不同发育阶段小鼠纹状体神经干细胞的体外增殖和分化情况比较

目的:分析胚胎、新生以及成年小鼠纹状体神经干细胞的体外培养和分化条件,并比较其体外增殖和分化情况。方法:实验于2005-02/05在解放军第四军医大学西京医院神经内科实验室完成。选取孕14d小鼠、出生24h内的新生小鼠和4月龄的成年小鼠各1只用于实验。①神经干细胞的原代培养:分别将孕14d小鼠、新生小鼠和成年小鼠处死后取出纹状体组织,轻轻吹打制成单个细胞悬液,接种于无血清的D/F12培养基中,每六七天机械分离克隆传代1次。②神经干细胞的鉴定:采用有限稀释法获得神经干细胞单克隆,继续培养得到大量来自单个细胞的亚克隆。对神经球行免疫荧光染色鉴定。③通过四甲基偶氮唑盐比色法及免疫荧光染色比较胚胎鼠、新生鼠及成年小鼠的神经干细胞的增殖和分化情况。结果:①成功地从胚胎鼠、新生鼠以及成年小鼠的纹状体中分离培养出神经干细胞。②胚胎鼠、新生鼠及成年小鼠的神经干细胞分化为神经元的比例均为7%～11%,分化为星形胶质细胞的比例均为76%～88%,差异无显著性意义(P>0.01)。③与成年小鼠比较,胚胎鼠和新生鼠的神经干细胞增殖旺盛(P<0.01),而胚胎鼠和新生鼠之间差异无显著性意义。结论:随着小鼠年龄的增加纹状体神经干细胞的增殖能力逐渐减弱,但仍保持着分化为神经元和胶质子细胞的能力。胚胎和新生鼠源性的神经干细胞均具有较强的增殖能力,为寻找理想的移植细胞提供了思路。     

CT指导下基底节区脑出血锥颅抽吸治疗有效性与安全性的临床研究

目的：了解CT指导下基底节区脑出血锥颅抽吸治疗的有效性与安全性，并对影响锥颅治疗脑出血患者预后的一些相关因素进行分析。方法：回顾性分析2000年12月1日－2002年6月1日我院病案首页数据库中所有CT指导下行锥颅抽吸治疗的基底节出血病例以及同期符合锥颅抽吸治疗手术指征而行内科保守治疗的基底节出血患者。在患者出血后30d进行疗效评定。采用等级资料秩和检验、X^2检验、方差分析以及多元判别分析进行统计学分析。结果：锥颅抽吸与内科保守治疗基底节出血疗效上有显著性差异。X^2检验表明，两组患者在死亡率上有显著性差异（P＜0．05），同时，单因素检验表明锥颅手术时间为影响脑出血锥颅抽吸治疗患者30d预后的危险因素（P＜0．05），但多元逐逐步判断别分析显示脑出血后锥颅时间并不是影响生存的主要危险因素，结论：CT指导下基底节区脑出血锥颅抽吸治疗的有效性与安全性优于内科保守治疗，脑出血后锥颅治疗时间可能对患者预后一定的影响。     

叶酸对同型半胱氨酸所致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的：通过培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)，研究不同浓度的同型半胱氨酸(Hey)对内皮细胞损伤的影响，并观察叶酸的干预是否能够削弱Hcy对HUVEC的细胞毒作用。方法：将培养的HUVEC细胞分成8组，将其与不同浓度的Hcy(100，200，500，1000，2000μmol／L)和叶酸(100μmol／L)共同培养20h，分别利用MTT、苏木精-伊红染色和流式细胞仪技术观察HUVEC细胞的生长及凋亡情况。结果：HUVEC与不同浓度的Hcy培养20h后，细胞活力A值呈现剂量依赖性的降低，超过500μmol／L的Hcy对HUVEC已经形成了显著的抑制和毒性效应，滞留于G1期的细胞比例增加，由于对照组的56．3％上升至60．0％(Hcy100μmol／L)，63．1％（Hcy200μmol／L)，64．4％(Hcy1000μmol／L)，73．9％(Hcy2000μmol／L)；100μmol／L的叶酸能够在一定程度上抑制Hcy诱导凋亡的作用。结论：高浓度的Hcy具有内皮细胞毒作用，可以抑制细胞的生长并促进其凋亡，而叶酸则具有保护性。     

高原先天性心脏病手术的围术期护理22例

高原地区 (海拔在 30 0 0ｍ以上地区 )空气稀薄 ,大气压低 ,氧分压低[1] 。在低氧环境下 ,机体易出现低氧血症 ,降低机体应激能力和耐受力[2 ] 。因此 ,高原特殊的自然环境对心脏术中及术后恢复有不同程度的影响。我院地处西藏拉萨 (海拔 36 5 8ｍ) ,于 2 0 0 0年 11月～ 2 0 0 1年 7月对 2 2例先天性心脏病患者进行了手术治疗 ,取得满意结果 ,现就围术期的护理体会报告如下。1　临床资料2 2例患者中 ,男 8例 ,女 14例。汉族 9例 ,藏族 13例 ,年龄 1 8～ 2 4岁 ,体重 9～ 4 1ｋｇ。动脉导管未闭 10例 ,室间隔缺损 6例 ,房间隔缺损 4例 ,室间…     

