膨胀式椎弓根螺钉(EPS)与骨水泥(PMMA)强化方法在体外提高螺钉稳定性的效果.方法 将60个新鲜成年绵羊腰椎随机分为三组.普通椎弓根螺钉组(CPS组):直接拧入普通椎弓根螺钉;PMMA-PS组:向钉道内注入PMMA(1.0 ml)后拧入CPS;EPS组:直接拧入EPS.24 h后对所有标本进行X线检查,随...     

周围神经损伤修复及功能恢复评价

目的：评价修复周围神经缺损的各种生物型人工材料的性能、应用以及功能恢复评定方法,寻找适宜的周围神经替代物。方法：以＂神经导管,周围神经损伤修复,生物材料,许旺细胞＂为关键词,采用计算机检索2004-01/2010-11相关文章。纳入与生物材料以及组织工程神经相关的文章;排除重复研究或Meta分析类文章。以28篇文献为主,重点讨论周围神经修复生物型人工材料的种类、性能以及适宜的功能恢复评定方法。结果：以脱细胞神经基质以及人工合成可降解材料为主体的复合型生物工程材料可作为较理想的支架材料应用于周围神经组织工程。脱细胞神经支架解决了自体神经来源受限、移植物排斥反应等问题,韧性与可塑性接近自体神经,微环境更利于周围神经再生。人工合成可降解材料具有生物降解、可塑性、一定的通透性等优势,且已有商品化成品出现。若将上述材料分别合理构建复合材料,有可能得到性能良好的组织工程神经移植物。周围神经修复后功能恢复评定方法主要以大体与形态学观察、组织学、神经肌肉机能学评定为主,辅以分子生物学技术。各类评定方法的应用有利于筛选出最适宜的周围神经损伤修复材料与构建方案。结论：周围神经损伤修复生物型人工材料研究发展迅速,但仍没有超越自体神经移植的支架材料。脱细胞神经基质以及人工合成可降解材料复合构建支架可作为较好的周围神经支架,但仍需要与种子细胞、神经营养因子等联合构建,以取得良好的促进再生效果。当前,对周围神经损伤修复效果的评定更加注重于神经肌肉功能的恢复,迫切需要筛选出最佳的修复材料以及构建方案以满足组织工程神经移植以及功能康复的要求,达到对周围神经损伤后形态、结构修复与功能重建的目的。     

三维立体空间动态培养及骨髓间充质干细胞软骨向分化的研究

目的三维立体空间动态诱导骨髓间充质干细胞软骨向分化，分析培养状态对软骨向分化的影响。方法分离培养骨髓间充质干细胞（MSC），以海藻酸钠凝胶载体诱导软骨向分化，于转壁反应器制造周期应力性三维立体环境，比较凝胶立体结构、细胞聚集状态、细胞构型等因素对软骨向分化的影响，分别以凝胶微球悬浮高密度细胞、凝胶包埋离心细胞团、凝胶覆盖细胞及普通细胞培养等方式．进行空间动态诱导培养：同时各培养方式分别设立相应静止培养方式作为对照。10d后观察大体和组织学形态．测量生物化学指标并筛选。结果三维诱导方式比平面诱导有效，动态诱导环境优于静止诱导环境．结合三维立体空间培养和动态环境可进一步提高软骨诱导效率。其中．凝胶微球悬浮高密度细胞的培养方式分化效果最好．优于凝胶包埋细胞团的培养方式。结论海藻酸钠凝胶微球立体动态培养可有效诱导MSC的软骨向分化．为改进软骨组织工程种子细胞的立体空间动态培养提供新思路。     

rhBMP2/BCB Repair Segmental Defects in Radii of Rabbits

The reconstituted bone xenograft (RBX) by recombining the antigen-free bovine cancellous bone (BCB) as a carrier with crude extract of BMP from bovine cortical bone, which possesses strong osteoinductivty and osteoconductivty without evoking immune rejection as demonstrated by serial experimental and clinical studies, provides a successful solution to the difficult problem of xenogeneic grafting[1]. However, the amount of BMP extract from bovine bone is too little to meet the demand in cli…     

介绍一种骨磨片荧光显微镜观察四环素的改进方法

骨组织质地坚硬,如不进行脱钙,要制出高质量的组织切片有一定的困难。对研究骨的生长发育、骨质疏松症、骨移植材料及内固定材料和骨愈合之间的关系,均要求在不脱钙的情况下观察。冷冻切片只能切较小的皮质骨切片,而不能做较大的切片,也不能对带金属的内固定材料的进行研究;而传统骨磨片法更费时费力。我们结合两法优点,制出较理想的切片,报道如下。1　材料与方法11　标本　实验动物为成年兔的尺桡骨,取材前2周肌注或口服四环素80ｍｇ/ｋｇ,连续(肌注或口服)3天,间隔1周后再用同法给土霉素,停药3天后处死。(1)取所需骨组织一段,固定于4%甲醛…