人表皮细胞的体外培养

目的：对表皮细胞在不同的培养方法、不同的培养液及不同底物中的生长情况进行３方面的探讨，以便选出较好的一种组合进行表皮细胞培养，为改善烧伤皮源不足的问题打下基础。方法：①采用人包皮或体皮制成皮块、皮粒、表皮细胞悬液进行液体培养，比较３种方法中表皮细胞生长情况；②应用纯表皮细胞悬液进行空气液体界面培养，平铺平皿培养及培养瓶液体培养，比较表皮细胞贴壁、生长情况；③另将表皮细胞悬液接种于３种不同的培养液，即ＲＰＭＩ１６４０，ＲＰＭＩ１６４０＋ＭＥＭ及ＭＥＭ比较细胞生长差异。结果：①在适当的条件下，离体的皮肤皮块、皮粒及表皮细胞悬液经培养皆能生长和分化，而表皮细胞悬液生长速度较快，纤维母细胞污染机会最少；②以Ｂｉｏｆｉｌ为底物的空气液体界面法，细胞生长速度最快，培养出的单层表皮细胞膜片易取出，不收缩；③表皮细胞在ＭＥＭ，ＲＰＭＩ１６４０及ＲＰＭＩ１６４０＋ＭＥＭ３种培养基中的生长情况基本一致。结论：以Ｂｉｏｆｉｌ为底物的空气液体界面培养法应得到推广应用，它不仅加快了表皮细胞的生长速度，减少了纤维母细胞的污染，易于移植，同时解决了以往各种人工敷料仅针对Ⅱ度烧伤创面的治疗及暂时覆盖Ⅲ度创面的局限     

烧伤多菌败血症11例报告

我科自1970～1983年收治大面积烧伤561例,发生败血症57例,其中多菌败血症11例。本文通过对这11例病人的发病、发展、转归进行总结,以期提高对本病的认识和治愈率。临床资料一、性别与年龄:男4例,女7例;小儿4例,成人7例,年龄分布2～24岁。二、烧伤面积与深度:最小面积40%(小儿、Ⅲ°35%)最大面积95%(成人,深Ⅱ°90%,Ⅲ°5%) 三、败血症出现时间:回收期至溶痂早期9例,占82%,最早4天,最迟45天, 四、治愈率与死亡率:治愈1例,治愈率     

呼吸心跳骤停6次1例报告

一、病例报导余××,女,19岁,住院号281,372,烟花火药烧伤12小时,于1981年5月10日入院,入院前曾输液1,000ml,无尿。入院时T37.6℃,R30次,P160次,四肢厥冷,呈休克状态。心、肺等脏器未见异常,烧伤部位在头、面、颈及四肢,总面积70%,其中Ⅲ°40%,无呼吸道烧伤。入院后即按上海公式补液抗休克,稳定后清创,四肢用1%磺胺嘧啶银蓝霜包扎,头面颈部取暴露疗法。休克期渡过平稳。伤后11天开始溶痂,并出现败血症状,创面和血培养有金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌。按细菌药敏试验给予多粘霉素B等三联抗生素,     

荷负电气溶胶治疗对大鼠烫伤创面白细胞介素-8、10表达的影响及意义

目的 观察荷负电气溶胶治疗对大鼠烫伤创面愈合过程中白细胞介素(IL)-8、IL-10表达的影响,探讨荷负电气溶胶治疗促进创面愈合的作用机制.方法 制作SD大鼠深Ⅱ度烫伤模型,采用分组对照方法,将40只鼠随机分为治疗组(n1=20)和对照组(n2=20).治疗组应用荷负电气溶胶治疗,每次1.5 h,每天2次,直至创面愈合;对照组不作荷负电气溶胶治疗.伤后第1～11天分别取创面标本制作切片,采用免疫组织化学和图像分析方法,检测创面愈合过程中IL-8和IL-10表达水平.结果 创面平均愈合时间治疗组为(7.00±1.15)d,对照组为(9.00±1.34)d,治疗组创面愈合时间明显提前(P＜0.01).免疫组织化学显示,两组IL-8均在伤后第1天开始表达.主要位于多核粒细胞和单核细胞;第3天表达明显增多达高峰,并见大量成纤维细胞表达,治疗组的峰值明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),第5～11天表达水平迅速下降.两组IL-10伤后第1天在淋巴细胞和单核细胞均有表达;第3天开始有角质细胞表达并达高峰,第5～11天表达水平缓慢下降,但治疗组要明显高于对照组,第3～11天差异有统计学意义(P＜0.01).结论 荷负电气溶胶治疗能有效抑制创面IL-8的表达及促进IL-10的表达,缩短炎症进程,从而加速创面愈合.

