子宫内膜异位症血管新生实验动物模型研究与治疗进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)具有类似恶性肿瘤远处转移及种植生长的生物学特性.随着EMs发病机制研究的深入,目前已发现血管新生是异位内膜植入和维持生长的必要条件.血管新生过程是指已有的毛细血管或毛细血管后静脉发展形成新生血管的过程,主要包括激活期血管基底膜降解,血管内皮细胞的激活、增殖、迁移,以及重建形成新的血管和血管网,是一个涉及多种细胞和多种分子的复杂过程[1].目前针对血管新生过程建立的EMs实验动物模型及抗血管生成治疗已逐渐受到研究者关注,后者可能成为EMs保守治疗的可行方法之一.     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1与子宫内膜异位症的相关性研究

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制物-1（TIMP-1）是否与子宫内膜异位症（EMs）有关。方法将11例EMs轻度和32例重度患者分别作为观察组1和2,41例卵巢畸胎瘤患者作为对照组。通过ELISA法测定腹水中MMP-9及TIMP-1值,比较各组两者及其比值的差异。结果与对照组比较,EMs轻度组MMP-9、TIMP-1差异无统计学意义（P〉0.05）,EMs重度组MMP-9、TIMP-1差异有统计学意义（P〈0.05）;3组的MMP-9/TIMP-1差异均有统计学意义（P〈0.05）;EMs轻度组与重度组相比较,MMP-9差异有统计学意义（P〈0.05）,TIMP-1差异无统计学意义（P〉0.05）。结论随着疾病的加重,MMP-9升高、TIMP-1降低、MMP-9/TIMP-1比值升高,MMP-9、TIMP-1与子宫内膜异位症发生、发展有相关性,特别是两者的比值,具有重要诊断价值。     

MMP-3、MMP-9、TIMP-1在子宫腺肌病中的表达及其意义

 目的 研究MMP-3、MMP-9、TIMP-1在子宫腺肌病中的表达,探讨子宫腺肌病的发病机制.方法 采用二步法免疫组化的方法检测子宫肌腺病45例在位内膜(A组)、36例异位内膜(B组)和28例对照组内膜中的MMP-3、MMP-9、TIMP-1含量.结果 MMP- 9在研究组A、研究组B中的表达强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-3在研究组A、研究组B中的表达强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TIMP-1在对照组中的阳性表达弱于研究组A,差异有统计学意义(P<0.05),研究组A强于研究组B的阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05).结论 子宫腺肌病的发病可能与MMP-3、MMP-9、TIMP-1的异常表达有关.     

实验性肌炎肌肉组织中MMP-2，MMP-9mRNA的表达和意义

目的 探讨MMP-2、MMP-9基因mRNA 在豚鼠实验性自身免疫性肌炎(EAM)肌肉组织中的表达和意义.方法 实验分为正常组和EAM组.利用兔骨骼肌肌球蛋白加完全弗氏佐剂多次免疫豚鼠,同时联合腹腔注射百日咳毒素,制成EAM模型,观察其临床表现、血CK、肌肉病理的改变;用RT-PCR 方法 检测10例EAM豚鼠肌肉中MMP-2和MMP-9基因mRNA的表达,以10 例正常豚鼠的肌肉组织作为对照组.结果 (1)MMP-2、MMP-9基因mRNA在EAM组肌肉中的表达较正常组显著增高( P<0.01).(2)EAM组血CK的含量与MMP-2、MMP-9基因mRNA在肌肉中的表达程度呈正相关(P <0.01).结论 MMP-2和MMP-9可能参与了EAM的发病.     

基质金属蛋白酶与子宫内膜异位症发病的相关性

子宫内膜异位症(EndometriosisEMs)是常见的妇科疾病,近年来发现,发病率呈逐年上升趋势,在育龄期的妇女中发病率高达20%。但是,目前EMs的发病机制仍不十分清楚。基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinase,MMPs)是肿瘤发生转移与浸润的一种重要介质,广泛分布于人体各种组织和器官     

Livin 、survivin、caspase-3在子宫内膜异位症中的表达及其意义

 目的 研究Livin、survivin、caspase-3在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)中的表达,探讨其在EMs发病中的作用.方法 采用原位杂交方法检测Livin 在40例EMs在位内膜、异位内膜及25例正常子宫内膜中的含量,同时用二步法免疫组化的方法检测survivin、caspase-3在上述三组中的表达.结果 Livin、survivin在EMs异位内膜与EMs在位内膜的表达强于正常子宫内膜,其差异有统计学意义(P＜0 05);caspase-3在EMs在位内膜与异位内膜的表达弱于正常子宫内膜,其差异有统计学意义(P＜0 05);无论是EMs组还是正常对照组,Livin、survivin、caspase-3在月经增生期和分泌期表达强度差异无统计学意义(P＞0 05).结论 子宫内膜异位症的发病可能与Livin、survivin、caspase-3的异常表达有关.     

