EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :观察 EGb76 1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :45只大鼠随机分为假手术组 (A组 ) ,脑缺血再灌注损伤组 (B组 ) ,EGb76 1治疗组 (C组 ) ,每组 15只。以线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型。每组 10只缺血 6 0 min再灌注 6 0 min后断头处死 ,取脑测定 NO、NOS、MDA和 SOD变化 ,其余 5只缺血 3h再灌注 2 4h后断头处死 ,观察常规病理、Niss小体及凋亡细胞变化。C组于实验前 3天开始灌胃给 EGb76 1(15 0 mg/ kg,每日 2次 ,术前 1h、术后 12 h灌 EGb76 115 0 mg/ kg)。结果 :脑缺血再灌注后 ,B组 NO、MDA含量 ,NOS活性较 A组升高 ,SOD活性降低 (P<0 .0 5 ) ,病理变化明显 ,凋亡细胞增多。C组 NO、MDA含量及 NOS活性降低 ,SOD活性升高 (P<0 .0 5 ) ,C组病理变化减轻 ,凋亡细胞减少 (P<0 .0 5 )。结论 :EGb76 1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

脑缺血后脑组织NO含量和NOS活性变化及三七总皂甙的影响

为了探讨一氧化氮 (NO)在缺血神经元坏死中的作用机制及三七总皂甙 (PNS)是否通过影响NO的变化而起脑保护作用。　　方法　用栓线法建立大鼠局灶性脑缺血模型 ,测定脑缺血后不同时间脑组织NO含量和一氧化氮合成酶 (NOS)活性变化及PNS对其的影响。　　结果　缺血后 3 0分钟脑组织NO含量和NOS活性均显著升高 (P <0 0 1 ) ,而PNS能防止脑缺血后两者的升高。NO含量与NOS活性呈显著正相关。　　结论　NO在缺血神经元损伤中起重要作用 ,PNS是通过降低NO的含量而起保护脑组织作用     

亚低温在全脑缺血再灌注损伤中对大鼠海马NO合成的影响

目的通过研究亚低温对NO合成的影响,探讨亚低温脑保护效应的机制.方法采用4-VO法制作全脑缺血模型.动物分为8组,均缺血12 min,于再灌注30 min、60 min、2 h、4 h后处死取材,测定海马区NO含量及NOS活性.结果①低温30及60 min组NO含量较相应常温组显著降低(P＜0. 01),NOS活性亦显著降低(P＜0.05);②常温30 min组NO含量、NOS活性较高,60 min组达到高峰,以后逐渐下降;③NO含量与NOS活性呈显著正相关(r=0.76,P＜0.01). 结论亚低温抑制海马NO的合成,可能是亚低温脑保护的机制之一.     

甲基强的松龙对大鼠颅脑损伤后一氧化氮合成酶活性的影响

目的观察甲基强的松龙对大鼠颅脑损伤后血、脑组织中NOS含量的影响,并探讨其作用机制。方法将45只SD大鼠随机分为3组:实验组(20只)、对照组(20只)、正常组(5只),均采用骨窗形成后硬膜外打击法造成鼠脑挫裂伤。正常组麻醉后,只行开颅手术,不作头颅打击,治疗组大鼠致伤后即刻腹腔内注射30mg/kg甲基强的松龙,对照组则注射30mg/kg生理盐水。对照组和治疗组大鼠分别在伤后1h、6h、12h、24h断头取脑,对大鼠脑外伤后脑组织中一氧化碳合成酶(NOS)含量进行检测。结果大鼠脑皮质中的NOS活性在伤后1h较正常组显著性升高(P <0.01),6h开始下降,12～24h降至基础水平。甲基强的松龙治疗组在伤后1h(P <0.01)、6h(P <0.05)NOS活性较损伤组显著性降低。结论颅脑损伤后,受损脑组织中NOS活性升高,甲基强的松龙可通过抑制损伤后NOS活性起到保护创伤神经元的作用。     

