高效毛细管电泳法测定唐古特大黄多糖中单糖的组成

目的测定唐古特大黄多糖中单糖的组成及其物质的量之比。方法将大黄多糖样品用2 mol·L^-1的硫酸溶液降解成单糖后，用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化成单糖，应用毛细管区带电泳法测定各单糖。熔融石英毛细管柱(50 μm×70 cm，有效长度60 cm);二极管阵列检测器;运行缓冲液为硼砂水溶液(浓度为150 mmol·L^-1、pH值为10.8);分离电压10 kV;柱温25 ℃;0.5 Pa压力下进样，进样时间5 s。结果唐古特大黄多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸等8种单糖组成，其物质的量之比为1.00∶23.27∶15.93∶2.95∶1.34∶49.07∶2.62∶4.31。结论该方法具有简单、快速、分离效率高等特点，可用于唐古特大黄多糖中单糖组成的测定。     

柱前衍生-高效毛细管电泳法测定刺糖多糖中单糖的组成

目的:分析测定刺糖多糖中单糖的组成。方法:将刺糖多糖水解成单糖,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,采用高效毛细管电泳法在245 nm紫外检测分离测定各单糖。结果:刺糖多糖中阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸的摩尔比为2.80∶38.61∶5.28∶3.76∶1.91∶3.82∶2.45,且刺糖多糖中葡萄糖的含量为35.65%。结论:本法测定刺糖多糖的单糖组分操作简便,灵敏度高,结果准确可靠,可用于刺糖多糖单糖组成测定和质量控制。     

柱前衍生化HPLC分析蒲公英多糖的单糖组成

目的合理优化衍生方法测定蒲公英多糖中单糖的组成及摩尔比。方法采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生,用反相高效液相色谱法进行测定。色谱条件为：ZORBAX-C18柱;流动相：0.1mol·L^-1的磷酸盐缓冲液（pH6.7）-乙腈（83∶17）;流速：1mL·min^-1;检测波长：245nm;进样量：20μL;柱温：室温。结果蒲公英多糖由D-鼠李糖、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和D-阿拉伯糖组成,以不同方法提取的各单糖含量的摩尔比为：水提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.088∶0.500∶0.190∶0.340;超声提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.050∶0.350∶0.080∶0.320;酶提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.270∶0.630∶0.330∶0.460;超声协提取同酶法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.078∶0.550∶0.130∶0.170。结论改进后的衍生化方法和等度洗脱的色谱方法具有操作简单、快速、重复性好等特点,可用于蒲公英多糖中单糖组成和摩尔比的测定。     

新疆药桑叶多糖中单糖组成的气相色谱分析

目的分析新疆药桑叶多糖中单糖的组成及含量。方法将新疆药桑叶多糖用4mol·L-1三氟醋酸水解12h,加入10mg盐酸羟胺、0.5mL吡啶和0.5mL醋酸酐于水解产物中进行衍生化反应,反应生成糖腈乙酸酯衍生物,采用气相色谱法测定药桑叶多糖的单糖组成。用Rtx-5毛细管色谱柱(30m×0.25mm,0.25μm);载气为N2;进样温度为235℃;检测器温度为280℃;进样量为1.0μL。柱温为程序升温,初始柱温155℃,维持1min,以0.4℃·min-1的速率升高到160℃,维持2min后,以0.5℃·min-1的速率升高到169℃,再以0.2℃·min-1的速率升高到172℃。结果新疆药桑叶多糖中鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的摩尔组成比例为7.16∶9.59∶1.09∶1.05∶12.36∶15.52。结论该方法简便、灵敏、准确可靠,可用于新疆药桑叶多糖中单糖的含量测定。     

高效液相色谱法分析松茸多糖的单糖组成

目的:测定松茸多糖中单糖的组成及其摩尔比。方法:松茸多糖采用2 mol·L-1三氟醋酸水解后通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,用高效液相色谱法梯度洗脱测定;检测波长250 nm。结果:松茸多糖由D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖、D-木糖组成,摩尔比为18.92∶2.68∶1.63∶1。各单体线性关系良好,r>0.998。D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖、D-木糖平均回收率分别为94.0%,88.5%,93.9%,95.9%。结论:该方法简便、准确、重复性良好,适用于分析松茸多糖中单糖组成。     

麦冬多糖单糖组成的分析方法研究

目的:建立一种麦冬多糖中单糖组成的高效液相色谱(HPLC)-蒸发光散射(ELSD)测定方法。方法:以三氟乙酸(TFA)水解麦冬多糖,采用Waters XBridgeTMAmide色谱柱,乙腈-水-三乙胺(75∶25∶0.2)为流动相,ELSD检测器监测麦冬多糖的酸水解产物,优化麦冬多糖的全水解条件,并对麦冬多糖的单糖组成进行分析。结果:麦冬多糖由果糖和葡萄糖组成,其全水解条件为以0.02 mol·L-1TFA为水解试剂,在110℃下水解2 h。HPLC-ELSD方法验证结果表明,该单糖组成测定方法的精密度和重复性良好,果糖和葡萄糖的加样回收率分别为95.9%～104.4%和91.3%～104.1%(RSD<5.9%)。麦冬多糖中果糖和葡萄糖的摩尔比约为15∶1。结论:本研究为麦冬多糖中单糖组成的准确测定提供了方法。     

