松果体分泌物释放入脑脊液主要通路的常规及消蚀法扫描和透射电镜研究

哺乳动物的松果体,为脑内一重要的神经内分泌器官。已发现脑脊液中存在松果体分泌物(如褪黑素Melatonin)。为探讨松果体分泌物直接释放入脑脊液通路的超微结构形态学证据。采用常规及NaOH消蚀法生物电镜样品制备技术,对成年日本猴松果体及其被囊进行了扫描和透射电镜研究。松果体囊由一层扁平上皮细胞和上皮下结缔组织构成。在面对蛛网膜下隙的囊上皮细胞和细胞间可见许多上皮孔(2～5μm);上皮下结缔组织内含成纤维细胞、胶原纤维、血管、松果体细胞突起(内含膜包密芯分泌颗粒)、有髓和无髓神经纤维等;它伸入松果体实质形成小叶间隔,分隔…     

雄激素对快速老化小鼠SAMP8海马神经元突触蛋白的快速影响

目的:研究去势以及去势后雄激素补充治疗对快速老化小鼠(SAMP8)海马神经元突触蛋白的快速影响。方法:7月龄健康雄性SAMP8小鼠,随机分为假手术对照组(对照组)、去势组、去势+睾酮补充治疗组(T组)和去势+双氢睾酮补充治疗组(DHT组)。通过免疫组织化学显色和免疫印迹研究去势及雄激素补充治疗对其海马突触蛋白SNAP25、Syt1、SYN、PSDD95、NR1和Drebrin表达的快速影响。结果:免疫组织化学显色结果显示,与SAMP8小鼠假手术组相比,去势组CA1区和CA3区各突触蛋白的OD值均明显降低。T组和DHT组CA1区和CA3区各突触蛋白的OD值较去势组明显增加。免疫印迹结果显示,与SAMP8小鼠假手术组相比,去势组海马结构各突触蛋白条带光密度的相对值均明显降低。T组和DHT组海马结构各突触蛋白条带光密度的相对值较去势组明显增加。结论:SAMP8小鼠去势后,雄激素缺乏导致海马结构内突触蛋白表达减少;去势后雄激素补充治疗能快速增加SAMP8小鼠海马结构内突触蛋白的表达。     

小鼠小脑皮质细胞PCNA表达的加龄变化

小鼠小脑皮质细胞ＰＣＮＡ表达的加龄变化赵春芳崔慧先张明（北京医科大学组胚教研室）增殖细胞核抗原ＰＣＮＡ主要出现在进行ＤＮＡ合成即Ｓ期的细胞核中。近年来的研究表明它对ＤＮＡ分子合成有重要意义。本研究应用免疫组织化学技术对ＰＣＮＡ在生后小鼠发育阶段小脑皮...     

不同发育时期鸡胚脊髓内背侧抑制性轴突导向蛋白的表达和神经嵴细胞迁移之间的相关性

目的 探讨不同发育时期的鸡胚脊髓内背侧抑制性轴突导向蛋白（draxin）表达与神经嵴迁移之间在空间分布上的相关性。方法 选
取HH 15-16、HH19-20阶段鸡胚各10只，应用原位杂交、免疫组织化学等方法，观察各阶段鸡胚脊髓内draxin的表达部位及神经嵴细胞迁移路
径，同时比较两者在空间分布上的相关性；应用活组织切片与碱性磷酸酶标记的draxin融合蛋白（draxin-AP）体外孵育的方法，检测迁移路
径内的神经嵴细胞是否具有与draxin蛋白直接结合的能力。结果 随着发育时间的推移，鸡胚脊髓内draxin的表达和神经嵴迁移都具有明显的
由颅侧向尾侧渐进性分布的特性，且draxin的表达部位位于神经管背侧、顶板和背侧生皮肌节之间，这些部位恰均位于神经嵴迁移路径的周围；
同时迁移路径内的神经嵴细胞具有与draxin蛋白体外直接结合的能力。结论 draxin表达在神经嵴迁移路径周围且部分神经嵴具有与draxin蛋白
体外直接结合的能力，推测draxin可能在鸡胚脊髓神经嵴迁移过程中发挥重要的调节作用。     

SD大鼠海马神经元原代培养及形态学观察

目的：掌握SD大鼠海马神经元体外培养方法,观察神经元形态学特点,测定细胞生长曲线。方法：新生SD乳鼠,剥离海马,胰酶消化,接种,1 d换为Neurobasal培养基;小鼠抗大鼠微管相关蛋白-2、兔抗鼠神经元特异性烯醇化酶为一抗,免疫细胞化学法计数阳性细胞百分率并显微摄影;1%甲苯胺蓝、苏木精伊红染色。结果：原代培养神经元6~8 h内开始贴壁,培养5~7 d突起增粗增长,连接成网,以多极神经元为主,胞体呈三角形、梭形、椭圆形;MAP-2、NSE染色为棕褐色,经鉴定神经元纯度达90%左右;细胞经历生长潜伏期,对数生长期,平台期;细胞核大而圆,HE染色胞核深蓝色,胞浆红色,胞体中可见尼氏颗粒。结论：相差显微镜下神经元形态多样,MAP-2、NSE染色阳性细胞,HE染色细胞核呈深蓝色,胞浆为红色,尼氏体位于细胞质内,神经突起内少见。     

