注射型骨修复材料诱导成骨活性的研究

目的：了解以纤维蛋白胶(Fibrin sealant，FS)为载体的注射型骨修复材料[骨形态发生蛋白(BMP)]异位诱导成骨的作用。方法：实验分组为：实验组b(FS+bBMP)、对照组b(bBMP)、实验组r(FS+rhBMP-2)、对照组r(rhBMP)、对照组FS(FS)及空白对照组。将各组材料注射或植人小鼠肌袋内，采用用放射学、形态学、碱性磷酸酶(ALP)检测等方法对其成骨效应进行研究。结果：在以bBMP为成骨因子的实验区中，实验组b具有高效的骨诱导活性，其成骨量显著高于对照组b、对照组FS及空白对照组(P&;lt;0．01)；在以rhBMP-2为成骨因子的实验区中，实验组r同样具有高效的骨诱导活性，其成骨量也显著高于对照组r、对照组FS及空白对照组(P&;lt;0．01)。结论：以FS为载体复合BMP的注射型骨修复材料具有高效的骨诱导活性。     

体外人表皮细胞培养技术:不同滋养层细胞对角朊细胞生长融合的影响

目的:探索和寻找人角朊细胞体外培养适宜的滋养层细胞,完善人角朊细胞体外培养快速扩增的技术和方法。方法:实验于2003-08/2004-03在武装警察部队总医院烧伤整形科组织工程实验室完成。实验分别在3T3细胞、原代培养的人成纤维细胞上接种原代人角朊细胞,并设无滋养层细胞的空白对照。在对不同滋养层细胞的处理上分别采用了60Co放射线照射的传统方法和丝裂霉素处理,比较两种处理方法对滋养层细胞的影响,并对丝裂霉素适宜的作用浓度进行了研究。结果:①丝裂霉素和60Co放射线照射分别处理滋养层细胞,可取得相同效果。②终浓度为15mg/L的丝裂霉素C是制备人成纤维细胞滋养层的较适宜浓度;终浓度为10mg/L的丝裂霉素C是制备3T3细胞滋养层的较适宜浓度。③原代人角朊细胞在不同滋养层细胞上的生长速度显示:人成纤维细胞>3T3细胞>无滋养层细胞。结论:经丝裂霉素处理的原代培养人成纤维细胞作为滋养层细胞,体外扩增人角朊细胞可以缩短培养时间,减少接种密度。     

可注射型骨修复材料对兔MSC增殖及分化的影响

目的：观察以纤维蛋白胶为载体的骨修复材料对兔骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC)增殖及分化的影响。方法；采用细胞培养及组织化学等方法对各材料组兔MSC的增殖、碱性磷酸酶（alkaline phosphase,ALP)的活性和染色、细胞贴壁率及I型胶原表达进行研究。结果：（1）各组材料对细胞贴壁率及促增殖作用的影响总体上由强到弱依次是：对照组2→实验组→对照组1[纤维蛋白胶（fibrin sealant,FS)]→对照组3→单纯对照组，差异有显著性（P＜0．05）。（2）各组细胞的I型胶原表达水平和ALP活性由强到弱依次是：实验组→对照组3→对照组1→对照组2→单纯对照组，差异有显著性（P＜0．05）。结论：以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料可显著保进MSC贴壁率和向成骨细胞方向的分化水平。     

以纤维蛋白胶为载体复合BMP和bFGF的射型骨修复材料诱导异位成骨的实验研究

目的 :了解以纤维蛋白胶 (Fibrinsealant,FS )为载体的注射型骨修复材料异位诱导成骨的作用 ,为其临床的应用提供实验依据。方法 :实验分组为 :实验组b (FS bFGF bBMP)、对照组b1(FS bBMP)、对照组b2 (bBMP)、实验组r (FS bFGF rhBMP 2 )、对照组r1(FS rhBMP)、对照组r2 (rhBMP)、对照组FS及空白对照组。将各组材料注射或植入小鼠肌袋内 ,采用放射学、形态学、碱性磷酸酶 (ALP)检测等方法对其成骨效应进行研究。结果 :在以bBMP为成骨因子的实验区中 ,实验组b具有高效的骨诱导活性 ,其成骨量显著高于对照组b1、对照组b2、对照组FS及空白对照组(P <0 .0 1) ;在以rhBMP 2为成骨因子的实验区中 ,实验组r同样具有高效的骨诱导活性 ,其成骨量也显著高于对照组r1、对照组r2、对照组FS及空白对照组 (P <0 .0 1)。结论 :以FS为载体复合BMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨诱导活性 ,bFGF可明显增强BMP的骨诱导活性。     

右附睾交界性浆液性囊腺瘤一例

患者 男性,27岁.因"右侧附睾肿物进行性增大20个月,酸胀不适5 d"于2009年3月10日入院.患者2007年7月发现右睾丸旁玉米粒大小肿物,未经系统治疗,肿物进行性增大.入院前5 d开始出现右睾丸酸胀不适,并向大腿根部放射.病程中无发热、盗汗,无消瘦乏力,无血精及排尿异常.入院查体:右附睾头可触及一肿块,质硬,形态不规则,无触痛,与睾丸界限不清.     

