环磷酰胺对雄性大鼠生精功能的影响

目的 观察环磷酰胺对大鼠生精功能的影响.方法 8周龄成年雄性sD大鼠,分6组,每组16只.前5组为实验组,给药方法分别为每日10、20、40、80、100 mg/kg,另1组为对照组.胃管给药2周和4周后,处死大鼠,取附睾精子行CASA检查;取睾丸组织苏木素.伊红(HE)染色分析睾丸曲细精管结构变化,TUNEL法检测睾丸曲细精管细胞凋亡情况.留取血清标本采用电化学发光法检测性激索水平.结果 环磷酰胺每日40 mg/kg喂养4周,大鼠存活率93.8%,精子数量明显减少(29.36±8.64)X 106个/ml,精子活力降低(22.25±2.03)%,睾丸生精上皮细胞明显损伤变性(58.1±1.2)%,血清睾酮水平下降(0.149±0.020)μg/L.这些指标的变化与环磷酰胺给药剂量及时间旱负相关(P<0.05).结论 通过环磷酰胺诱导可以成功建立大鼠少精/无精症动物模型,环磷酰胺主要通过坏死和凋亡两种途径导致睾丸曲细精管结构变化,导致生精细胞减少并最终引起少精/无精症.     

抗凋亡因子XIAP和PED/PEA-15在前列腺癌(PC-3)中的表达及对细胞凋亡的影响

目的 检测抗凋亡因子XIAP与PED／PEA-15在前列腺癌细胞（PC-3）中的表达，探讨二者对前列腺癌细胞凋亡的影响。方法 应用半定量RT—PCR法检测前列腺癌细胞（PC-3）中PED／PEA-15和XIAP的表达。设计并构建PED／PEA-15和XIAP特异的siRNA载体，以脂质体法转染二者的siRNA载体至前列腺癌细胞（PC-3）中，半定量RT-PCR法检测特异siRNA载体对PED／PEA-15和XIAP转录的影响；光镜观察细胞形态改变；流式细胞法检测细胞凋亡的变化。结果 半定量RT-PCR显示PED／PEA-15和XIAP均在前列腺癌细胞（PC-3）中高表达。酶切和DNA测序证实XIAP和PED／PEA-15siRNA载体构建成功。共转染XIAP和PED／PEA-15siRNA载体入PC-3细胞，可导致XIAP和PED／PEA-15的转录抑制，并增加PC-3细胞对阿霉素的敏感性，凋亡明显增加，处理组凋亡率为79％，对照组为46％，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 PED／PEA-15和XIAP在前列腺癌的凋亡中可起重要作用。     

高分级前列腺上皮内瘤和前列腺癌中Ezrin的表达及意义

目的探讨埃兹蛋白（Ezrin）在高分级前列腺上皮内瘤（HGPIN）及前列腺癌（CAP）中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测44例CaP、12例HGPIN、20例前列腺增生（BPH）及10例正常前列腺（NP）组织中Ezrin的表达。结果31例（70．45％）CaP中Ezrin呈中等或强表达，12例HGPIN中Ezrin均呈弱或中等表达．20例BPH和10例NP中Ezrin没有或星弱表达。在CaP中。Gleason评分（GS）8～10分组的Ezrin表达明显高于7分组和5～6分组（P〈0．05），7分组Ezrin表达明显高于5～6分组（P〈0．05）。结论Ezrin的表达可能与CaP的发生有关，其对诊断HGPIN和判断CaP的转移及预后有重要意义。     

开放手术治疗上尿路结石580例

报告1975～1988年我院采用开放手术治疗上尿路结石580例(593次),肾结石残石率12%,无手术死亡。介绍了改进的腰部手术切口的操作,以及术中应用B超探查残石的注意事项;讨论了肾脏切口和取石术式以及为降低残石率,取石中肾内出血的处理以及输尿管切开取石等问题。     