类缺血后神经元内钙离子浓度变化及不同钙阻滞剂对其影响

目的：观察类缺血后神经元内钙离子浓度及细胞活性的变化，探讨缺血性神经元的损伤与细胞内钙离子的关系及不同钙阻滞剂的作用。方法：采用孕小鼠皮层神经元培养技术，应用相差显微镜观察培养的神经元形态结构，激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子浓度。结果：给予神经元类缺血处理10min后，神经元内钙离子浓度明显高于尼卡地平组（P＜0．01）。类缺血处理10min后再灌注2h细胞损伤程度较尼卡地平干预组有显著性差异。结论：尼卡地平可抑制神经元细胞内钙离子浓度的升高，降低缺血性神经元的损伤的程度。     

硬脑膜炎性刺激对三叉神经节小直径神经元电压门控钾电流的影响

目的通过炎性介质(IM)和降钙素基因相关肽(CGRP)诱发偏头痛反复发作,运用全细胞膜片钳的方法观察大鼠三叉神经节小直径神经元电压门控性钾电流的变化。方法雄性SD大鼠15只,分为空白组(不做任何干预)、生理盐水组和IM+CGRP组(大鼠硬脑膜上埋置PE-10管,连续7 d给予等量生理盐水和IM+CGRP)。用Von Frey毛测定大鼠眶周皮肤机械痛阈。在急性分离的三叉神经节小直径神经元上,通过全细胞膜片钳方法记录延迟外向钾电流(IK)和瞬时外向钾电流(IA)的变化。结果给药7 d后,IM+CGRP组大鼠的眶周机械痛阈明显降低,生理盐水组眶周机械痛阈无明显改变。生理盐水组三叉神经节神经元膜上总钾电流、IK、IA与空白组比较无明显差异;IM+CGRP组三叉神经节神经元膜上总钾电流、IK、IA与空白组和生理盐水组比较明显减小。结论 IM和CGRP诱发偏头痛反复发作模型大鼠的三叉神经节中急性分离神经元的IK和IA明显降低,提示电压门控性钾通道可能参与了外周机械痛阈的降低。     

连接蛋白43和胶质纤维酸性蛋白在甘珀酸预处理的戊四氮致痫大鼠前脑中的表达变化

目的:研究大鼠在脑室埋管注射甘珀酸预处理后戊四氮导致癫痫发作时前脑内星形胶质细胞和连接蛋白43的形态学反应及其相互关系。方法:实验于2003-10/2004-06在解放军第四军医大学神经科学研究所进行。取24只大鼠分为生理盐水组、甘珀酸组、戊四氮组、甘珀酸+戊四氮组,应用免疫荧光组织化学双重标记显示胶质纤维酸性蛋白和连接蛋白43蛋白在前脑的表达及其相互关系。结果:甘珀酸+戊四氮组的大鼠癫痫发作的行为表现比戊四氮组显著加重,星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达也比戊四氮组明显升高,值得注意的是甘珀酸组的星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达比生理盐水组明显升高。连接蛋白43在戊四氮引起的癫痫大鼠的大脑皮质、海马和杏仁核内增加,而甘珀酸预处理后的癫痫模型中连接蛋白43进一步增强。在连接蛋白43与胶质纤维酸性蛋白双标的切片上发现,阳性的星形胶质细胞双标,在甘珀酸预处理后的癫痫模型中胶质纤维酸性蛋白阳性的星形胶质细胞显著增加的同时连接蛋白43也明显增加。结论:在整体动物甘珀酸预处理可以导致癫痫发作增强,这可能与星形胶质细胞增生及其连接蛋白43表达升高有关。     

颅内静脉窦血栓形成继发颅内出血的溶栓治疗

目的 探讨溶栓治疗颅内静脉窦血栓形成(CVST)伴发颅内出血的疗效.方法 2007年-2011年共收治CVST伴发颅内出血10例,予低分子肝素抗凝结合静脉窦局部溶栓治疗.结果 12周后随访,死亡1例,完全恢复8例,遗留癫痫后遗症1例.结论 静脉窦内的局部溶栓治疗是积极、安全有效的治疗方法,可改善患者的预后.预后与治疗开始的时机有关,治疗越早,完全恢复的可能性越大.     

多基因遗传性与缺血性脑血管病

缺血性脑血管病(ischemiccerebrovasculardisease,ICVD)是由多种因素造成的。大量流行病学研究和动物试验表明,多数ICVD的发生受遗传因素的控制,属于多基因遗传病。不同的基因类型有不同的临床表型,当多种易感基因共同作用时,患病的危险性将增高。有关候选基因多态性的研究已经越来越多,其中主要包括这几个系统:凝血系统、肾素-血管紧张素系统、同型半胱氨酸代谢系统、内皮一氧化氮合酶系统和脂代谢系统。文为列举了其中四个系统中5个基因的多态性研究,分析了其与ICVD的潜在关联性。