复合骨形态发生蛋白2及碱性成纤维细胞生长因子注射型骨修复材料对兔骨髓基质细胞增殖和超微结构的影响

目的：观察以纤维蛋白胶（fibrin sealant,FS）为载体的注射型骨修复材料对体外培养的兔骨髓基质细胞(marrow stromal cell,MSC)增殖和超微结构的影响。方法：实验分组为实验组（FS bFGF rhBMP-2)、对照组1（FS）、对照组2（FS＋bFGF)、对照组3（FS＋rhBMP-2)及单纯对照组。采用细胞培养、MTT及电镜等方法对各组兔MSC的增殖及超微结构进行研究。结果：（1）各组材料对细胞促增殖作用由强到弱依次是：对照组2（FS＋bFGF)、实验组（FS＋bFGF rhBMP-2)、对照组1（FS）、对照组3（FS rhBMP-2)、单纯对照组,差异有显著性（P＜0．05）；（2）扫描电镜观察发现，材料表面粗糙，有微孔存在， 各组细胞与材料融合生长。透射电镜观察发现：实验组的绝大部分细胞呈成骨细胞表型，细胞增殖状态旺盛，分化好。各对照组细胞或是细胞增殖活性高，但向成骨细胞表型分化差，或是向成骨细胞表型分化好，但细胞增殖活性较差。结论：FS＋bFGF rhBMP-2即可显著促进MSC增殖和兔MSC向成骨细胞方向的分化水平。     

注射型骨修复材料诱导成骨活性的研究

目的:了解以纤维蛋白胶(Fibrinsealant,FS)为载体的注射型骨修复材料犤骨形态发生蛋白(BMP)犦异位诱导成骨的作用。方法:实验分组为:实验组b(FS+bBMP)、对照组b(bBMP)、实验组r(FS+rhBMP-2)、对照组r(rhBMP)、对照组FS(FS)及空白对照组。将各组材料注射或植入小鼠肌袋内,采用用放射学、形态学、碱性磷酸酶(ALP)检测等方法对其成骨效应进行研究。结果:在以bBMP为成骨因子的实验区中,实验组b具有高效的骨诱导活性,其成骨量显著高于对照组b、对照组FS及空白对照组(P<0.01);在以rhBMP-2为成骨因子的实验区中,实验组r同样具有高效的骨诱导活性,其成骨量也显著高于对照组r、对照组FS及空白对照组(P<0.01)。结论:以FS为载体复合BMP的注射型骨修复材料具有高效的骨诱导活性。     

复合骨形态发生蛋白2及碱性成纤维细胞生长因子注射型骨修复材料对兔骨髓基质细胞增殖和超微结构的影响

目的观察以纤维蛋白胶(fibrinsealant,FS)为载体的注射型骨修复材料对体外培养的兔骨髓基质细胞(marrowstromalcell,MSC)增殖和超微结构的影响。方法实验分组为实验组(FS+bFGF+rhBMP-2)、对照组1(FS)、对照组2(FS+bFGF)、对照组3(FS+rhBMP-2)及单纯对照组。采用细胞培养、MTT及电镜等方法对各组兔MSC的增殖及超微结构进行研究。结果(1)各组材料对细胞促增殖作用由强到弱依次是:对照组2(FS+bFGF)、实验组(FS+bFGF+rhBMP-2)、对照组1(FS)、对照组3(FS+rhBMP-2)、单纯对照组,差异有显著性(P<0.05);(2)扫描电镜观察发现,材料表面粗糙,有微孔存在,各组细胞与材料融合生长。透射电镜观察发现:实验组的绝大部分细胞呈成骨细胞表型,细胞增殖状态旺盛,分化好。各对照组细胞或是细胞增殖活性高,但向成骨细胞表型分化差,或是向成骨细胞表型分化好,但细胞增殖活性较差。结论FS+bFGF+rhBMP-2即可显著促进MSC增殖和兔MSC向成骨细胞方向的分化水平。     

先天性胫骨假关节患者染色体核型的初步分析

目的 先天性胫骨假关节(congenital paseudarthrosis of tibia,CVF)病因尚不清楚，通过细胞培养及染色体核型研究的方法了解先天性胫骨假关节患染色体核型的情况，探讨其与神经纤维瘤病(neurofibromatosis，NF)之间的相关性。方法 患来自西京医院骨科1982—1999年手术治疗的28例CPT患中有随访记录的患10例。所有患均经病理学及临床检查确诊。男7例，女3例；左侧5例，右侧4例，双侧1例；年龄4—17岁，平均11．5岁。7例患躯干上有奶油咖啡斑。取患的外周抗凝血1—2ml，无菌条件下加入含有植物凝血素(phytahematoagglutinin PHA)及体积分数为100ml／L小牛血清的1640培养液中，37℃恒温箱内培养70—72h。于终止培养前4h加入秋水仙素(10μg／ml)继续培养直至收获，制片，行染色体核型分析。结果 10例CPT患的淋巴细胞培养均获得可分析标本。所有患染色体核型均正常，未见染色体核型缺失及多倍体，均为46XY或46XX型。结论 NF不是CPT的病因，他们在基因定位方面可能存在某种联系。     

氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响,初步探讨其治疗瘢痕的作用机制.方法:采用MTT比色法和3H-脯氨酸掺入法,观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.结果:氢化可的松(0.1 g/L)能够抑制体外培养成纤维细胞增殖(MTT值0.523±0.051 vs 0.347±0.036,P<0.05)及分泌胶原的功能[3H-脯氨酸掺入量(248±6) Bq vs (181±6) Bq,P<0.05],并呈剂量依赖性(r=-0.8208).结论:氢化可的松可通过抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成,从而达到治疗瘢痕的作用.