肾上腺皮髓质混合性增生症六例报告

肾上腺皮髓质同时增生临床罕见。我们 1997年 1月至 1999年 6月 ,收治肾上腺皮髓质增生症 6例 ,占同期收治肾上腺疾病患者的 8.5 % ,报告如下。资料和方法　本组 6例。男 3例 ,女 3例。年龄 34～ 5 0岁 ,平均 4 3岁。左侧 3例 ,双侧 3例。病程 1周～ 2 7年。临床表现 :5例似嗜铬细胞瘤症状 ,表现为劳累、饮浓茶或无明显诱因的发作性头昏、头痛、心慌、面色苍白、出冷汗 ,有恐惧感 ,四肢乏力 ,心前区疼痛 ,双上肢平举时震颤。症状持续约 10ｍｉｎ ,反复发作 ,发作时血压最高达 2 0 0 / 130ｍｍＨｇ ,发作间歇期血压 12 0～ 14 0 / 80～ 90ｍ…     

5'-FITC标记的PCNA反义寡核苷酸在人膀胱癌细胞BIU-87中的分布及稳定性分析

目的观察硫代修饰型及天然型PCNA反义寡核苷酸在脂质体介导下或直接转染人膀胱癌细胞BIU-87后在细胞内的分布及其稳定性。方法将异疏氰酸荧光素（5＇－FITC）标记的18mer硫代磷酸化修饰型及未修饰型PCNA反义寡核苷酸在脂质体介导下或直接转染人膀胱癌细胞BIU－87，应用荧光显微镜观察转染细胞从细胞内的时相分布。结果修饰型反义核酸直接转染细胞后30分钟，少数细胞胞浆荧光呈离散型、点状分布，4小时后有少数细胞胞核有强荧光聚积。在脂质体介导下，荧光细胞数目明显增加，4小时后绝大多数细胞迅速积聚于细胞核，4～8小时后，细胞核内荧光强度进一步增强，12小时后细胞荧光减弱甚至消失。而非修饰型反义核酸在直接转染或脂质体介导下均发现荧光在3小时后消失。结论脂质体增加PCNA修饰型反义寡核苷酸与膀胱癌细胞BIU－87结合的数量，同时使其在细胞核内分布聚积明显；PCNA反义寡核苷酸硫代修饰具有更好的稳定性。     

锤头状核酶阻断雄激素受体基因表达的研究

目的　探讨核酶 (RZ)在细胞水平调节雄激素受体 (AR)基因表达的作用。方法　设计并合成针对AR的锤头状核酶序列 ,分子克隆技术构建活性核酶和无活性核酶表达载体 ,脂质体介导下转染雄激素受体表达阳性细胞株T47D。转染第 1～ 3天 ,应用免疫组织化学和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测细胞内AR基因表达水平。结果　AR活性核酶表达载体转染后 ,T47D细胞ARmRNA水平降低 2 2 .4%～ 50 .7% (P <0 .0 5) ,AR蛋白阳性细胞减少 7.1 0 %～1 1 .90 % (P <0 .0 5)。而无活性核酶对细胞AR基因表达差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　成功构建AR锤头状核酶表达载体 ,能特异性切割ARmRNA ,阻断雄激素受体基因表达     

环磷酰胺诱导少精子/无精子症大鼠模型所致睾丸、附睾IGF-I的变化

目的:探讨环磷酰胺(CP)对大鼠附睾和睾丸组织中胰岛素样生长因子I(IGF-I)表达的影响;方法:96只8周龄成年雄性SD大鼠,分为6组,每组16只。第1~5组分别给予CP 10、20、40、80、100 mg/(kg.d),第6组为对照组,给予生理盐水2 m l。胃管给药2周和4周后,处死大鼠,采用ELISA法对附睾组织洗脱液IGF-I进行定量检测;同时采用SP免疫组化法检测睾丸组织IGF-I的表达。结果:随着CP处理时间的延长和剂量的增加,IGF-I在大鼠附睾中的浓度逐渐下降,大鼠睾丸组织中IGF-I的表达也降低。结论:CP在引起大鼠少精子/无精子症的同时,可以显著降低大鼠附睾、睾丸IGF-I的含量和表达水平。IGF-I的降低与CP降低大鼠生精功能明显相关。