地塞米松对TNF -α诱导的H460细胞增殖的影响

目的:观察地塞米松对TNF -α诱导的肺癌H460细胞增殖的影响.方法:体外培养H460细胞,经TNF -α刺激后,随机分为对照组和实验组,对照组用不含地塞米松的DMEM培养液培养,实验组则分别加入含不同浓度地塞米松的DMEM培养液.通过MTT比色实验观察各组的值.结果:TNF -α( 12.5～100 ng/ml)可...     

sTREM-1在内毒素诱导急性肺损伤早期的作用及意义

目的观察sTREM-1在内毒素诱导急性肺损伤早期的作用及意义。方法建立小鼠内毒素肺损伤的模型,酶联免疫吸附法检测肺组织以及血浆中sTREM-1、抗炎因子IL-10以及其他促炎因子IL-1β、IL-6。结果 sTREM-1具有与抗炎因子IL-10相同的动力学改变（r=0.99,P〈0.01）,且血浆中IL-1β/sTREM-1、IL-6/sTREM-1分别与组织中相应的比值正相关（r〉0.90,P〈0.01;r〉0.80,P〈0.01）,血浆中IL-1β/sTREM-1和IL-6/sTREM-1之间以及组织中相应的比值之间均呈正相关（r=0.80,P〈0.01;r=0.80,P〈0.01）。结论 sTREM-1作为抗炎因子在LPS诱导的ALI过程中发挥保护肺组织的作用,而且血浆内sTREM-1与其他促炎因子形成的促炎/抗炎比值的检测可用于肺组织内炎症反应状态的评价。     

Ⅱ型肺泡上皮细胞与急性肺损伤的研究进展

AECⅡ是肺泡壁的重要组成部分,也是ALI／ARDS发生、发展的重要参与者。AECⅡ可通过分泌炎症介质和促凝、抗凝因子参与ALl时全身炎症反应综合征和凝血反应失衡的形成。AECⅡ上Na^＋-K^＋-ATP酶活性以及数量的下调加重了．ALI时的肺水肿。肺组织内的AECII增生并转化为AECI以及间质细胞参与了肺损伤后的修复和纤维化的形成。而且,AECⅡ还具有免疫调节功能,参与肺组织内的防御反应。近年来研究发现,与AECⅡ相关的生物标志物SP—D和KL－6与ALI／ARDS肺损伤的严重程度及疾病的预后相关,但尚无对SP—D或KL－6与炎症反应相关性的研究。     

内毒素所致急性肺损伤发病机制的研究进展

急性肺损伤是临床常见的危重症。内毒素是导致急性肺损伤最常见的原因。近年来关于内毒素所致的急性肺损伤发病机制的研究发现：核转录因子κB、IL-8和中性粒细胞在促炎/抗炎反应的失衡中发挥重要作用,组织因子和肺泡上皮细胞在调节促凝/抗凝反应的失衡中发挥重要作用,而氧化应激和炎症反应之间可以相互促进。而且肺泡上皮细胞和PMN凋亡功能的紊乱、肺泡上皮细胞上Na＋通道的下调、PMN释放的中性粒细胞弹性蛋白酶等在LPS导致的ALI发展过程中都发挥重要作用。     

脓毒症金黄色葡萄球菌感染监测及治疗体会

目的分析常见抗菌药物敏感性及对确诊金黄色葡萄球菌感染脓毒症患者目标性治疗情况。方法收集兰州军区兰州总医院2009年1—3月送检血液标本及2010年1—3月送检的多种标本(血液、痰、支气管肺泡灌洗液等)。筛选送检的阳性标本中2次或2次以上培养出同一种金黄色葡萄球菌的脓毒症患者72例,记录用药情况,病情转归。结果 2010年1—3月共收集各种微生物标本3153份,检出阳性标本1108份,分离出细菌和真菌1557株,其中金黄色葡萄球菌106株(6.81%),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)61株,占金黄色葡萄球菌的57.55%;2009年及2010年血液标本中金黄色葡萄球菌检出率分别为8.33%和10.71%。MRSA对万古霉素、利奈唑胺敏感性相当,对万古霉素耐药率为4.92%。对确诊金黄色葡萄球菌感染患者进行目标性治疗,临床疗效较好。结论金黄色葡萄球菌是脓毒症患者重要致病菌之一,耐药率较高,2010年同期检出率高于2009年,利奈唑胺是治疗耐药金黄色葡萄球菌感染的良好选择。     

