血-脑肿瘤屏障的开放与脑胶质瘤化疗

脑胶质瘤涉及正常BBB和BBTB,高渗液甘露醇和缓激肽可分别非选择性和选择性开放BBTB,增加水溶性抗癌药的肿瘤转运率,强度与剂量相关,且两者的作用均为一过性,故它们的作用时间窗对获得最大治疗效应至关重要。目前对化疗联用甘露醇尚存争议,但脑胶质瘤的动物实验和临床前期试验研究表明RMP-7无明显毒性,联用RMP-7和水溶性抗癌药可显著提高生存率。     

大鼠C6脑胶质瘤血-脑屏障的硝酸镧示踪电镜研究

目的 研究C6脑胶质瘤不同区域血-脑屏障（BBB）的超微结构特征及血-脑肿瘤屏障（BBTB）通透性增高的途径。方法 运用成瘤3周SD大鼠C6脑胶质瘤动物模型。取肿瘤中心、肿瘤边缘、距肿瘤边界2mm以内及2mm以外的同侧大脑半球和对侧大脑半球脑皮质等五个部位的脑组织，采用外源性硝酸镧透射电镜示踪法，观察BBB／BBTB超微结构特征。结果 La^3＋在肿瘤中心与边缘部充填并通过血管内皮细胞之紧密连接至血管腔外一脑间质裂隙内。距肿瘤边界2mm以内的同侧大脑半球脑组织也有La^3＋渗出至局部基底膜，而其它观察脑区La^3＋则完全封闭于血管腔内；各部位脑血管内皮细胞胞浆内均无La^3＋；BM呈线状连续，管腔内无瘤细胞。结论 C6胶质瘤紧密连接开放导致BBTB通透性增高；C6胶质瘤诱导的屏障功能破坏随其至肿瘤距离的增加而减弱。     

可逆性血脑屏障开放对脑瘤化疗的临床意义

本文将20例恶性脑瘤患者分为两组。Ⅰ组:用20％甘露醇行可逆性血脑屏障(BBB)开放,继之经颈动脉灌注顺铂(CDDP);Ⅱ组:仅灌注同剂量CDDP。分别测定肿瘤及正常脑组织内 CDDP浓度。结果表明:用 20％甘露醇行可逆性BBB开放能显著增加肿瘤内药浓度,而正常脑组织内药浓度变化不明显。此技术对提高脑瘤化疗效果具有重要的临床价值。     

颈动脉注射甘露醇对血脑屏障通透性及甲氨喋呤入脑影响的实验研究

本文用25％甘露醇注入兔的一侧颈内动脉,获得了满意的渗透性BBB开放模型,使静脉注射的EB在BBB开放侧脑半球着色。这种BBB开放是可逆 性的,约持续2小时,且不伴神经组织结构的损害。在BBB开放后的1、24、72小时,脑组织水分、Na~+Kt含量均在正常范围,与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。超微结构观察的结果证实,渗透性BBB开放的形态学基础主要是脑毛细血管内皮细胞的皱缩,其间的紧密连接增宽。在BBB开放期间,由颈动脉或静脉应用MTX,能显著提高脑组织内的MTX浓度,前一途径可使BBB开放侧脑半球的药物浓度增至最高水平。本文研究结果提示:渗透性BBB开放是一种安全、简单可行的方法,为化疗药物入脑开辟了途径,有可能改善恶性脑瘤的化疗效果,对其它颅内疾病的治疗及某些基础学科的研究也具有意义。     

低功率聚焦超声联合微泡对兔血脑屏障通透性影响的实验研究

目的 研究低功率聚焦超声联合微泡靶向开放兔血脑屏障(BBB)后其通透性变化规律.方法 MRI引导下,静脉注射微泡,聚焦超声照射兔大脑一侧靶点,对侧镜像点为对照组,未处理者为健康组.照射后即刻、2 h、4 h、6 h、8h、24 h、1周分别行MRI增强扫描测定信号强度值;荧光分光光度法榆测兔脑组织伊文思蓝量(EB).结果 超声照射后BBB即刻开放,2 h MRI信号增强值和脑组织EB量达到峰值,8 h后恢复正常.靶点MRI信号增强值与脑组织EB含量的相关系数r=0.9154.结论 MRI引导下聚焦超声联合微泡能靶向可逆地开放BBB,MRI信号增强值在一定程度上可反映BBB的开放状况.     

