小鼠睾丸新基因TSEG-2的克隆及表达分析

目的:利用生物信息学手段克隆小鼠睾丸特异性基因TSEG-2。方法:从二级表达序列标签(EST)数据库ZooDDD中获得小鼠正常睾丸表达的EST,通过dbEST数据库检索出与其高度同源的EST序列,构建EST叠加群,Biolign软件拼接,GeneScan软件预测contigs对应的基因组序列中的外显子、内含子;针对开放阅读框设计引物序列,采用RT-PCR从小鼠睾丸组织中克隆新基因的cDNA,分析该基因在小鼠睾丸不同发育阶段、隐睾中及各脏器中的表达,并对测序结果进行生物信息学分析。结果:成功克隆了小鼠睾丸新基因TSEG-2,全长451bp,开放阅读框为267bp,编码88个氨基酸。RT-PCR证实该基因开放阅读框正确,TSEG-2在小鼠睾丸组织中高表达,在4、9、14、18、21、38日龄和2、6月龄小鼠睾丸组织中呈现规律性表达,在隐睾组织中表达减弱,且与小鼠其他cDNA无同源性,获得GenBank登录号EU079025。功能区分析发现,小鼠TSEG-2cDNA序列定位于染色体15qE3,为可溶性非分泌型蛋白,有2个可能的蛋白激酶C(PKC)磷酸化位点,1个酪蛋白激酶Ⅱ(CK2)磷酸化位点,并可能是一种核蛋白。结论:获得小鼠睾丸特异性表达基因TSEG-2,诱导小鼠隐睾发生的17-β雌二醇可引发基因TSEG-2的下调,为进一步研究该基因的生物学功能和表达调控奠定了基础。     

激光共聚焦内镜对慢性萎缩性胃炎和肠上皮化生的诊断价值

目的 比较共聚焦内镜与普通白光内镜对萎缩性胃炎和肠上皮化生的诊断价值。方法对2012年1月至5月来我院行胃镜检查的89例患者,全部在普通白光内镜及共聚焦内镜下对胃黏膜进行观察,并对病变部位进行活检病理学诊断。结果89例患者共观察286个病变部位。普通内镜诊断萎缩性胃炎95个部位,共聚焦内镜诊断40个部位,病理学诊断萎缩37个部位,共聚焦内镜与病理学诊断符合率为94．6％,普通内镜与病理学诊断符合率为38．95％;普通内镜诊断肠上皮化生54个部位,共聚焦内镜诊断170个部位,靶向活检诊断161个部位,共聚焦内镜与病理学诊断符合率为84．47％,普通内镜与病理学诊断符合率为33．54％。共聚焦内镜对萎缩性胃炎和肠上皮化生的诊断符合率明显高于普通内镜组,并且共聚焦内镜与病理学诊断具有很好的一致性（P=0．453,kappa值=0．895和P=0．298,kappa值=0．577）。结论共聚焦内镜对萎缩性胃炎和肠上皮化生具有较高的诊断价值,值得临床推广。     

缺氧诱导丝裂原因子在小鼠支气管肺发育不良模型中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导丝裂原因子(HIMF)在小鼠支气管肺发育不良(BPD)模型中的表达及意义.方法 32只新生昆明小鼠随机分为对照组(n=16)、高氧暴露组(n=16),分别置于正常空气(21%,O2)及氧箱(85%,O2)中,于暴露后第7、14、21、28天每组随机选取4只,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态学改变,运用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法检测肺组织中HIMF mRNA和蛋白表达水平.结果 对照组肺泡逐渐发育成熟,大小均匀,肺间质变薄;高氧暴露组肺泡隔增厚、肺泡融合,放射状肺泡计数减少31.1%～65.3%;与对照组比较,高氧暴露7、14、21 d后肺组织HIMF mRNA和蛋白水平分别增高2.435～2.528倍(P<0.05)、2.45～5.42倍(P<0.05),而高氧暴露28 d后分别下调52.81%(P<0.05)、74.60%(P<0.05).结论 成功建立小鼠BPD模型,HIMF基因表达异常可能参与BPD的发生、发展过程.     