内毒素诱导的急性肺损伤大鼠肺组织HGF、KGF的动态变化及β_2受体激动剂的干预效应

目的探讨内毒素(lipoplysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤早期肺组织肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、角质细胞生长因子(keratinocyte gronth factor,KGF)的动态变化及β2受体激动剂的治疗效果。方法将78只Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组(NS组n=6)、内毒素组(LPS组n=36)、β2受体激动剂组(n=36),向LPS和β2受体激动剂组大鼠腹腔内注射1 mL含LPS(5 mg.kg-1,n=36只)的生理盐水复制ALI模型。生理盐水对照组则给予等量生理盐水腹腔注射。β2受体激动剂组大鼠于造模30 min内经鼠尾静脉一次性给予β2受体激动剂0.02 mg.kg-1。三组实验大鼠分别于4 h、8 h、12h、16 h、24 h、32 h各随机处死6只。收集血清,冰浴匀浆肺组织制备匀浆,-80°C冻存。Elisa法测定肺组织HGF、KGF的量。计算肺组织的湿重(D)与肺组织干重(W)的比值,以此评估肺水肿的程度,进行肺组织形态学观察,并研究β2受体激动剂对肺组织匀浆液HGF、KGF的影响。结果①急性肺损伤早期肺组织匀浆液内HGF的表达呈双峰,分别于8 h、32 h达到高峰。KGF从16 h开始增高,32 h未见回落至正常水平;②β2受体激动剂干预后HGF、KGF分别在8 h、12 h升高,并持续在较高水平。结论①急性肺损伤早期大鼠肺组织HGF、KGF早期就有所升高;②β2受体激动剂能促进HGF、KGF的分泌,促进受损组织的修复。     

肺成纤维细胞三维立体培养条件对肺纤维化组织重塑的影响

背景：组织细胞三维立体培养是肺纤维化破坏与组织收缩研究的理想模型,特别是在纤维化的进展过程中,几种细胞因子如肿瘤坏死因子、白细胞介素、前列腺素、胰岛素以及渗出的血浆成分可能在纤维化的损伤修复和组织重塑中起重要的作用。目的：观察三维立体培养条件下肺成纤维细胞在血清和血清蛋白、胰岛素和细胞因子前列腺素E2、转移生长因子β、肿瘤坏死因子α的细胞外胶原基质收缩和细胞凋亡,探讨肺纤维化过程中细胞因子、胰岛素、血清及血清蛋白对肺组织重塑和纤维化形成的影响。设计：随机对照实验。单位：解放军兰州军区兰州总医院呼吸内科。材料：实验于2005-08/2006-01在解放军兰州军区兰州总医院呼吸内科实验室完成。人胚肺成纤维细胞（AmericanTypeCultureCollection）,DMEM培养液和胎牛血清（GIBCO）,胰岛素、转移生长因子（R＆D）,前列腺素E2（Sigma）,Ⅰ型胶原提取自大鼠尾部肌腱。方法：为观察初始浓度对成纤维细胞收缩力的影响及细胞数量对胶原收缩的影响,提取大鼠尾部的胶原,与双蒸水、4×DMEM及成纤维细胞混合成胶原含量为0.75-1.5g/L的立体组织胶原,细胞浓度为0.2×10^7-4×10^7L^-1,置入含体积分数0.05的CO2培养箱37℃培养。每天测定胶原的面积,最后计算终面积与初始面积的比值。将0.01%-0.5%血清、0.1%的血清白蛋白和0.1%球蛋白分别加入到培养液中,观察胶原的收缩。加入10mg/L转移生长因子、10mg/L白细胞介素1、1mmol/L胰岛素和0.1μmol/L前列腺素E2,观察细胞因子对成纤维细胞介导胶原收缩的影响,对胶原中DNA含量进行测定及细胞存活率检测。主要观察指标：不同细胞因子或血清成分对肺成纤维细胞介导胶原收缩的影响,胶原内成纤维细胞数量对胶原收缩的影响,以及不同浓度胶原对胶原收缩和对细胞增殖和凋亡的影响。结果：①胶原的收缩有细胞依赖性,细胞浓度越高则胶原收缩越强烈。②血清和白蛋白的加入引起了剧烈的胶原收缩。③转化生长因子和胰岛素增强胶原的收缩,前列腺素E和白细胞介素1抑制胶原的收缩。④胶原的初始浓度越低,胶原收缩的速度越快越强烈,胶原终面积就越小,其中的成纤维细胞凋亡就越多。结论：肺成纤维细胞介导的胶原收缩可被白细胞介素1和前列腺素E抑制,胰岛素和转化生长因子则促进了胶原收缩。血清及血清成分在受损肺组织的渗出可以导致肺组织胶原的稀释与强烈收缩,而导致成纤维细胞增殖的抑制和凋亡的增加,肺纤维化进一步发展,成为无细胞胶原成分。     