UPLC-MS/MS法测定何首乌及其混伪品中多糖的单糖组成

目的:建立测定何首乌多糖的单糖组成超高效液相色谱串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,并用以区分何首乌生品、制品、夜交藤(同一植物的不同部位)及市场常见混伪品(黄药子、红药子、白首乌)。方法:采用水提醇沉法获得样品中多糖成分,以三氟乙酸水解多糖,水解产物加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化。以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)为分析柱;乙腈和缓冲盐溶液(1 mmol·L^-1乙酸铵-0.175%乙酸)为流动相进行梯度洗脱分离;流速0.2 mL·min^-1;柱温35℃;进样量2μL。电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式检测,采用内标法进行定量。结果:何首乌生品中的多糖成分由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖等10种单糖组成,其含量百分比分别为0.38%,0.08%,0.99%,0.70%,8.56%,84.55%,2.11%,2.45%,0.11%,0.08%。制何首乌多糖的单糖组...     

HPLC-ELSD法同时测定茯苓水溶性多糖中多种单糖

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)测定茯苓水溶性多糖中单糖含量的测定方法。方法:采用Shodex Asahipak NH2P-504E色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(81∶19);流速:1.0 ml·min^-1;柱温:35℃;进样量:50μl;ELSD参数:漂移管温度:70℃,喷雾管温度:30℃,载气流速:1.1 ml·min^-1。结果:岩藻糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖的进样量分别在1.18~3.68μg(r=0.9987)、4.26~13.33μg(r=0.9973)、7.09~22.18μg(r=0.9963)、8.43~26.35μg(r=0.9970)呈良好线性关系;平均加样回收率分别为100.64%,104.01%,106.10%,105.74%,RSD分别为3.70%,2.09%,1.78%,1.74%(n=6)。结论:该方法准确可靠、操作简便、分离效果好,适用于茯苓水溶性多糖中单糖的含量测定。     

HPLC分析大蒜多糖中的单糖

目的 建立一种反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分析大蒜多糖中的单糖组成及摩尔比。方法 大蒜多糖样品经2 mol·L^-1硫酸降解为单糖后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮( PMP)衍生化,采用Shimadzu VP-ODS柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)分离,以乙腈-醋酸铵缓冲溶液(取醋酸铵7.708 g加水溶解并稀释至1 000 mL,用醋酸调pH 5.5 (22∶78)为流动相,流速为0.8 mL·min^-1,在245 nm处检测单糖的衍生化产物。结果 大蒜多糖中甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GlcUA)半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Arab)7种单糖的摩尔比为4.31∶4.23∶4.19∶9.13∶27.4∶4.99∶3.81。结论 本方法灵敏度高,结果准确可靠,可用于大蒜多糖的单糖组成测定及质量控制。     

柱前衍生化HPLC法测定不同基源金线莲多糖的单糖组成

目的:建立测定不同基源金线莲多糖中单糖组成的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Alltima-C18,柱温为30℃,流动相为0.1 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(Na H2PO4-Na2HPO4,p H=6.7)-乙腈(83∶17,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为254nm。结果:花叶开唇兰多糖由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其物质的量之比为2.52∶0.53∶1.00∶5.07∶1.58;台湾银线兰多糖由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量之比为1.10∶0.50∶1.00∶1.92;滇越金线兰多糖由甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其物质的量之比为2.95∶0.28∶0.53∶1.00∶9.30∶2.26。甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的进样量分别在0.32~3.18μg(r=0.999 9)、0.08~0.83μg(r=0.9999)、0.08~0.78μg(r=0.999 9)、0.13~1.32μg(r=0.999 9)、0.38~3.75μg(r=0.999 8)、0.24~2.43μg(r=0.999 7)范围内与各自峰面积呈良好线性关系;精密度、重复性、稳定性试验的RSD<3%;平均加样回收率分别为99.34%、98.43%、99.79%、98.93%、99.50%、99.71%(n=6)。结论:该方法简单、快速、分离效率高,可用于测定不同基源金线莲多糖中的单糖组成。     

抗肿瘤转移多聚β肽聚乙二醇化的研究

目的:研究抗肿瘤转移多聚β肽的聚乙二醇(PEG)化的方法及其作用。方法:采用甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEGALD5000)修饰多聚β肽;采用电泳和成像分析系统检测修饰率。以粘附实验检测生物活性。结果:(1)二聚β肽(β2)的修饰率为66.7%,三聚β肽(β3)为52.7%。(2)最佳反应条件为:pH值为5,多聚β肽和mPEGALD5000的摩尔之比为1∶10,反应温度为4℃,反应时间为24h。(3)修饰后产物在4℃下可稳定放置50d。(4)修饰后产物水溶解度增加。(5)β2,β2-PEG,β3和β3-PEG对SMMC-7721和HCCLM6细胞与纤连蛋白(FN)粘附均具有显著的抑制作用(P<0.01),而且PEG修饰后作用显著增强(P<0.05或P<0.01)。结论:采用mPEGALD5000能有效地将多聚β肽PEG化。多聚β肽和PEG修饰物对肿瘤细胞与FN的粘附具有特异的抑制作用,且PEG修饰后作用增强。     