八肽胆囊收缩素对正常及脑缺血大鼠大脑皮层NO水平的调节作用

目的 探讨中枢八肽胆囊收缩素(CCK—8)对正常及脑缺血大鼠脑组织一氧化氮(NO)水平的影响及其可能的机制。方法 给正常或局部脑缺血1h再灌注24h大鼠脑室内(icv)分别注射体积均为5μl的溶剂(人工脑脊液)、CCK—8、丙谷胺或丙谷胺十CCK—8。给药后25h分别取正常大鼠的大脑皮层及脑缺血大鼠缺血中心区、半暗区、非缺血半球皮层，检测脑组织NO水平及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果 (1)与假手术组相比，缺血溶剂组大鼠脑缺血中心区及半暗区NO水平显著增加(P＜0．05)，缺血CCK—8组NO水平无明显变化；与缺血溶剂组相比，缺血CCK—8组脑缺血中心区及半暗区NO水平显著降低(P＜0．05或0．01)；缺血CCK—8组非缺血半球皮层NO水平显著高于假手术组(P＜0．05)，而缺血溶剂组非缺血半球NO水平的升高不明显。(2)正常大鼠给CCK—8后，脑皮层NO水平、NOS活性明显升高(P＜0．05或0．005)，丙谷胺可部分拮抗这一作用；单独给丙谷胺对NO水平、NOS活性无影响。结论 中枢给予CCK—8对局部脑缺血再灌注引起的脑皮层缺血中心区及半暗区NO水平的升高具有抑制作用；对正常脑皮层组织NO水平、NOS活性有上调作用，丙谷胺可部分拮抗这一作用。     

局灶脑缺血后早,晚期一氧化氮合成酶的活性变化

一氧化氮(NO)在脑缺血中起重要作用,一氧化氮合成酶(NOS)作为NO合成的关键酶,其活性变化直接调节NO的生成量及生物学效应。本文在建立兔MCAO局灶脑缺血模型基础上,测定缺血后不同时间缺血区和正常脑组织的NOS活性。结果显示,脑缺血早期(1h内)NOS活性突然升高,随之下降;脑缺血后24h NOS活性又升高,至48h、96h明显升高。     

Aβ对原代培养海马神经元NO、NOS和LDH影响及bFGF保护作用

目的　探讨β-淀粉样蛋白 (amyloid-beta protein,Aβ)对原代培养海马神经元一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)和乳酸脱氢酶 (LDH)的影响及碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)的保护作用。方法　通过测定原代培养新生大鼠海马神经元培养液中 NO、NOS及 LDH的含量变化 ,观察 Aβ1 -40对神经元的损伤及 b FGF的保护作用。结果　Aβ1 -40作用于海马神经元 2 4h后 ,培养上清液中 NO、NOS含量增加 ,LDH活性升高 ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。经 b FGF预处理的海马神经元暴露于 Aβ1 -40 2 4h后 ,NO、NOS含量及 LDH活性均降低 ,且与损伤组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　 b FGF对 Aβ诱导海马神经元损伤具有一定的保护作用。     

大鼠颅脑损伤后一氧化氮合酶和内皮素的变化及依达拉奉对其的影响

目的观察大鼠颅脑损伤后脑组织中一氧化氮合酶（NOS）和内皮素（ET）含量的变化及依达拉奉对其的影响，并探讨其作用机制。方法将45只SD大鼠随机分为3组，其中正常组5只，麻醉后只行开颅手术，不作头颅打击；治疗组和对照组各20只，采用骨窗形成后硬膜外打击法造成鼠脑挫裂伤模型，治疗组致伤后即刻腹腔内注射5mg／kg依达拉奉，对照组则即刻腹腔内注射等量生理盐水。正常组在伤后1h，对照组和治疗组大鼠分别在伤后1h、6h、12h、24h断头取脑，对大鼠脑外伤后脑组织中NOS和ET含量进行检测。结果（1）治疗组和对照组大鼠脑皮质中的NOS活性在伤后1h较正常组显著升高（P〈0．01），6h开始下降，12～24h降至基础水平。治疗组在伤后1h、6hNOS活性较对照组显著降低（均P〈0.05）。（2）治疗组和对照组大鼠脑皮质中的ET在伤后1-24h较正常组显著升高（P〈0．01）。治疗组在伤后1～24hET较对照组显著降低（ P〈0．05）。结论颅脑损伤后受损脑组织中NOS和ET升高，依达拉奉可通过抑制损伤后NOS和ET起到保护创伤神经元的作用。     

