RYBP慢病毒表达载体的构建及对结肠癌细胞HCT116增殖的影响

目的 构建RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP,包装慢病毒颗粒并感染结肠癌细胞HCT116,分析RYBP的表达及对HCT116细胞增殖的影响.方法 用DNA克隆技术在慢病毒表达载体pWPI-IRES-EGFP序列中引入Flag标签及多个单酶切位点序列,改造后的载体命名为pWPI-linker.采用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)从肝癌SK-Hep-1细胞总RNA中扩增RYBP的全长开放阅读框序列,克隆人pWPI-linker载体中,得到pWPI-RYBP.利用人胚肾细胞HEK293T包装重组慢病毒颗粒,分析该慢病毒颗粒感染HCT116细胞的效率、RYBP蛋白的表达,用MTS方法分析RYBP过表达对HCT116细胞增殖的影响.结果 用改造的pWPI-linker载体成功构建慢病毒表达载体pWPI-RYBP包装的慢病毒颗粒能高效感染HCT116细胞,表达出Flag-RYBP融合蛋白.MTS方法分析表明,RYBP的过表达抑制HCT116细胞的增殖,增殖抑制率达26.1％.结论 改建的慢病毒表达载体pWPI-linker带有可供选择的多个单克隆位点和标签蛋白序列,为今后基于pWPI载体的克隆构建和表达蛋白质的分析提供了极大的便利;RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP的构建为进一步研究RYBP的生物学功能及基因治疗奠定了基础.     

重庆地区慢性咳嗽病因的多中心研究

目的探讨重庆地区慢性咳嗽的病因和针对性治疗的疗效。方法采用中华医学会和美国胸科医师学会的慢性咳嗽诊治指南,对233例慢性咳嗽患者的病因进行分析,根据临床表现、辅助检查和特异性治疗效果综合判断;针对慢性咳嗽的病因给予特异性治疗,停药4周后判断疗效。结果233例患者中明确诊断216例（92．7％）,病因未明者17例（7．3％）。216例病因明确者中,单一病因163例（75．45％）,双重病因44例（20．37％）,三重以上病因9例（4．10％）。病因包括上气道咳嗽综合征（UACS）127例（44．4％）,咳嗽变异性哮喘（CVA）73例（25．5％）,胃食管反流性咳嗽（GERC）26例（9．1％）,感染后咳嗽6例（2．1％）,血管紧张素转换酶抑制剂类药物（ACEI）性咳嗽6例（2．1％）,变应性咳嗽（AC）5例次（1．7％）,慢性支气管炎3例次（1．0％）,其他病因累计24例（8．4％）。慢性咳嗽前五位病因为UACS、CVA、GERC、感染后咳嗽及ACEI相关性咳嗽。216例明确诊断的患者经特异性治疗后,59例（25．3％）患者咳嗽痊愈,114例（49．3％）患者咳嗽缓解,40例（17．1％）无效。结论UACS、CVA和GERC是重庆地区慢性咳嗽的常见原因,多数患者经针对性治疗后症状能够缓解。     

Snapin蛋白研究进展

细胞的分泌功能是一个涉及许多蛋白质、脂质分子等物质并有多个细胞器参与的复杂过程,通过囊泡胞吐过程来完成,真核细胞内生物大分子的分泌通过组成型和调节性囊泡运输两种方式进行,其中组成型囊泡运输涉及了一系列细胞器与细胞膜之间的囊泡融合,囊泡与细胞膜的融合涉及到了几个蛋白家族包括:SNAREs,Rab蛋白和Sec1/Munc-18相关蛋白等.SNARE(可溶性N-乙基-马来酰胺敏感因子结合蛋白受体)蛋白是介导囊泡与细胞膜或其他细胞器融合的主要蛋白分子, 参与囊泡内蛋白质与膜转运、调节性和非调节性囊泡胞吐活动的激活和融合过程.囊泡融合是通过几种辅助蛋白与SNAREs相互作用完成的,Snapin就是SNAREs的辅助蛋白之一.     

土槿乙酸酰胺对 HeLa 细胞周期的影响

目的 通过研究土槿乙酸衍生物土槿乙酸酰胺 (PB-LY) 对 HeLa 细胞周期的影响,探讨 PB-LY 的抗肿瘤作用机制。方法 采用流式细胞术检测 PB-LY 对 HeLa 细胞周期的影响;采用 RT-PCR 法检测 PB-LY 对 HeLa 细胞周期相关基因 p53 和 p21 mRNA 表达的影响。结果 PB-LY 可明显减少 G₁ 期的 HeLa 细胞比例,明显增加 G₂₊M 期细胞的比例,上调 p53 基因的表达,同时协同下调 p21 基因的表达。结论 PB-LY 可通过增加细胞周期相关基因 p53 基因的表达和减少 p21 基因的表达,使 HeLa 细胞的周期阻断在 G₂₊M 期,从而阻滞 HeLa 细胞的生长。     