RMP-7对提高脑胶质瘤化疗疗效的研究

九十年代以来,国外许多学者认为高渗性开放血脑屏障(BBB)辅助化疗的方法,使得非肿瘤脑组织内化疗药物浓度显著提高,造成了神经毒性及加重脑水肿,对治疗产生负面影响;于是着力开发并研制出了能选择性开放血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB),而保持血脑屏障完整性的药物RMP-7。本文就近年来国外对RMP-7的研究及应用作一综述。     

局部亚低温对脑出血后水肿影响的实验研究

目的探讨局部亚低温对大鼠脑出血后水肿形成的影响及其可能机制。方法雄性Wistar大鼠230只随机分为:对照组;脑出血组;脑出血加局部亚低温组;凝血酶加局部亚低温组。应用Evans-Blue测定血脑屏障(BBB)通透性,应用干湿重法测定脑水含量。结果与对照组相比,大鼠注血后6h开始出现脑组织水含量和BBB通透性的增加,在72h达到高峰,然后逐渐消退。不同时程局部亚低温均可以显著降低脑出血后72h时脑组织水含量及BBB通透性(P<0.01),其中给以4h局部亚低温时,降低最明显。注射凝血酶6h后,脑组织水含量及BBB通透性显著增高(P<0.01),于24~48h达高峰,然后逐渐下降。凝血酶 局部亚低温组在各个时间点与凝血酶组相比,脑组织水含量及BBB通透性明显降低(P<0.01)。结论局部亚低温可能是通过抑制凝血酶的毒性作用来减轻脑出血后水肿的形成及血脑屏障的破坏。     

神经生长因子在大鼠脑损伤后血脑屏障的通透性

目的研究神经生长因子（NGF）在大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障（BBB）中的通透性，寻找NGF通过BBB进入受伤脑组织的时间窗。方法采用液压打击造成大鼠中、重度颅脑创伤，尾静脉注射伊文蓝（EB），分别于伤后1h，3h，6h，12h，24h，72h，168h测量伤侧脑组织中的EB含量。将纯化的NGF用^125I标记，在上述时间段分别从尾静脉注射碘化NGF，用γ-counter计数仪测量伤侧脑组织的放射活性。结果重度脑创伤后EB值在伤后1h立即快速上升，并在3h达到高峰，峰值持续到72h，随后缓慢下降，在168h EB值仍较对照组明显增高。中度脑创伤后脑组织中的EB的含量在1h开始缓慢升高，6h达到高峰，峰值持续到12h随后下降，在168h基本恢复正常。重度脑创伤后脑组织中^125I—NGF在1h明显升高，在3h达到高峰，峰值持续约24h，在72h明显下降，在168h时仍比对照组高。中度脑创伤后^125I—NGF在1h脑组织中即能检测到，并缓慢升高，在6h即达到高峰，随后下降，至168h时其剂量同正常对照组相仿。结论脑创伤后BBB开放，其开放程度与颅脑创伤程度呈正相关。在脑创伤后NGF能随着BBB的开放而进入脑组织，NGF进入脑组织的量与BBB的开放程度及脑损伤程度呈正相关。     

药物透过血脑屏障靶向传递系统的研究

脑组织受血脑屏障(BBB)的保护阻止了某些有害物质的侵入,但同时也限制了药物的组织摄取而无法实现药物的疗效。本文概括了目前已被证实的可提高跨BBB药物递送途径即:化学传递、生物学传递、短暂性开放血脑屏障、特洛伊木马分子运载、纳米技术的应用等方法。系统地综述了有关药物透过血脑屏障靶向传递的思路和研究方法。     

星形细胞在血-脑屏障构成中的研究进展

血-脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是脑毛细血管所独有的特征性结构,它对一些能透过周围血管的物质具有屏障作用从而保护脑组织,对维持脑组织内环境的稳定性起着重要作用。其形态学基础包括一系列结构:脑毛细血管内皮细胞(endothelial cells)及内皮细胞间紧密连接(tight junc     

H-7在脑出血后脑损伤中作用机制的研究

目的探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂异喹啉磺酰类(H-7)在脑出血后脑损伤中的作用机制。方法SD雄性大鼠随机分为对照组、假手术组、脑出血组、H-7治疗组,采用自体血注入法建立大鼠脑出血模型,治疗组应用H-7每12 h腹腔注射一次。分别用伊文思蓝(EB)测血脑屏障(BBB)通透性,干-湿重法测脑组织含水量,同时进行组织病理学观察。结果H-7治疗组可以明显改善大鼠脑出血后BBB通透性(P<0.05),血肿周围脑水肿明显减轻(P<0.05),并且减少脑出血后血肿周围炎症细胞浸润。结论H-7通过抑制PKC,减轻脑出血后脑水肿?血脑屏障的开放和炎症细胞浸润,揭示PKC参与了脑出血后脑损伤。     