不同机械通气方法在治疗AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭中的临床分析

慢性阻塞性肺疾病急性加重（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD）合并Ⅱ型呼吸衰竭病情严重,目前主要的治疗手段是机械通气。有创机械通气（invasive positive pressure ventilaton,IPPV）为临床常用通气方法,但这种方法容易引起呼吸机相关性肺炎（ventilator associated pneumonia,VAP）、呼吸机相关肺损伤等。     

胶原三维立体培养模型中胚肺成纤维细胞与肺癌GLC-82细胞的相互作用

背景：组织细胞、炎细胞可能在肿瘤细胞的侵袭、转移中发挥着重要作用,而细胞间的相互作用对基质金属蛋白酶有影响。 目的：观察胚肺成纤维细胞与肺癌GLC-82细胞在胶原三维立体培养条件下,相互作用对基质金属蛋白酶1,2,9表达的影响。 方法：采用三维胶原立体培养模型,按比例混合胶原,4倍DMEM和灭菌水,1倍DMEM的液体胶原,其中胶原终浓度为0.75 g/mL。将GLC-82细胞、胚肺成纤维细胞分别单独培养及GLC-82细胞和胚肺成纤维细胞按5∶1混合培养,待胶原固化后加入1倍DMEM培养基,48 h后收集上清液。Western blot法检测基质金属蛋白酶1表达水平,明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶2,9的表达。 结果与结论：胚肺成纤维细胞与肺癌GLC-82细胞混合培养组基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶2,9分泌量大于单独培养组(P < 0.05)。结果提示,三维立体培养条件下,胚肺成纤维细胞与肺癌GLC-82细胞相互作用能通过上调基质金属蛋白酶1,2,9的表达和活化,促进肺癌侵袭和转移。     

Ⅱ型肺泡上皮细胞与急性肺损伤的研究进展

AECⅡ是肺泡壁的重要组成部分,也是ALI/ARDS发生、发展的重要参与者。AECⅡ可通过分泌炎症介质和促凝、抗凝因子参与ALI时全身炎症反应综合征和凝血反应失衡的形成。AECⅡ上Na+-K+-ATP酶活性以及数量的下调加重了ALI时的肺水肿。肺组织内的AECⅡ增生并转化为AECⅠ以及间质细胞参与了肺损伤后的修复和纤维化的形成。而且,AECⅡ还具有免疫调节功能,参与肺组织内的防御反应。近年来研究发现,与AECⅡ相关的生物标志物SP-D和KL-6与ALI/ARDS肺损伤的严重程度及疾病的预后相关,但尚无对SP-D或KL-6与炎症反应相关性的研究。