DR的图像质量控制与影响因素

我院放射科购进了DR系统,图像后处理工作站的应用,实现了所有影像学资料的数字化存储与传输。新系统的应用使照片质量有了很大提高,同时也使X线影像的质量控制上升到一个全新的理念。它将传统的X线摄影模拟图像转化为数字化图像,使普通的X线摄影技术及图像质量发生了质的,变化。然而任何事物都有它不足的一面,DR在信息采集、信息处理、信息输出等成像步骤过程中,每一个环节都可能对影像的质量产生影响,避免防范影响DR照片质量因素是放射科质量管理和质量控制的重要工作。     

简易组织芯片仪的制作

与传统的病理研究方法相比,组织芯片具有省时、经济、信息量大,并能节约标本及大大提高实验效率等优点,应用非常广泛,但由于组织芯片机价格昂贵,难以普及推广。笔者利用本科室退役的显微镜研制组织芯片仪,并用其制作组织芯片,取得很好的效果,现报告如下。     

应用组织芯片研究Claudin-4在胃腺癌中的表达及临床意义

目的探讨紧密连接蛋白Claudin-4的表达与胃腺癌侵袭转移及预后的相关性。方法应用组织芯片免疫组织化学染色方法检测胃腺癌不同区域（黏膜层非肿瘤性胃腺上皮,黏膜层胃癌组织,肿瘤中心区胃癌组织,侵袭前沿区胃癌组织及淋巴结转移灶胃癌组织）Claudin-4的表达情况。结果黏膜层非肿瘤区发生肠上皮化生的胃腺上皮Claudin-4高表达,而正常胃腺上皮低表达（P〈0．001）;在癌组织中,从黏膜层、肿瘤中心区、侵袭前沿区到淋巴结转移灶中胃癌组织Claudin-4表达呈现先上升后下降的抛物线式表达的趋势,肿瘤中心区胃癌组织Claudin-4表达最高,淋巴结转移灶胃癌组织Claudin-4表达最弱（P〈0．05）。对肿瘤中心区胃癌组织Claudin-4表达的分析发现,Claudin-4的表达与胃腺癌Lauren分型有关,肠型胃癌Claudin-4的表达高于弥漫型胃癌（P〈0．05）,而与胃腺癌的浸润程度呈负相关关系（P〈0．05）。Claudin-4在胃腺癌的表达与患者的术后生存率没有明显关系。结论Claudin-4的表达与胃腺癌的侵袭转移有一定的关系,可能参与胃腺癌侵袭转移过程中上皮与间叶表型的转化。     

超细内镜、无痛内镜与普通内镜临床对比研究

目的评价超细胃镜、无痛胃镜与普通胃镜应用于上消化道疾病诊疗的安全性、效果和价值。 方法随机对有上消化道疾病的274例患者做经超细胃镜、普通胃镜或无痛胃镜检查,其中经口超细胃镜82组例,经鼻超细胃镜组32例,普通胃镜组80例,无痛胃镜组80例。对胃镜检查前、检查中患者的血压、心率、血氧饱和度及检查过程中的反应进行观察。 结果普通胃镜患者检查中收缩压、舒张压、心率较检查前有显著性升高（P〈0．05）。无痛胃镜患者检查中收缩压、心率及血氧饱和度较检查前有显著性降低（P〈0．05）,舒张压有所下降,但与检查前比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。而经口与经鼻胃镜患者检查中收缩压、舒张压、心率较检查前有升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）。经鼻超细胃镜检查中流涎、恶心、呕吐、躁动、咳嗽等不适症状明显减少,而无痛胃镜检查中无流涎、恶心呕吐、躁动、咳嗽等不适症状,检查后患者均对受检过程无记忆,愿意再次接受内镜检查。 结论四种胃镜检查中,经鼻超细胃镜的安全性优于无痛胃镜,而无痛胃镜的耐受性最好,可应用于精神障碍病人和对内镜有恐惧感的病人。     

深圳市新闻工作者健康检查结果分析

目的了解深圳市新闻工作者身体健康状况及发病特点,为该人群健康教育与行为干预工作提供依据。方法资料来源于2008年3254名某报业集团职工的健康检查,对结果进行统计分析。结果在参加体检的3254人中,发现129种疾病,20196种次项目异常,人均异常项目种次为6.20,主要疾病依次为高BMI（35.34%）、脂肪肝（19.39%）、高尿酸血症（14.63%）、高血脂症（12.29%）、高血压（10.26%）、高血糖（3.44%）和恶性肿瘤（0.061%）。结论新闻工作者主要疾病检出率较高,与其职业和工作特点以及生活方式有关,须加强健康教育与行为干预工作。     

清洁灌肠后保留灌肠辅助治疗婴儿腹泻效果观察

目的 观察清洁灌肠后保留灌肠治疗婴儿腹泻的效果.方法 将100例婴儿腹泻患儿随机分为观察组(50例)和对照组(50例),对照组采用蒙脱石散、小儿腹泻散加生理盐水制成混悬液加热至39～41℃保留灌肠治疗;观察组清洁灌肠后采用相同灌肠液保留灌肠治疗.结果 两组治疗效果及保留灌肠后初次排便时间比较,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 清洁灌肠后保留灌肠有助于延长灌肠液在婴儿肠道内的停留时间,促进药物吸收,可提高婴儿腹泻的治疗效果.