基质金属蛋白酶-2与低氧诱导因子-1α在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的通过观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在子宫内膜异位症中的表达,探讨子宫内膜异位症的发病机制及MMP-2与HIF-1α的关系。方法应用免疫组化法检测子宫异位内膜(异位内膜组40例)、子宫在位内膜(在位内膜组40例)及正常内膜(正常内膜组20例)中MMP-2、HIF-1α蛋白的表达水平。结果 MMP-2、HIF-1α的阳性表达分别位于腺上皮细胞的细胞膜和细胞质及细胞核和细胞质,异位内膜组阳性表达高于在位内膜组与正常内膜组(P<0.05),在位内膜组阳性表达高于正常内膜组(P<0.05);MMP-2与HIF-1α表达强度的变化呈正相关(r=0.657,P<0.05)。结论在子宫内膜异位症组织中MMP-2和HIF-1α的表达明显增高,且HIF-1α可能参与调控MMP-2的表达。     

NF-κB和MMP-1在子宫内膜异位症中的表达及其相关性研究

目的:检测核转录因子(NF-κB)及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在子宫内膜异位症(EM)中的表达,探讨其与EM发病机制的相关性.方法:采用免疫组化SP法分别检测NF-κB及MMP-1在35例正常子宫内膜、48例EM在位内膜及76例EM异位内膜中的表达,并对检测结果进行统计学分析.结果:NF-κB和MMP-1主要定位于3 组内膜腺上皮细胞的胞质中,其中异位内膜表达强度最强,正常子宫内膜的表达强度最弱(P <0.05).在位内膜和正常子宫内膜NF-κB和MMP-1的表达强度随月经周期发生一定的变化,分泌期高于增殖期,差异有显著性(P <0.05).NF-κB与 MMP-1之间在正常子宫内膜、异位内膜和在位内膜中的表达具有正相关性,相关系数分别为0.819,0.884和0.914(P <0.01).结论:NF-κB和MMP-1在EM患者的在位及异位内膜的高表达及二者之间的正相关性提示其在EM发病机制中起一定的作用.     

子宫内膜异位症腹腔镜术后尿失禁的危险因素分析及护理

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是女性常见的妇科疾病之一,其中以卵巢异位最常见。腹腔镜手术是目前治疗卵巢EMs的主要方法,具有创伤小、疗效好、恢复快的优势[1-2]。但EMs腹腔镜手术对盆腔脏器有不同程度的刺激,术后可能诱发尿失禁,而目前尚缺乏卵巢EMs腹腔镜术后尿失禁的相关报道。为了预防该类手术尿失禁的发生,笔者总结了28例卵巢EMs腹腔镜术尿失禁的危     

CD40L和基质金属蛋白酶在冠脉斑块形成中的作用机制临床研究

 目的 探讨CD40L和基质金属蛋白酶在冠心病患者冠脉斑块形成中的作用机制.方法 根据冠状动脉造影证实有冠状动脉狭窄 ,根据冠状动脉狭窄评分(CSA)标准对86例冠心病患者按照冠脉病变支数分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3 个组,男51例,女35例,平均年龄59.4岁.采用酶联法测定 CD40L、CRP、MMP-2、MMP-9 .结果 CD40L、CRP,MMP-2、MMP-9随病情加重而升高,多支病变高于单支病变,Ⅱ型病变高于Ⅰ、Ⅲ型病变.MMP-2、MMP-9与CD40L呈正相关性(r=0.69)( r=0.75).结论 CD40L和MMPs在冠脉斑块形成中有一定联系,CD 40 L可能通过MMPs对冠脉损伤,从而导致斑块形成.而CD40L和MMPs增高有助于研究易损性冠脉斑块.     

4 Gy X线照射通过上调MMP-2/9表达增强骨肉瘤细胞迁移能力

目的 研究4 Gy X线照射对骨肉瘤细胞迁移能力的影响及其机制.方法 将143B细胞和U2OS细胞分为对照组和4 Gy照射组,分别于照射后12、24、36和48 h,采用Transwell法检测细胞的迁移能力,Western印迹检测细胞MMP-2和MMP-9蛋白表达水平;siRNA法干扰细胞MMP-2/MMP-9表达.结果 与对照组相比,4 Gy X线照射后,143B细胞和U2OS细胞12和48 h的迁移能力未发生显著变化(P>0.05),24和36 h的迁移能力均显著增强(P<0.05);同时,两种细胞的MMP-2和MMP-9蛋白表达水平在12和48 h无显著变化(P>0.05),在24及36 h显著升高(P<0.05);干扰143B细胞和U2OS细胞中的MMP-2/MMP-9表达后,两种细胞的MMP-2/MMP-9蛋白表达水平及迁移能力均明显降低(P<0.05).结论 4 Gy X线照射可通过上调MMP-2/MMP-9表达水平增强143B细胞和U2OS细胞的迁移能力.     

