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21.
克隆外显子探针反向斑点杂交检测DMD基因缺失 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :制备检测 DMD基因常见易缺失外显子的核苷酸探针 ,通过反向斑点杂交试验验证其特异性 ,为初步研制 DMD基因诊断芯片作准备。方法 :从健康人外周静脉血白细胞提取基因组 DNA,应用经典 18对引物对 DMD基因常见易缺失外显子进行 PCR扩增。将扩增产物与 p GEM@- T Easy载体连接 ,转化 E.coli JM10 9感受态细胞。克隆目的片段 ,并作测序鉴定。以此为探针进行反向斑点杂交试验。结果 :序列分析表明 ,克隆片段代表 DMD基因 18个常见易缺失外显子 ;以这些片段为探针进行反向斑点杂交 ,其结果与 PCR相符。结论 :克隆的基因片段用作探针在反向斑点杂交试验中显示出较好的特异性 ,可用于 DMD基因常见缺失的检测 相似文献
22.
目的:探讨可乐定生长激素刺激试(CGHST)在鉴别多系统萎缩(MSA)和原发性帕金森病(IPD)的应用价值.方法:对11例MSA-P和14例IPD患者清晨空腹仰卧安静状态下静脉采血,测定患者基础生长激素(GH)浓度,15 min以后口服盐酸可乐定300 ug,以后每隔30 min连续采血4次测定血清GH浓度.根据ROC曲线确立最佳的截断值,计算其敏感度和特异度.结果:IPD患者口服可乐定后血清GH浓度显著增加,60 min时最为明显,平均值达(5.4±0.9)ng.μL-1(P<0.001);而MSA-P患者服用可乐定以后血清GH基本保持稳定,最大增加值仅为(2.1±0.5)ng·μL-1(>0.05);比较两组间服用可乐定后30、60、90 min血清GH水平,MSA-p患者血清GH增加值均显著低于IPD组(P<0.05);CGHST 对MSA-P的敏感度和特异度分别是81.8%和85.7%.结论:CGHST可以作为MSA-p和IPD鉴别诊断的一种有效手段. 相似文献
23.
万琪 《国际神经病学神经外科学杂志》1989,(3)
作者等应用荧光素标记的单克隆抗体和激光流式细胞光度计方法检测了活动期多发性硬化(MS)(7例)、非活动期MS(7例)、CNS炎症(5例)和和CNS非炎症疾病(12例)病人周围血和脑脊液T淋巴细胞亚群的变化情况,并报道如下:按Rose诊断标准确诊的14例病人,可分为活动期和非活动期两组.活动组均为出现新症状或原症 相似文献
24.
氟桂利嗪对缺血性神经元胞质内钙离子和细胞活性的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
背景:神经元本身因缺血引起损伤以及缺血后再灌注导致神经元损伤是缺血性脑损伤的两大原因,二者均伴有神经元胞质内钙离子浓度增高,这种变化的重要意义备受研究者的关注,可能是各种损伤因素作用的结果,也可能是造成脑缺血损伤的各种因素最后作用的共同通路,即各种因素最后是通过增高的钙离子来产生神经毒性。目的:探讨缺血性神经元的损伤与细胞内钙离子的关系及氟桂利嗪的治疗意义。设计:完全随机设计,对照实验研究。地点和材料:解放军第四军医大学西京医院神经内科实验室和第四军医大学电镜中心。实验材料为孕15d昆明种二级孕鼠由本校实验动物中心提供,清洁级。干预:将培养的神经元随机分为缺血组,氟桂利嗪预处理组以及对照组,利用Ca^2+指示剂Flu-3/AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的神经元,共聚焦技术检测细胞内荧光强度的变化,利用四唑蓝(四唑蓝)比色试验检测缺血性神经元的损伤程度。缺血组神经元给予类缺血处理10min,氟桂利嗪组2min预处理后,类缺血处理10min。对照组给予含糖的人工脑脊液,混合气体为50mL/LCO2的氧气,10min后进行实验。干预者为作者本人。主要观察指标:观察各组神经元经相应处理后,神经元胞浆内钙离子浓度的变化。细胞活性变化。结果:给予神经元类缺血处理10min后,缺血组神经元胞质内钙离子浓度(平均荧光强度变化为17.525&;#177;3.167)和细胞损伤程度(吸光度为0.175&;#177;0.021)明显高于氟桂利嗪预处理组(P&;lt;0.01)。结论:氟桂利嗪可明显抑制神经元胞质内钙离子的升高,减轻由此引发的缺血性神经元的损伤程度。 相似文献
25.
目的:研究大鼠在脑室埋管注射甘珀酸预处理后戊四氮导致癫痫发作时前脑内星形胶质细胞和连接蛋白43的形态学反应及其相互关系。方法:实验于2003-10/2004-06在解放军第四军医大学神经科学研究所进行。取24只大鼠分为生理盐水组、甘珀酸组、戊四氮组、甘珀酸+戊四氮组,应用免疫荧光组织化学双重标记显示胶质纤维酸性蛋白和连接蛋白43蛋白在前脑的表达及其相互关系。结果:甘珀酸+戊四氮组的大鼠癫痫发作的行为表现比戊四氮组显著加重,星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达也比戊四氮组明显升高,值得注意的是甘珀酸组的星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达比生理盐水组明显升高。连接蛋白43在戊四氮引起的癫痫大鼠的大脑皮质、海马和杏仁核内增加,而甘珀酸预处理后的癫痫模型中连接蛋白43进一步增强。在连接蛋白43与胶质纤维酸性蛋白双标的切片上发现,阳性的星形胶质细胞双标,在甘珀酸预处理后的癫痫模型中胶质纤维酸性蛋白阳性的星形胶质细胞显著增加的同时连接蛋白43也明显增加。结论:在整体动物甘珀酸预处理可以导致癫痫发作增强,这可能与星形胶质细胞增生及其连接蛋白43表达升高有关。 相似文献
26.