苯海索对大鼠局灶性脑缺血后细胞内游离钙含量的影响

目的　探讨苯海索对大鼠局灶性脑缺血细胞内游离钙含量的影响及其机制。方法　采用大鼠大脑中动脉梗塞模型 ,观察苯海索对缺血大鼠的细胞内钙及MDA、SOD含量的影响。结果　苯海索能显著降低细胞内游离钙、MDA的含量 (P <0 .0 1 )并能显著提高SOD的活性 (P <0 .0 1 )。结论　苯海索 3、1 .5、0 .5mg/kg对大鼠局灶性脑缺血可能具有保护作用 ,其作用机制与降低细胞内钙 ,脑组织MDA含量及提高SOD活性有关     

急性脑梗死后血浆NO、NOS、ET含量的动态变化及尼莫地平对其影响

目的　观察急性脑梗死 (ACI)后血浆一氧化氮 (NO)、一氧化氮合成酶 (NOS)、内皮素 (ET)含量的动态变化 ,以及尼莫地平治疗后对其影响。方法　ACI患者 110例 ,随机分成尼莫地平组 (5 0例 ) (在常规治疗基础上用尼莫地平 )和常规治疗组 (6 0例 )。在发病后不同时点动态观察血浆NO、NOS、ET含量 ,并设 5 0例脑动脉硬化患者为对照组。结果　脑梗死后血浆ET含量显著升高 ,直至恢复期 ;NO、NOS先增高后下降 ;尼莫地平组和常规组比较ET有显著差异 (P <0 .0 1) ,NO、NOS差别不显著 (P >0 .0 5 )。结论　NO、NOS、ET参与并影响了ACI后复杂的病理生理过程 ;尼莫地平部分通过对ET含量的影响发挥其对脑梗死的治疗作用     

脑缺血后脑组织一氧化氮合成酶基因表达及丹参影响的初步研究

一氧化氮（ＮＯ）具有神经介质或调质的功能，广泛参与体内的生理及病理过程，具有扩张血管和神经毒性作用。体内ＮＯ系通过一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）催化形成，并通过Ｃａ２＋／钙调素机理生成ＮＯ，因此ＮＯＳ是ＮＯ合成的关健因素。为研究脑缺血与脑组织ＮＯＳ的关系及丹参的影响，采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血模型，用地高辛精标记的ＮＯＳ探针进行原位杂交。结果示缺血对照组栓塞侧皮层和尾壳核ＮＯＳ基因表达显著增多，图像分析灰阶值为：缺血侧皮层１１６．２±１．０，非缺血侧１３４．５±０．７（Ｐ＜０．０１）；缺血侧尾核壳核１２２．０±０．７，非缺血侧１３７．５±０．８（Ｐ＜０．０１）。阳性细胞数：缺血侧皮层３２６．７±８．２，非缺血侧１０７．５±９．９（Ｐ＜０．０１）；缺血侧尾壳核２６２．２±３．５，非缺血侧７２．２±９．８（Ｐ＜０．０１）。虽然丹参组缺血侧皮层和尾壳核ＮＯＳ基因表达亦显著高于非缺血侧（Ｐ＜０．０１），但显著低于缺血对照组（Ｐ均＜０．０１），而两组非缺血侧比较无显著差异。结果表明，脑缺血后脑组织ＮＯＳ基因表达显著增多，丹参能部分下调缺血所致的ＮＯＳ基因的异常表达，这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

NOS活性在局灶脑缺血后的时相变化

一氧化氮(NO)在脑缺血中起重要作用,一氧化氮合成酶(NOS)作为NO合成的关键酶,其活性变化直接调节NO的生成量及生物学效应,本文在建立兔MCAO局灶脑缺血模型基础上,测定缺血不同时间缺血区和正常脑组织的NOS活性。结果显示脑缺血早期(1小时内)NOS活性突然升高,随之下降;脑缺血后24小时NOS活性又回升,48小时、96小时明显升高。     

大鼠急性局灶性脑缺血再灌注脑组织NO含量和NOS活性的变化

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）和神经元型ＮＯ合酶（ｎＮＯＳ）是否参与急性局灶性脑缺血再灌注的发病机理。方法采用栓红法建立大鼠大脑中动脉阻塞（ＭＣＡＯ）模型,观察脑组织ＮＯ含量和一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的变化及ｎＮＯＳ抑制剂７－硝基吲唑（７－ＮＩ）对再灌注期两者的影响。结果缺血３０分种ＮＯ含量和ＮＯＳ活性显著升高,缺血３小进两者下降;再灌注３０分种ＮＯＴ和ＮＯＳ再次升高,而再灌注３小时两者又下降。７－Ｎ     