子宫内膜异位症患者腹腔液血管内皮生长因子的检测

 目的 探讨VEGF在子宫内膜异位症发病中的意义,以及其作为临床诊断指标的可行性,为子宫内膜异位症的临床诊断和治疗提供科学依据和新思路.方法 用双抗夹心ELISA法测定各组腹腔液中VEGF水平.结果 (1)EMs患者腹腔液中VEGF浓度Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期均显著高于对照组(P<0.01,P<0.05);但Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期比较差异无统计学意义(P0.05),且VEGF浓度与r-AFS分期无相关性(r=-0.323,P0.05).(2)EMs患者腹腔液中VEGF浓度卵泡期较黄体期显著升高(P<0.05);对照组VEGF浓度在卵泡期和黄体期的差异无统计学意义(P0.05);卵泡期腹腔液VEGF浓度在EMs组和对照组间比较,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),黄体期腹腔液VEGF浓度在EMS组和对照组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 VEGF与子宫内膜异位症的发生、发展有关,EMs患者腹腔液VEGF浓度可能受卵巢激素周期性调节.     

β-连接素和生存素在子宫内膜异位症患者异位内膜和在位内膜的表达及意义

目的探讨β-连接素(β-catenin)、生存素(survivin)两种蛋白在子宫内膜异位症(EMs)患者异位内膜和在位内膜的表达、分布及其在EMs发病中的作用与关系。方法应用免疫组织化学法检测31例子宫内膜异位症患者(EMs组)异位内膜和在位内膜及10例非子宫内膜异位症患者(正常对照组)在位内膜中β-连接素、生存素的表达,并检测两者的相关性。结果β-连接素在EMs组囊壁组织、在位内膜中表达的阳性率分别为87.1%(27/31)、83.9%(26/31);生存素在EMs组异位内膜、在位内膜中表达的阳性率分别为90.3%(28/31)、87.1%(27/31);β-连接素、生存素在正常对照组在位内膜表达的阳性率分别为40%(4/10)、30%(3/10)。EMs组异位内膜、在位内膜的β-连接素、生存素表达与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。EMs组异位内膜、在位内膜中β-连接素与生存素的表达有相关性(r分别为0.850,0.616,P<0.01)。结论子宫内膜β-连接素、生存素的高表达可能在子宫内膜异位症的发病过程中起重要作用。     

高压神经综合征的发病机制与防治对策

高压神经综合征(high pressure nervous syndrome,HPNS)是机体在较高压强下出现的与神经系统功能障碍有关的一系列症状和体征,以运动障碍(如震颤和肌肉抽搐)、脑电图变化、视觉障碍、眩晕、恶心和嗜睡等为特征.HPNS已成为限制潜水深度的主要医学问题[1],其发病机制和防治措施成为目前潜水医学研究的前沿问题.Xiao等人[2]研究发现,吡拉西坦(piracetam,脑复康)对高压环境造成的神经传导减慢有一定的防护作用.本文主要探讨HPNS的发病机制和吡拉西坦类药物的药理作用.     

内皮抑素对裸鼠肺癌生长和转移的抑制作用

目的:观察内皮抑素(Endostatin,ES)对裸鼠肺癌生长和转移的抑制作用.方法:将胸腔内接种了H460大细胞肺癌的裸鼠随机分成实验组和对照组.分别给予ES和等体积PBS皮下注射,共20 d.测量瘤重,计算动物生存率,测定动物血液中基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达情况.结果:对照组瘤重均高于实验组(P＜0.05);对照组裸鼠死亡时间均较实验组早;实验组动物血液中MMP-2的表达明显低于对照组.结论:ES可抑制肺肿瘤生长和转移,其作用机制之一与抑制MMP-2的表达活性有关.     

siRNA干扰明胶酶对人肾小管细胞ICAM-1表达的影响

目的 利用小干扰RNA(siRNA)抑制人肾小管上皮细胞(HKC)的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9,即明胶酶A和B的表达,观察其对胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响.方法 培养人肾小管上皮细胞,以100nmol/L佛波醇酯(PMA)刺激18h,脂质体转染抑制MMP-2或MMP-9表达的siRNA或无关siRNA.提取细胞总RNA或胞浆蛋白,利用Real-Time PCR、Western blot或免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术检测MMP-2、MMP-9或ICAM-1的表达情况.结果 特异性的siRNA能有效抑制HKC中MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白表达;免疫荧光结果显示经PMA刺激后HKC的ICAM-1表达上调,同时MMP-9-siRNA转染组人肾小管细胞的ICAM-1蛋白表达水比其他实验组高(P＜0.05).结论 抑制肾小管上皮细胞MMP-9的表达可使ICAM-1表达上调,提示除了细胞外基质降解途径外,MMP-9还可通过炎症途径影响肾脏纤维化进程.     