急性局灶性脑挫裂伤后大鼠血脑屏障改变的实验研究

目的:研究急性局灶性脑挫裂伤后大鼠血脑屏障的改变及对脑水肿的影响。方法:采用Feeney's自由落体撞击法建立急性局灶性脑挫裂伤模型。每组6只测量伤侧脑组织伊文思蓝(Evans Blue,EB)含量、脑组织含水量。每组3只电镜观察微血管内皮细胞超微结构改变。结果:急性局灶性脑挫裂伤后24h脑组织含水量为(79.79±0.83)%,与正常对照组(78.68±0.63)%相比有明显差异(P<0.01),脑损伤后6h脑组织中EB含量为(362.12±28.16)ug/g,与正常对照组(11.89±2.28)ug/g相比有明显差异(P<0.01);脑损伤后30min,微血管内皮细胞有轻度受损迹象,伤后3h毛细血管腔内有微绒毛形成,伤后6h微绒毛增多,伤后24~72h毛细血管腔明显狭窄。结论:脑含水量的变化与脑组织中EB含量变化不同步,BBB的开放先于脑水肿的形成。BBB的开放与微血管的机械性损伤、内皮细胞吞饮小泡增加、内皮细胞紧密连接中断有关,也与早期缺血、缺氧关系密切。     

Mg对单纯疱疹病毒性脑炎小鼠水孔蛋白-4表达的影响及血脑屏障通透性的研究

目的 研究镁剂对单纯疱疹病毒性脑炎(Herpes simplex encephalitis,HSE)后水孔蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)表达、血脑屏障(BBB)通透性及神经功能的影响.方法 小鼠脑内接种HSV-1病毒,治疗组静脉注射硫酸镁,对照组仅注射等量生理盐水.采用免疫组化技术对感染侧脑组织AQP4蛋白进行检测.通过检测渗出到脑血管外的伊文斯蓝(Evans Blue,EB)的含量来定量观察BBB的通透性.HSV-1病毒感染后5d对小鼠进行神经功能评分.结果 造模后第3天,脑组织AQP4的表达增加,第5天时更加明显(P<0.01),与血脑屏障通透性增高相一致,给与硫酸镁治疗后,血脑屏障通透性及AQP4的表达均明显降低(P<0.01),伴随着神经功能的改善.结论 镁剂能抑制AQP4蛋白的表达,保护BBB,改善脑炎后神经功能.     

血管内皮生长因子在高原脑水肿形成中作用的实验研究

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在高原脑水肿形成中的作用。方法:建立大鼠模拟高原模型,应用脑干湿重比率法定量脑水肿情况、应用荧光素钠透过率测定BBB通透性、应用实时荧光定量RT-PCR法检测脑组织VEGF mRNA含量以及应用蛋白印迹法半定量脑组织VEGF含量。结果:大鼠在高原24 h后脑组织含水率明显增高(P<0.05),荧光素钠透过率显著增加(P<0.01);VEGF mRNA转录及其表达显著增高(P<0.001)。结论:VEGF表达在高原脑水肿形成中起重要作用。     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性改变时相的研究

目的探讨大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)后氧自由基(OFR)与血脑屏障(BBB)通透性改变的时相关系。方法成年健康SD大鼠随机分为脑缺血/再灌注组、正常组及假手术组,分别在脑缺血2h后再灌注各时间点观察脑组织EB含量,血清超氧化物酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量以及脑组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达。结果OFR与脑组织EB含量有相同时相变化趋势,参与BBB通透性增高的整个过程,同期伴随MMP-2表达,且OFR峰值期与BBB通透性增高的第一高峰时相符合。结论OFR是导致BBB通透性增高的重要因素,尤其在其通透性增高的早期发挥重要作用,MMP-2激活可能是OFR损伤BBB的机制之一。     

N-乙酰半胱氨酸对重症急性胰腺炎大鼠血-脑屏障及脑组织损害的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血-脑屏障(BBB)及脑组织损害的保护作用.方法 30只SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、SAP组、NAC干预组(NAC组),每组10只大鼠.从胰胆管逆行注入5％牛磺酸钠(0.1 ml/100 g)制作SAP模型.分别于造模后3h、6h、12h将大鼠处死,取脑.采用光镜、电镜观察大鼠脑组织病理变化,免疫组化染色检测与BBB有关的3种细胞骨架蛋白:胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、凋亡相关基因(Bcl-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 NAC组各时间点大鼠脑组织病理评分明显低于SAP组(均P＜0.01).SAP组和NAC组各时间点Bcl-2、GFAP、MMP-9阳性细胞数均明显多于SO组(均P＜0.01).NAC组各时间点Bcl-2、GFAP阳性细胞数均明显多于SAP组(均P＜0.01),MMP-9阳性细胞数明显少于SAP组(均P＜0.01).结论 NAC能调节SAP大鼠的炎症因子表达,明显减轻其BBB的损害,对脑组织具有保护作用.     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注后claudin-5和TNF-α表达的影响