Growth-inhibitory Effects of Curcumin on Ovary Cancer Cells and Its Mechanisms

Sinceanti carcinogenicagentsalsobringabouttheapoptosisinnormalcellswhiletheyinduceapop tosisinneoplasmcells ,inrecent years ,efforthasbeendirectedatlookingforneweffectiveanti cancerdrugswithlowtoxicity .Curcuministhemajoractivecomponentofcurcuma ,whichisa…     

Smac和Caspase-3基因在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义

Smac(second mitochondria—derived activator of caspase)和Caspase-3均为近年来发现的细胞凋亡的主要调节因子。本研究采用免疫组化方法检测这两者在神经母细胞瘤(Neuroblastoma，NB)中的表达，并探讨与临床分期、病理类型和患者预后的关系。     

稳定过表达smac 基因胃癌细胞株的建立及其化疗敏感性研究

 目的　探讨smac 基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响。方法　采用脂质体将smac 基因真核表达载体pcDNA3. 1-smac 及空白载体pcDNA3. 1 转染入胃癌细MKN245 ,G₄₁₈ 筛选获得抗性亚克隆细胞株,RT-PCR 和Western Blot 检测癌细胞smac 基因表达,四甲基偶氮唑盐(MTT) 比色法、克隆形成实验检测丝裂霉素(MMC) 对癌细胞的生长抑制效率。结果　建立分别稳定表达smac 基因、新霉素抗性基因(neo) 的胃癌亚克隆细胞株MKN-45/ smac 、MKN-45/ neo 。RT2PCR 和Western Blot 证实MKN245/ smac 细胞的smac mRNA 及蛋白表达水平均显著高于MKN-45 、MKN-45/ neo ( P < 0. 01) 。10μg/ ml MMC 作用24h 后,MKN245 、MKN245/ neo 细胞生长抑制率分别为27. 85 %、28. 12 % , 而MKN-45/ smac 则高达43. 71 %( P < 0. 01) ;同MKN-45 、MKN-45/ neo 细胞株比较,MKN-45/ smac 的克隆形成能力分别降低了14. 07 %( P < 0. 01) 、15. 13 %( P < 0. 01) 。结论　稳定转染smac 基因使其在胃癌细胞株中过表达,能显著提高癌细胞对MMC 的敏感性,为改善胃癌化疗效果奠定了实验基础。     

人乳头瘤病毒感染与非小细胞肺癌发生的相关性

目的　初步探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV) 感染与非小细胞肺癌(non small cell lungcancer, NSCLC) 发生的相关性。方法　用通用型引物PCR检测60 例NSCLC和30 例肺良性病变组织中HPV的感染率; 用分型引物对阳性标本进行HPV16,18分型。用免疫组化方法检测P53及Rb蛋白在肺癌组织中的表达。结果　60例NSCLC及30例良性病变组织中HPV的检出率分别为21 例(35. 0%) 和1 例(3. 3%), 二者差异具有显著性意义(P<0 .05)。肺鳞癌HPV感染率(48 .6%) 显著高于肺腺癌(13. 0%) (P<0. 05), 早期(Ⅰ期) 肺癌HPV感染率(48. 6%) 显著高于进展期(Ⅱ~Ⅲ期, 18. 5%) (P<0 .05), 吸烟组HPV感染率(47 .4%) 显著高于非吸烟组(13 .6%) (P<0 .05)。60 例肺癌组织中34 例P53 蛋白阳性(56 .7%), 42 例Rb蛋白阳性(70%), 二者的表达在HPV感染阳性组和阴性组无显著性差异。结论　HPV感染在NSCLC的发生中可能起到一定的作用。     

Barrett食管的病因与流行病学

Barrett食管（BE）是一种具有重要临床意义的食管疾病。它与食管腺癌的发生密切相关，是一种主要的食管腺癌癌前病变，欧美近年来食管一胃交界部腺癌发生率明显升高，为所有恶性肿瘤中增长速度最快的一种，食管的原发性腺癌中约50％来自BE。