脑梗死患者血浆炎症因子、纤溶活性的变化及对神经功能的影响 总被引:26,自引:15,他引:26
目的 通过观察急性脑梗死患者血浆中的Ⅷ因子相关抗原(vWF)、P-选择素(P-Selectin)、白细胞介素-6(IL-6)、组织型纤溶本科原激活物(t-PA)及快速抑制物(PAI-1)的变化规律,探讨炎症因子及纤溶活性在脑梗死发生、发展、转归过程中的作用。方法 采用本科联免疫吸附(ELISA)及发色底物法对40例急性脑梗死患者发病后6,12,24及72h血浆vWF,P-selectin,IL-6,t-PA及PAI-1活性进行动态测查。并与32例自愿者健康对照组进行比较。结果 在急性脑梗死患者发病24h内,vWF(147.4&;#177;26.2)μg/ml、P-selectin(21&;#177;4)ng/ml、IL-6(114.5&;#177;1.5)μg/ml、PAI-1(0.79&;#177;0.24)au/ml活性明显增高,t-PA活性(0.24&;#177;0.15)iu/ml明显降低,与对照组比较差异有显著性意义(P&;lt;0.05);随时间推移vWF(118.6&;#177;24.4)μg/ml、P-selectin(14&;#177;3)ng/ml、IL-6(108.7&;#177;4.4)μg/ml、PAI-1(0.56&;#177;0.20)au/ml活性有所降低,而t-PA活性(0.43&;#177;0.11)iu/ml升高,但与正常对照组相比仍有差异(P&;lt;0.05)。结论 (1)急性脑梗死患者早期存在内皮细胞损伤;(2)炎症因子参与脑部缺血性损害;(3)纤溶活性下降,说明t-PA及PAI-1参与了血栓形成的病理过程。 相似文献
27.
多基因遗传性与缺血性脑血管病 总被引:1,自引:1,他引:1
缺血性脑血管病(ischemiccerebrovasculardisease,ICVD)是由多种因素造成的。大量流行病学研究和动物试验表明,多数ICVD的发生受遗传因素的控制,属于多基因遗传病。不同的基因类型有不同的临床表型,当多种易感基因共同作用时,患病的危险性将增高。有关候选基因多态性的研究已经越来越多,其中主要包括这几个系统:凝血系统、肾素-血管紧张素系统、同型半胱氨酸代谢系统、内皮一氧化氮合酶系统和脂代谢系统。文为列举了其中四个系统中5个基因的多态性研究,分析了其与ICVD的潜在关联性。 相似文献
28.
高原地区 (海拔在 30 0 0m以上地区 )空气稀薄 ,大气压低 ,氧分压低[1] 。在低氧环境下 ,机体易出现低氧血症 ,降低机体应激能力和耐受力[2 ] 。因此 ,高原特殊的自然环境对心脏术中及术后恢复有不同程度的影响。我院地处西藏拉萨 (海拔 36 5 8m) ,于 2 0 0 0年 11月~ 2 0 0 1年 7月对 2 2例先天性心脏病患者进行了手术治疗 ,取得满意结果 ,现就围术期的护理体会报告如下。1 临床资料2 2例患者中 ,男 8例 ,女 14例。汉族 9例 ,藏族 13例 ,年龄 1 8~ 2 4岁 ,体重 9~ 4 1kg。动脉导管未闭 10例 ,室间隔缺损 6例 ,房间隔缺损 4例 ,室间… 相似文献
29.
目的:探讨缝隙连接在急性局灶脑梗死的脑缺血损伤中的作用。方法:使用光化学局灶性脑梗死模型,采用免疫组织化学和尼氏染色技术,观察缝隙连接蛋白Cx43表达及甘珀酸预治疗对脑梗死灶体积的影响。结果:光化学局灶性脑梗死后Cx43-LI表达阳性的细胞呈纤维状、斑点状,分布于梗死灶的周边区。于脑缺血后1h出现,12h最显著,至24h开始减少;生理盐水对照组大鼠局灶性脑梗死体积为(182.54±6.24)μm3,甘珀酸预治疗组大鼠局灶性脑梗死体积为(128.53±3.39)μm3,两者相比差异有显著性意义(t=17,P<0.01)。结论:本研究提示局灶性脑梗死后缝隙连接活动加强并参与脑缺血损伤过程,缝隙连接阻断剂甘珀酸可减轻脑梗死后神经元的损害。 相似文献
30.
药物治疗阿尔茨海默病的研究与进展 总被引:1,自引:1,他引:1
阿尔茨海默病是一种原发性退行性脑病,65岁以上的老年人口发病率为5%~10%,给家庭及社会带来严重负担。对于其治疗的研究一直是神经病学家、老年病学家的热点,在此就近年来国内外有关此方面的研究现状,从胆碱酯酶抑制剂、N-甲基-D-天(门)冬氨酸受体拮抗剂、非类固醇抗炎药、基因治疗、免疫治疗等几方面对其加以总结。 相似文献