056 CD4+T细胞功能性分化的研究进展

近年来关于aⅪ+T细胞功能性分化的研究包括C阱+T细胞亚群的分化,aⅪ+T细胞亚群的多样性、稳定性和h、Tm效应细胞的功能.这些研究有助于进一步探讨免疫性疾病的发病机理及治疗途径.     

Der p 2基因真核表达载体构建及其在小鼠树突状细胞中的表达

背景：树突状细胞是目前已知的最强大的抗原提呈细胞，已经被应用于免疫治疗的研究中。 目的：构建Der p 2真核表达载体，并证明能在小鼠骨髓来源的树突状细胞中表达。 设计、时间及地点：单一样本观察，实验于2005-05/12在解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所完成。 材料：C57BL/6小鼠；plambd-Der p 2购自美国HESKA公司；pCI-neo质粒为解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所保存。 方法：体外分离，培养小鼠骨髓来源树突状细胞。将原核表达质粒plambdDer p 2携带的Der p 2全长cDNA切下，重组到真核表达质粒pCI-neo中，然后在脂质体介导下，将重组质粒转染到小鼠骨髓来源的树突状细胞，以未转染质粒和转染空白载体pCI-neo的树突状细胞为对照。 主要观察指标：①pCI-neoDer p 2重组质粒结构鉴定。②并用反转录-聚合酶链反应、Western Blot检测Der p 2mRNA和蛋白表达。 结果：测序证实构建的重组质粒中携带了Der p 2的全长cDNA序列，且与Gene Bank序列完全一致。反转录-聚合酶链反应和Western Blot检测结果提示，重组质粒转染的树突状细胞能表达Der p 2 mRNA和Der p 2蛋白。 结论：成功构建重组Der p 2基因真核表达载体，其转染树突状细胞后，能有效地表达于树突状细胞中。     

肺炎链球菌毒力蛋白DNA疫苗优势抗原组合筛选及鉴定

目的 探讨肺炎链球菌DNA疫苗候选抗原联合免疫的优势抗原组合方式.方法 分子克隆肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)N端及肺炎链球菌溶血素(Ply)基因序列,构建重组质粒pcDNA3.1-PspA'和pcDNA3.1-PBD(PBD为Ply 点突变减毒体),免疫印迹(Western blot)检测重组质粒在哺乳动物BHK-21细胞中的表达(包括前期工作中构建的重组质粒pcDNA3.1-PsaA).将3种重组基因疫苗以不同方式组合肌肉注射免疫150只BALB/c小鼠(B组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA',C组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PBD,D组:pcDNA3.1-PspA'+pcDNA3.1-PBD,E组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA'+pcDNA3.1-PBD),检测各组小鼠血清特异性抗体IgG水平,观察免疫小鼠鼻咽部肺炎链球菌D39携带改变和D39腹腔攻击小鼠21 d生存情况.结果 成功构建3种重组真核表达载体,ELISA检测结果显示B组小鼠血清特异性IgG抗体水平与E组相似(P>0.05),均明显高于A、C、D组[A组:对照空质粒组pcDNA3.1(+)]小鼠(P<0.01);免疫小鼠鼻咽部D39携带菌落计数提示B组小鼠相似于E组小鼠(P>0.05),并明显少于C、D组和阴性对照组(A组和PBS组,P<0.01),并且D39腹腔攻击小鼠21 d生存时间分析亦提示其中位生存时间明显长于C组及阴性对照组(A组和PBS组,P<0.01).结论 PspA'联合PsaA的抗原组合方式具有高效的协同保护效能,可作为肺炎链球菌DNA疫苗的优势候选抗原组合.     

COPD急性加重时影响病死率危险因素的回顾性病例对照研究

目的 探讨影响慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)病死率的危险因素.方法 选择我科2004年1月至2008年6月因慢性阻塞性肺病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)病死的33例患者,及同期缓解出院的40例AECOPD患者为对照进行回顾性分析,研究影响其预后的危险因素.结果 死亡组和对照组的一般情况大致相似,而且2组在氧合指数、发生酸碱失衡的病例数等方面也没有显著差异.在住院期间的最高PaCO2的水平以及使用机械通气、发生肺性脑病、消化道出血、肾功能衰竭、多器官功能不全的病例数等方面则有显著差异.经多重Logistic回归分析,消化道出血(OR值13.09,95%CI 1.06～162.18)、无创(OR值9.19,95%CI 2.15～39.42)和有创机械通气(OR值11.055;95%CI 1.91～63.94)是预计AECOPD病死率的独立危险因素.由于对照组没有并发肾功能衰竭、多器官功能不全、弥漫性血管内凝血的病例,所以没进行多重回归分析.结论 AECOPD时的低氧血症、酸碱失衡不是影响其病死率的重要危险因素.而合并多器官功能不全、肾功能衰竭、消化道出血等并发症以及需要机械通气治疗则是提示预后不良的重要指标.     