Abstract：

Objective To discuss the influence of aerosol bioelectricity on the expression of interleukin (IL) -8 and IL-10 in wound healing of burned rats. Methods The deep Ⅱ degree scalding models were established in Sprague Dawley (SD) rats. Rats were randomly divided into experimental group (n1 =20) and control group (n2 =20). The rats in experimental group were treated with aerosol bioelectricity.Samples were collected at the first to eleventh day post-scalding. Immunohistochemistry and image analysis methods were conducted to examine the expression of IL-8 and IL-10 in both experimental and control groups. Results The average wound healing time in experimental group was 7. 00 ± 1. 15 days, and that in control group was 9. 00 ± 1. 34 days. IL-8 and IL-10 were observed mainly in polylmorphonuclear and mononuclear cells in both experimental and control groups on the 1 st day. On the third day, fibroblasts abounded, IL-8 expression was increased evidently and reached a peak. The peak value (6. 73 ± 1. 36) in experimental group was lower significantly than that in control group ( 2. 85 ± 0. 72, P ＜ 0. 01). From the 5th to 11th day, IL-8 expression was declined rapidly. IL-10 was expressed in keratode cells and had the peak value in experimental group (1. 24 ±0. 15) and control group (5. 69 ± 1. 32) on the 3rd day. IL-10 expression was declined gradually from the 5th to 11th days. The expression level of IL-10 in experimental group was significantly higher than in control group from the 3rd day to 11th days post-scalding (P＜0. 01). On the 3rd day, both IL-8 and IL-10 in experimental and control groups were expressed abundantly , and there was negative relationship between them (r = - 0. 862, P ＜ 0. 01). Conclusion Aerosol bioelectricity can indicate active cells proliferation through down-regulating the expression of IL-8 and up-regulating the expression of IL-10, accelerating burned wound healing.     

转化生长因子β1对瘢痕成纤维细胞合成细胞外基质的调节作用

目的：研究转化生长因子β1(TGF-β1)对瘢痕成纤维细胞胶原蛋白和粘连蛋白(FN)合成的影响，探讨TGF-β1与瘢痕细胞外基质(ECM)的关系。方法：采用细胞培养、VG化学染色、免疫组化、图像分析扫描和氯胺T法观察不同浓度TGF-β1对瘢痕成纤维细胞胶原蛋白及FN合成的影响。结果：TGF-β1在浓度为10-50ng／ml下能刺激胶原蛋白和FN的合成，并呈剂量效应关系；当TGF-β1浓度为100ng／ml时，作用达饱和。结论：TGF-β1可能与瘢痕形成过程中ECM的过度沉积有关。     

积雪草甙对烧伤增生性瘢痕T淋巴细胞、巨噬细胞和转化生长因子β_1的影响

积雪草 Centella asiatica(L.)Urb.为伞形科积雪草属植物,具有清热解毒、消肿之功效。现已证明,从积雪草中提取的积雪草甙能促进伤口愈合,对烧伤增生性瘢痕(HTS)有明显疗效。本研究以 HTS 移植至裸鼠的动物模型为实验对象,利用免疫组化染色技术,观察积雪草甙对移植的 HTS 的 T 淋巴细胞、巨噬细胞和转化生长因子β_1(TGF-β_1)的影响,探讨积雪草甙治疗 HTS 的机理。材料与方法1 材料1.1 实验动物裸鼠,为单纯 T 淋巴细胞缺陷(BALB/C-nunu 品系),6～8周龄,雌雄不拘,由中山医科大学实验动物中心提供。     

表皮干细胞表面标志物的研究进展

表皮干细胞具有高度自我更新能力及终末分化低的特性 ,从而可维持表皮的自我更新和完整性。目前对表皮干细胞表面标志物的研究已取得了一定的进展 ,但仍然缺乏具有特异性的表面标志物。就国内外对表皮干细胞表面标志物在整合素 ,角蛋白 ,基因物质P6 3,CD71,连接蛋白 4 3,C8/ 14 4B和CD34等方面的研究进展作一综述。     

α1(Ⅰ)型前胶原基因反义重组质粒对成纤维细胞的影响

目的：研究反义RNA对成纤维细胞胶原蛋白的调控作用,探讨基因治疗增生性瘢痕的可能性。方法：将α1（Ⅰ）型前胶原基因片段反向克隆至非整合型哺乳动物表达载体pREP9的多克隆位点中,以构α1(Ⅰ)丧胶原基因反义RNA表达载体pREP9-AScoll,并籍脂质体－lipofectamine将其导入人肺HLF细胞中,运用MTT试验,电镜,3H－氨酸掺入法检测反义RNA表达载体对HLF细胞的影响。结果：外源重组体pREP9-AScoll对胶原蛋白的合成有明显抑制作用,但对细胞增殖无任何影响。结论：α1（Ⅰ）型前胶原基因反义重组质粒能有效调控胶原蛋白的合成,从而有在基因水平防治瘢痕的前景。     

组织缺氧与增生性瘢痕的关系

增生性瘢痕一直是困扰人们的医学界性的难题。增生性瘢痕继发于皮肤的深层组织缺损,尤其在烧伤病人中十分常见。在烧伤病人中,大面积深度烧伤的皮肤创面无论是否经过皮肤移植,创面愈合后总会留下不同程度的增生性瘢痕,在植皮供皮区,如所取的皮片较厚也会形成增生性瘢痕。增生性瘢痕形成机制尚未完全阐明。本文就增生性瘢痕与组织缺氧和一些细胞因子的关系进行了论述。