Smac基因过表达对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的影响

目的探讨转染Smac基因过表达对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响,寻求改善宫颈癌放疗疗效的新途径。方法将Smac基因转染入宫颈癌HeLa细胞株,G418筛选获得亚克隆细胞,RTPCR、Westernblot法检测癌细胞Smac基因表达。X射线照射后,采用MTT比色法检测癌细胞体外生长活性;透射电镜、AnnexinV-FITC和碘化丙啶双染色流式细胞仪法检测癌细胞凋亡及比率;Westernblot、比色法检测细胞内Caspase-3蛋白表达和活性水平。结果RTPCR和Westernblot证实所获宫颈癌亚克隆细胞HeLaSmac的SmacmRNA、蛋白表达水平均显著高于HeLa(P<0.01)。8GyX射线照射后,HeLaSmac细胞生长活性较HeLa细胞减弱10.19%(P<0.01),透射电镜下可见部分HeLaSmac细胞发生典型凋亡形态学改变,凋亡率为16.4%,显著高于对照组HeLa细胞(凋亡率为6.2%,P<0.01)。与HeLa细胞比较,HeLaSmac细胞内Caspase3表达显著增加(P<0.01),活性水平提高3.42倍(P<0.01)。结论稳定转染外源性Smac基因使其在宫颈癌细胞株中过表达,能提高癌细胞中Caspase3的表达和活性,增强放疗对癌细胞的诱导凋亡作用,有望成为改善宫颈癌放疗效果的新途径。     

早期生长反应基因-1在胃癌中异常表达及其与肝素酶转录水平的关系

胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,侵袭及转移是导致其预后不良的主要原因~([1]).解析胃癌侵袭、转移的分子机制及其防治策略已成为关注的焦点.     

姜黄素前体化合物诱导膀胱癌细胞凋亡的研究

目的观察姜黄素前体化合物诱导膀胱癌细胞凋亡的生物学效应,并探讨其可能的机制。方法N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素分别作用于人膀胱癌EJ细胞、肾小管上皮HKC细胞6~24 h后,采用台盼蓝活细胞拒染法检测细胞生长活性,透射电镜观察细胞超微结构改变,DNA片段化原位荧光标记技术、流式细胞术检测细胞凋亡及比率。结果10μmol.L-1~40μmol.L-1的N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素作用6~24 h后,EJ细胞生长抑制率分别为6.11%~66.23%(P<0.05)、8.96%~68.21%(P<0.05),呈浓度、时间依赖性;部分癌细胞出现凋亡形态学改变,DNA直方图上可见“亚G1峰”,12 h细胞凋亡率分别为10.13%~23.36%(P<0.05)、12.42%~28.56%(P<0.05)。两种前体化合物对HKC细胞生长的抑制作用较同浓度姜黄素降低(P<0.05)。结论姜黄素前体化合物能在体外有效诱导膀胱癌EJ细胞凋亡,降低对正常二倍体细胞生长的抑制作用,为深入研制肿瘤靶向性化疗药物提供了新的途径。     

雌二醇诱导的小鼠隐睾模型的建立及形态学观察

目的 建立雌二醇诱导的小鼠隐睾模型,并对其进行组织形态学观察.方法 35只雄性新生BALB/c仔鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组和实验组.实验组(n=15)于牛后第3～30天皮下注射17-β雌二醇4 μl(4 μg/d),溶剂对照组(n=10)皮下注射等量丙二醇,正常对照组不给予任何处理.生后第35天,观察各组睾九位置、大小,采用HE染色、透射电镜进行组织形态学观测.结果 实验组隐睾发生率100%,均为双侧隐睾,而正常对照组和溶剂对照组无隐睾发生.与对照组相比,实验组睾丸大小明显缩小,生精小管上皮数日减少,管腔消失,精母细胞和精原细胞核皱缩,支持细胞和问质细胞核仁空泡变性,未见成熟精子.结论 通过雌二醇干预法能成功诱导小鼠隐睾模型,为进一步研究隐睾的发病机制和治疗策略奠定了基础.     

膀胱癌组织中X-染色体连接的凋亡抑制蛋白表达及其对化疗敏感性的影响

为探讨X-染色体连接的凋亡抑制蛋白（XIAP）在膀胱癌组织中的表达及其对化疗敏感性的影响。采用免疫组织化学方法检测6例正常膀胱黏膜上皮组织、47例膀胱移行细胞癌组织中XIAP的表达。脂质体方法介导XIAP基因转染膀胱癌T24细胞，通过G418进行稳定筛选。逆转录聚合酶链反应检测转染前后T24细胞内XIAP的表达。分别采用0．005mg／ml、0．05mg／ml低剂量丝裂霉素诱导凋亡启动，MTT比色分析检测癌细胞生长活性，3’末端脱氧核苷酰转移酶介导生物素标记法检测细胞凋亡率。发现膀胱组织中XIAP呈中度阳性表达，阳性率78．7％，其阳性率与肿瘤分级和分期无关（P＜0．05）。     