基于CT图像构建颅骨三维有限元模型的研究

目的获得一种在普通个人电脑（PC）机上基于CT图像构建颅骨三维有限元模型的制作方法。方法对志愿者进行螺旋CT扫描,获得完整头部CT数据,在PC机上,将数据导入MIMICS 10.01软件,生成颅骨的三维可视化模型。并利用Geomagic studio 9进行模型后处理,模型经过验证。结果获得了一种基于CT断层图像数据,在普通PC机上应用Mimics 10.01软件及Geomagic studio 9软件,快捷准确的生成可用于有限元分析的颅骨局部三维数字模型。结论获得了一种基于CT断层图像数据在普通PC机上应用医学图像处理软件生成快捷准确的颅骨局部三维有限元模型的方法,建立的颅骨模型外形逼真,几何相似性及生物力学特性经过验证,可以用来进行有限元分析研究。     

磁刺激对小鼠海马原代神经元即刻早期基因和细胞骨架蛋白表达的影响

目的:观察磁刺激对小鼠海马原代神经元c-fos、活性调节的细胞骨架蛋白(Arc)和微管相关蛋白2(MAP2)的表达及神经元突起生长的影响,探讨磁刺激对细胞突起生长的影响机制.方法:体外培养的海马原代神经元,分为对照组,假刺激组,20％(20％％强度组)、30％(30％强度组)、40％最大刺激强度组(40％强度组),24 h后开始刺激,频率1 Hz,最大输出强度3.7T.连续刺激5d后应用荧光显色检测c-fos、Arc和MAP2阳性神经元免疫荧光强度,计数MAP2阳性神经元多突起神经元个数及细胞突起长度,并应用免疫印迹和RT-PCR技术对免疫荧光显色结果进行验证.结果:磁刺激能促进小鼠海马原代神经元突起数目和长度的生长,3个强度组多突起神经元(n≥2)占总神经元的比例以及海马原代神经元突起长度均高于对照组,且30％强度组高于20％、40％强度组,结果有统计学意义.免疫荧光显色30％强度组c-fos阳性神经元比例、Arc和MAP2免疫荧光强度高于相关对照组,差异有统计学意义.免疫印迹和RT-PCR结果同免疫荧光显色结果一致.结论:磁刺激能促进体外培养的海马原代神经元突起生长,其机制可能和c-fos、Arc和MAP2的表达上调有关.     

帕金森病患者脑标本黑质、纹状体内多巴胺转运体蛋白的表达

目的观察帕金森病(PD)患者脑标本黑质、纹状体多巴胺转运体(DAT)的表达。方法以免疫放射自显影显示DAT在黑质、纹状体的分布。结果正常人脑标本DAT强标记信号分布于黑质、壳核和尾状核。在PD患者脑标本,正常分布于壳核的DAT几乎均消失;尾状核DAT降低以背外侧部为主;黑质DAT标记减少程度轻于壳核、尾状核,以黑质腹侧区和外侧区为主。定量分析发现DAT强度在壳核比对照组降低90.9%(P<0.01),在尾状核背外侧降低66.7%(P<0.01);所分析黑质5个亚区的腹侧区和外侧区DAT表达降低明显,标记强度比对照组分别下降50.0%和35.9%(P<0.05,P<0.01);另3个亚区有降低趋势,差异无统计学意义。结论DAT在PD患者脑标本壳核及尾状核表达显著降低,为临床应用DAT配基显像技术诊断PD提供了直接的形态学依据。     

帕金森症患者脑标本5羟色胺转运体的表达

目的观察帕金森症(PD)患者脑标本5羟色胺转运体(SERT)的表达。方法以免疫放射自显影显示SERT在脑标本的分布。结果与健康组比,PD人脑标本中缝背核、黑质以及纹状体的SERT标记信号呈不同程度降低。定量分析发现SERT标记强度在壳、尾状核、黑质以及腹侧被盖区分别比健康组降低25.9%、31.1%、27.2%和24.7%,有显著差异;在中缝背核的4个亚区中,中缝背核腹侧部、背侧部、尾侧部及束间部分别比健康组显著减少了38.9%、37.3%、16.5%和37.0%;中缝正中核SERT标记强度未见显著降低。结论5羟色胺能体系的功能障碍可能参与了帕金森症的发生。     

小鼠海马CA1区轴棘突触树突棘头与突触后致密体大小的相关性

目的探讨小鼠海马CA1区兴奋性轴棘突触树突棘头与突触后致密体(postsynaptic density,PSD)是否存在大小的相关性.方法利用Golgi染色、超薄连续切片及NIH图像分析系统测量海马CA1区锥体细胞树突棘头及突触后致密体的大小.结果光镜下测量海马CA1区第2、3级顶树突的树突棘头平均面积为(0.429±0.230)μm2,频数分布为正偏态分布曲线.电镜所测树突棘头的平均体积为(0.032 63±0.024 03)μm3;PSD平均体积为(0.002 318±0.001 362)μm3,PSD与树突棘头体积之比为0.106±0.035.树突棘头体积频数分布曲线和PSD体积频数的分布曲线非常相似,两者呈显著的正相关.结论海马CA1区轴棘突触的树突棘头大小与其突触后致密体的大小具有显著的相关性.