全脑缺血再灌注兴奋性氨基酸、线粒体钙、钙调素含量的变化

目的：采用大鼠全脑缺血再灌注模型,观察海马组织兴奋性氨基酸、线粒体钙、钙调素含量的变化,研究分析脑缺血再灌注损伤中兴奋性氨基酸与钙平衡紊乱的变化和作用。方法：测定假手术组,缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ和缺血３０ｍｉｎ再灌注１２ｈ组,脑海马组织兴奋性氨基酸、线粒体钙、钙调素的含量。结果：缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ海马组织兴奋性氨基酸明显低于假手术组（Ｐ＜０．０１）,线粒体钙、钙调素含量显著性高于假手术组（Ｐ＜０．０１）,缺血３０ｍｉｎ再灌注１２ｈ组同假手术组比较没有显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：我们从鼠脑缺血再灌注时线粒体钙、钙调素含量升高证实钙平衡紊乱参于兴奋性氨基酸的缺血再灌注脑损伤过程     

大鼠脑缺血再灌流后海马区一氧化氮合酶活性的变化

目的 :观察鼠全脑缺血再灌流后海马区NOS活性的变化。方法 :采用大鼠 4血管关闭方法制作全脑缺血再灌流模型。实验动物分为假手术组、缺血 10min组、再灌注 1、2、3d组 ,测定脑缺血再灌流后海马区NOS活性的变化。结果 :全脑缺血再灌注后海马组织NOS活性被激活上调。结论 :NO可能参与了海马CA1区迟发性神经元死亡 (DND)的发生。     

Effects of glutamate receptor agonist on extracellular glutamate dynamics during moderate cerebral ischemia

We performed real-time monitoring of the extracellular glutamate dynamics in the rat striatum in vivo using the microdialysis electrode technique, during an experimental penumbral condition of moderate global cerebral ischemia and activated glutamate receptors. The local cerebral blood flow (CBF) was measured with a laser-Doppler probe. One minute after bilateral common carotid artery occlusion (BCAO), CBF was reduced to approximately 60% of the pre-ischemic value and it remained at this level during the period of occlusion. After BCAO, a transient depolarization and a transient increase in extracellular glutamate concentration ([Glu]e) were seen. In other rats, 500 microM N-methyl-D-aspartate (NMDA) was locally micro-transfused for 30 min prior to BCAO. Upon induction of BCAO, an anoxic depolarization-like depolarization and a gradual increase in [Glu]e that continued over the duration of BCAO were seen. After BCAO was terminated, the direct current (DC) rapidly recovered to the basal level, while [Glu]e gradually decreased to the basal level. In rats that were locally micro-transfused with 500 microM Kainate prior to BCAO, DC and [Glu]e did not differ significantly from control. Pretreatment with MK-801 prior to NMDA treatment completely inhibited the NMDA-induced changes in DC and [Glu]e. Pretreatment with NBQX prior to NMDA treatment did not inhibit the NMDA-induced changes in DC and [Glu]e. Consequently, we found that activation of NMDA receptors by elevated [Glu]e exerts an important effect on [Glu]e dynamics in the spreading stroke region very early in the acute stage of cerebral ischemia in vivo.     

汉防己碱对缺血—再灌流大鼠脑NOS活性及超微结构的影响

用ＮＡＤＰＨｄ 组织化学和电镜技术研究了汉防己碱（Ｔｅｔ）对大鼠缺血再灌流脑一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及超微结构变化的作用。结果发现,缺血１５ ｍ ｉｎ,再灌流２ ｈ 后,海马超微结构出现明显的病理学损害,主要包括核周出现髓鞘样变,核周间隙增大,胞核均质化,大量片状软化灶,毛细血管周围水肿。Ｔｅｔ １０ 和２０ｍ ｇ／ｋｇ 缺血前３０ ｍ ｉｎ 腹腔注射可明显改善或避免出现上述缺血组织学改变。缺血１５ ｍ ｉｎ,再灌流２４ ｈ 后,皮层和海马ＮＯＳ阳性细胞数目显著增多,Ｔｅｔ５,１０ 和１５ ｍ ｇ／ｋｇ 缺血前３０ ｍ ｉｎ 腹腔注射,浓度依赖地抑制缺血再灌流所致的ＮＯＳ阳性细胞数目增加。这些结果提示,Ｔｅｔ可抑制缺血再灌流脑ＮＯＳ活性,减少ＮＯ产生,这可能与Ｔｅｔ减轻脑缺血再灌流的损害有关。