原发双侧乳腺癌1例

患者女性,62岁。左侧乳头病痒一年,发黑伴溢液,近来色素沉着明显,皮肤变厚、粗糙糜烂渗液信侧乳腺发现包块刀天。查体：左乳头及乳晕区表面褐色．糜烂,未及明显包块;右乳外上象限距乳头Zcm处可及4cmx3cmxZcm大包块．质硬不活动。病理检查巨检：见左乳单纯切除标本,乳头及乳晕区褐色,表面粗糙不平,其下方未触及明显包决,右乳根治术标本,外上象限距乳头Zcm处可及4cmx3cmxZcln包块～个,切面灰白质硬。境检：左乳头表皮内单个散在或呈片团状分布的肿瘤细胞体积大,约比同层表皮细胞大2－3倍,圆或卵圆形,境界清楚,胞浆丰富呈气…     

激光共聚焦内镜对慢性萎缩性胃炎和肠上皮化生的诊断价值

目的 比较共聚焦内镜与普通白光内镜对萎缩性胃炎和肠上皮化生的诊断价值。方法对2012年1月至5月来我院行胃镜检查的89例患者,全部在普通白光内镜及共聚焦内镜下对胃黏膜进行观察,并对病变部位进行活检病理学诊断。结果89例患者共观察286个病变部位。普通内镜诊断萎缩性胃炎95个部位,共聚焦内镜诊断40个部位,病理学诊断萎缩37个部位,共聚焦内镜与病理学诊断符合率为94．6％,普通内镜与病理学诊断符合率为38．95％;普通内镜诊断肠上皮化生54个部位,共聚焦内镜诊断170个部位,靶向活检诊断161个部位,共聚焦内镜与病理学诊断符合率为84．47％,普通内镜与病理学诊断符合率为33．54％。共聚焦内镜对萎缩性胃炎和肠上皮化生的诊断符合率明显高于普通内镜组,并且共聚焦内镜与病理学诊断具有很好的一致性（P=0．453,kappa值=0．895和P=0．298,kappa值=0．577）。结论共聚焦内镜对萎缩性胃炎和肠上皮化生具有较高的诊断价值,值得临床推广。     

反义寡核苷酸阻断雄激素受体表达对前列腺癌细胞生长活性的影响

目的　探讨反义技术阻断雄激素受体 (AR)基因表达对前列腺癌细胞生长的影响。　方法　设计、合成针对AR基因反义寡核苷酸 (ASODN) ,在脂质体介导下转染前列腺癌细胞。采用RT PCR方法检测AR基因表达 ;MTT比色法检测细胞增殖活性 ;透射电镜、TUNEL检测细胞凋亡 ;流式细胞术分析细胞周期时相。　结果　 0 .5～ 2 .0 μmol LASODN作用 12～ 36h ,癌细胞ARmRNA水平降低 10 .45 %～ 82 .10 %(P <0 .0 5 ) ,细胞增殖活性抑制 11.8%～ 5 6 .9%(P <0 .0 5 ) ,细胞周期阻滞于G2 M期 ,部分细胞呈现典型凋亡形态学改变 ,凋亡比率为 34.2 5 %(P <0 .0 1)。　结论　应用ASODN封闭AR基因表达能抑制前列腺癌细胞体外生长活性 ,有望成为前列腺癌基因治疗的有效策略。     

BAK基因过表达对膀胱癌细胞的诱导凋亡作用及其分子机制

目的：探讨BAK基因过表达对膀胱癌的诱导凋亡效应及机制。方法：脂质体介导BAK基因转染膀胱癌EJ细胞1－7d后，逆转录聚合酶链反应检测BAK基因表达，细胞计数法检测癌细胞生长活性，DNA Ladder法、吖啶橙－溴化乙锭荧光染色法及原位末端转移酶标记技术检测癌细胞凋亡，免疫组织化学法检测癌细胞Caspase-3、Bcl-2,p53表达。结果：转染1－7d后，癌细胞BAK基因表达显著增强（P＜0．01），体外生长抑制20．66％－35．58％（P＜0．01），部分癌细胞呈现凋亡形态学变化，凋亡率为18．0％－20．6％（P＜0．01），癌细胞Caspase-3表达增强6．6倍（P＜0．01）Bcl．2和P53表达差异无显著性（P＞0．05）。结论：BAK基因表达能显著诱导膀胱癌细胞凋亡，其中Caspase-3激活是其作用机制之一。     

Barrett食管的临床病理特征

Barrett食管（BE）的最新定义是食管远端组织活检有肠上皮化生（IM）存在。我们根据最新的BE诊断标准，初步探讨了BE的临床病理特征。