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠脑缺血再灌注后紧密连接(tight junctions,TJ)蛋白claudin-5和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的影响。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,伊文思蓝渗透性实验检测血脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性,透射电镜观察脑微血管内皮细胞间TJ的状态,免疫组化法测定claudin-5的蛋白表达,ELISA法检测TNF-α的含量。结果 EPO能够显著降低脑缺血再灌注后BBB的通透性(P<0.01),恢复TJ完整性,显著上调缺血脑组织中claudin-5表达水平(P<0.01),显著降低TNF-α含量。结论 EPO通过降低脑缺血再灌注后脑组织中TNF-α含量,使claudin-5的表达增加,从而恢复TJ完整性,降低BBB通透性。     

血脑屏障紧密连接在人脑胶质瘤中的变化

目的 探讨人脑胶质瘤血脑屏障(BBB)内皮细胞间紧密连接的变化及其可能的分子机制. 方法 将南方医科大学珠江医院神经外科自2008年至2009年切除的胶质瘤和正常脑组织标本分为3组:正常脑组织组(n=6)、低级别胶质瘤组(n=11)与高级别胶质瘤组(n=10),采用透射电镜观察标本BBB紧密连接的超微结构特征,应用免疫荧光双标染色和RT-PCR分别检测标本紧密连接蛋白Claudin-5和Claudin-5 mRNA的表达. 结果 电镜结果 显示正常脑组织微血管相邻内皮细胞间可见连续条带状的紧密连接.细胞间未见裂隙.低级别胶质瘤中多数微血管内皮细胞间可见连续的紧密连接,未见明显窗口形成.高级别胶质瘤中微血管内皮细胞间紧密连接破坏严重,内皮细胞间可见明显裂隙;免疫荧光双标染色结果 显示正常脑组织中微血管内皮细胞上有大量Claudin-5表达.低级别胶质瘤中微血管内皮细胞上Claudin-5表达略为下降,而高级别胶质瘤中微血管内皮细胞上无明显Clandin-5表达;RT-PCR结果 显示高级别胶质瘤Claudin-5 mRNA表达低于正常组脑组织和低级别胶质瘤,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 在脑胶质瘤发生发展过程中.胶质瘤细胞可以导致BBB内皮细胞间紧密连接蛋白Claudin-5的表达下降及BBB紧密连接结构的破坏,而紧密连接蛋白Claudin-5这一分子元件的表达下降可能是紧密连接结构受到破坏的重要分子机制.     

糖尿病对脑缺血大鼠细胞间黏附分子-1表达及脑组织和血-脑屏障损害的影响

目的:探讨糖尿病对脑缺血大鼠细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达及脑组织和血-脑屏障(BBB)损害的影响.方法:120只雄性SD大鼠,随机分为糖尿病组、正常对照组、糖尿病伴脑缺血组和脑缺血组,每组30只大鼠.后两组又分为脑缺血1h、3h、6h、12h、24h亚组,每亚组6只大鼠.用链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,用线栓法制作局灶性脑缺血模型.ICAM-1mRNA的表达水平用逆转录PCR检测,分别用TTC染色法和伊文思蓝注射法检测大鼠脑梗死体积及BBB破坏的程度.结果:脑缺血组各时间点亚组缺血侧脑组织ICAM-1mRNA表达均显著高于正常对照组(均P<0.05);糖尿病伴脑缺血组各时间点亚组ICAM-1mRNA表达均明显高于脑缺血组(均P<0.05).糖尿病伴脑缺血组大鼠脑梗死体积及BBB开放程度均明显大于脑缺血组(均P<0.05).结论:糖尿病使脑缺血大鼠ICAM-1表达上调,并可加重脑组织及BBB损害,提示ICAM-1表达上调可能是糖尿病加重脑缺血损伤的机制之一.     

神经细胞Ca~(2 )通道变化及对鼠血脑屏障通透性和外伤性脑水肿的影响

本实验通过大鼠的脑损伤模型,检测了脑皮质神经元突触体胞浆中游离Ca~(2 )浓度([Ca~(2 )]i),研究神经细胞 Ca~(2 )通道变化对血脑屏障(BBB)通透性和外伤性脑水肿的影响。结果表明,脑损伤后脑突触体胞浆中游离[Ca~(2 )]i显著升高,为对照值的10～16倍。Ca~(2 )超载使BBB通透性增高,加剧脑水肿。采用Ca~(2 )拮抗剂Nimodiipine 能阻断Ca~(2 )通道开放,降低BBB通透性,对脑水肿有显著治疗效果。氢溴酸山莨菪碱的治疗作用与Nimodipine基本相同。