药物治疗能改变慢性阻塞性肺疾病患者肺功能的下降速率吗？

GOLD指南将COPD定义为肺部的"异常炎症反应性疾病"已被大家所熟知,GOLD还指出COPD的气流受限为"进行性"发展,COPD肺功能的下降与疾病过程密切相关,用FEv.作指标即表现为每年下降速率超过正常健康人群.     

布地奈德／福莫特罗治疗哮喘为期三个月的非干预性调研

目的 评价和调查布地奈德/福莫特罗常规临床治疗哮喘的疗效和使用情况.方法 开展多中心、开放的、非干预性调查研究,观察哮喘患者使用布地奈德/福莫特罗治疗12周后的哮喘控制情况,以哮喘控制调查问卷(ACQ)与改良的哮喘控制调查问卷(ACQ5)平均分值为主要疗效观察指标.结果 共入选受试者360例,其中成人哮喘228例,儿童哮喘132例.经12周治疗后,所有患者ACQ平均分值由治疗前的2.03(成人2.20,儿童1.74)下降为0.60(成人0.78,儿童0.29),ACQ5平均分值由治疗前2.47(成人2.24,儿童1.76)下降为0.47(成人0.62,儿童0.20),差异均有统计学意义(P<0.0001).结论 布地奈德/福莫特罗在常规临床应用时可以有效地改善哮喘,并达到哮喘的良好临床控制.     

雷公藤对致敏小鼠T细胞活化及其IL-5 mRNA表达的影响

目的　探讨致敏小鼠T淋巴细胞活化与IL 5mRNA表达间的关系及雷公藤内酯醇 (TP)的影响。方法　采用卵蛋白(OVA )致敏的方法建立模型 ;运用免疫细胞化学与原位杂交双染法 (ICC ISH)观察活化的T淋巴细胞 (CD2 5 )与IL 5mRNA表达的相关性及TP、地塞米松 (DM)的影响 ;同时就TP的作用与DM相比较。结果　致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著高于正常对照组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著低于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与正常对照组间无显著差异(P >0 0 5 )。经TP、DM处理后 ,致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著低于致敏组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著低于致敏组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著高于致敏组 (P <0 0 1) ,而CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与致敏组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。TP组与DM组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　IL 5mRNA表达与T淋巴细胞活化关系密切。TP、DM抑制T淋巴细胞活化可能是其抑制IL 5产生的机制之     

糖皮质激素和β2受体激动剂治疗哮喘的进展

吸入型糖皮质激素具有高效抗炎作用,是治疗哮喘的一线用药,它与长效吸入型β2受体激动剂合用可替代单纯大剂量吸入激素治疗,较少副作用;另外,不同的吸入途径对药物有吸收也有一定的影响.     

哮喘豚鼠肺组织粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达…

目的 探讨粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子在哮喘嗜酸细胞炎症中的作用。方法 建立哮喘豚鼠实验模型，用雷公藤处理，观察肺组织Ｅｏｓ密度，斑点分子杂交检测支气管肺组织ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ含量。结果 哮喘组肺组织Ｅｏｓ浸润密度增加，ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ表达水平增高，与对照组相比差异有显著性（Ｐ〈０．０５），雷公藤处理后ｍＲＮＡ表达显著降低，但Ｅｏｓ浸润密度减少不明显。结论 ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ表达增加     

糖皮质激素抵抗性哮喘的研究进展

糖皮质激素 (简称“激素”)是控制哮喘气道炎症最有效的药物 ,但近年来逐渐发现有少数哮喘患者对激素治疗效果较差 ,这一组患者被称为“激素抵抗性哮喘 (steroid resistantasthma ,SRA)”。Schwartz等在196 8年最早报道 6例SRA对大剂量全身激素治疗无明显的临床疗效。随后在 1981年Carmichael等也描述了 5 8例慢性哮喘患者对激素抵抗的特征。SRA是哮喘患者中较为特殊和“反常”的一组患者。研究这一亚群患者对激素治疗反应低下的机制 ,对深入认识激素治疗哮喘的作用及机制具有重要的生物学和临床意义。一、SRA的定义目前对SRA尚无严…