芳香化酶P450与环氧化酶-2在子宫内膜异位症和子宫腺肌病中的表达及意义

目的研究细胞色素芳香化酶P450（P450arom）和环氧化酶-2（COX-2）在子宫内膜异位症（EMs）和子宫腺肌病（AM）在位和异位内膜中的表达及相关性。方法应用免疫组化Envision法和半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测正常子宫内膜、EMs及AM的在位和异位内膜中P450arom及COX-2的蛋白与mRNA的表达,并进行相关性分析。结果P450arom和COX-2在正常子宫内膜中无表达或弱表达,二者在EMs和AM在位和异位内膜中的表达均高于正常子宫内膜,差异均有显著性意义（P〈0.05）。P450arom与COX-2在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异均有显著性意义（P〈0.05）。P450arom在EMs和AM增殖期和分泌期表达无差异（P〉0.05）。COX-2在正常子宫内膜、EMs分泌期表达高于增殖期,差异均有显著性意义（P〈0.05）,在AM表达不随月经周期变化。P450arom mRNA与COX-2mRNA在EMs中的表达水平呈正相关（r=0.964,P〈0.01）;在AM中的表达水平亦呈正相关（r=0.813,P〈0.01）。结论P450arom和COX-2在EMs和AM中呈过表达,与EMs和AM的发病相关,二者协同作用促进EMs和AM的发生发展。     

兔VX2肝癌模型的MMP-2的表达

目的 探讨在兔VX2肝癌模型上的金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达特征及其意义.方法 建立30只新西兰大白兔VX2肝癌模型.成瘤后第2.5周处死动物,取得癌组织及癌旁组织30例,正常肝组织20例,进行MMP-2的免疫组化SP染色.根据MMP-2 免疫组化染色的阳性结果进行阳性细胞计数,同时根据细胞阳性染色的数目确定阳性、阴性.结果 癌组织内MMP-2表达呈阳性者26例,阳性率为86.7%(26/30),癌旁组织表达阳性16例,阳性率为53.3%(16/30),正常兔肝组织表达为阴性.癌组织内表达部位主要在癌细胞胞浆和间质组织内,癌栓内、胆管上皮、血管内皮均有部分表达.结论 兔VX2肝癌的MMP-2表达特征与人类肝癌(HCC)的表达相似,在此模型上从MMP-2角度进行肝癌临床相关研究具有一定可行性.     

激活HaCat细胞表面TLR促进细胞迁移的初步研究

目的观察长链游离脂肪酸对体外培养的角质形成细胞的作用,探讨其促进细胞迁移的机制。方法 (1)体外培养HaCat细胞。(2)免疫印迹法(Weston bloten)检测HaCat细胞表面TLR2、TLR4表达。(3)划痕实验法检测激活TLR对HaCat细胞迁移率的影响。(4)Real Time-PCR法分析N、PA、SA、LPS组MMP-3、MMP-9、TIMP-1的表达。结果 (1)HaCat细胞表面有丰富的TLR2、TLR4受体表达。(2)SA、LPS激活细胞表面TLR后可以明显促进细胞迁移,从而发挥促进创面愈合的作用。结论 SA、LPS可促进角质形成细胞迁移从而促进创面愈合;其机制可能为:SA作用于TLR促进细胞释放MMP-1、MMP-9、抑制TIMP-1表达等因素有关。     

MMP-2C-735T基因多态性与高血压伴颈动脉粥样硬化的关系

 目的 研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)C-735T与原发性高血压(essential hypertension,EH)伴颈动脉粥样硬化(carotid a山erosclerosis,CAS)的关系.方法 采用病例-对照研究,应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(polymerase chain reaction-restiction fragment length polymorphism,PCR-RELP)技术测定MMP-2 C-735T基因多态性.结果 AS组的T等位基因频率明显高于NS组(X2=7.144,P=o.008).结论 MMP-2基因C-735T多态性可能与汉族EH患者伴CAS有关,T等位基因可能增加EH患者伴发CAS的风险.