Beagle犬血浆中尼莫地平的HPLC法测定及其药动学

建立了HPLC法测定Beagle犬血浆中尼莫地平的含量,并研究了6只健康Beagle犬一日两次口服60 mg尼莫地平缓释片后的药动学.血浆样品经液-液萃取后测定,采用C18色谱柱,以乙腈-0.08mol/L乙酸铵(60:40)为流动相,检测波长358nm.尼莫地平在2.5～60μg/L浓度范围内线性关系良好,最低定量限为2.5μg/L,日内和日间 RSD均小于10%.主要药动学参数为:t1/2(5.6±0.7)h,c(39.0±3.6)μg/L,tmax(4.5±1.2)h,AUCo-t(626.0±34.0)μg·h·L-1,AUC0-∞(680.2±42.9)μg·h·L-1.     

Molecular cloning, mutations and effects of NK1 receptor antagonists reveal the human-like pharmacology of gerbil NK1 receptors

The present study investigates the pharmacology of the cloned neurokinin 1 receptor from the gerbil (gNK(1)R), a species claimed to have human-like NK(1)R (hNK(1)R) pharmacology. The amino acid sequence of NK(1)R was cloned. The hNK(1)R, rat NK(1)R (rNK(1)R), gNK(1)R and mutants of the gNK(1)R were expressed in CHO cells. The affinity and potency of NKR agonists and the NK(1)R antagonists CP99994 and RP67580 (NK(1)R-selective) and ZD6021 (NK1/2R) were assessed in vitro by monitoring [(3)H]-SarMet SP binding and substance P-evoked mobilization of intracellular Ca(2+). The gerbil foot tap (GFT) method was used to assess the potency of the antagonists in vivo. The gNK(1)R coding sequence displayed an overall 95% and 97% homology with hNK(1)R and rNK(1)R, respectively. The affinity of the NK(1)R-selective agonist (3)H-SarMet SP for human and gerbil NK(1)R was similar (2.0 and 3.1 nM) but lower for rNK(1)R (12.4 nM). The rank order potency of the agonists for NK(1)R was SP > or = ASMSP > or = NKA > pro7NKB in all species. The NK(1)R antagonists, ZD6021 and CP99994, had comparable affinity and potency for gerbil and human NK(1)R, but were 1000-fold less potent for rNK(1)R. In contrast, RP67580 had comparable affinity and potency for all three species. Mutations in positions 116 and 290 did not affect agonist potency at the gNK(1)R while the potency of the antagonists ZD6021 and CP99994 were markedly decreased (10-20-fold). It is concluded that gNK(1)R has similar antagonist pharmacology as the human-like orthologue and that species differences in antagonist function depend on key residues in the coding sequence and antagonist structure.     

手性黄皮酰胺生物转化的立体选择性

以相同的肝微粒体温孵体系对(+) 和(-) 黄皮酰胺(Cla)进行了温孵,以HPLC分析比较了代谢结果,发现(+)-和(-)-Cla所产生的主要代谢产物基本相同,但主要代谢产物在(+)-和(-)-Cla温孵体系中含量差别较大,左旋体代谢产生的CM1和CM5的量比右旋体大;CM2是左旋Cla的主要代谢产物之一,右旋体产生极小的量;而CM3是右旋Cla的主要代谢产物,左旋体产生的量较少. CM4, CM6是由CM3进一步代谢所产生的双羟基代谢产物,右旋体产生的量多于左旋体. 定量分析(+)-,(-)-Cla在肝微粒体中不同时间的代谢情况,发现(+)-,(-)-Cla在实验浓度下均为非线性动力学,二者代谢速率基本相同,不同时间代谢的立体选择性基本相同.     

左氧氟沙星片剂绝对生物利用度研究

目的 在中国健康志愿者中进行左氧氟沙星(可乐必妥)500mg片剂药代动力学研究,并以左氧氟沙星500mg(100ml)注射液为对照,研究口服片剂的绝对生物利用度.方法 10名受试者分别单剂空腹口服左氧氟沙星500mg片剂和单次静脉滴注500mg(100ml)注射液.以高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定血、尿样中左氧氟沙星药物浓度.结果 受试者单剂空腹口服左氧氟沙星500mg片剂后平均C_(max)实测值为(6.20±2.51)mg/L,T_(max)为(0.91±0.54)h,t_(1/2)为(6.71±0.88)h,AUC_(0-∞)为(41.88±5.72)mg·h/L,24h内尿中平均累积排出率为(69.40±7.27)%,其与注射液相比绝对生物利用度几何均数比为107.5%(以AUC_(0-∞)计),90%可信区间为(97.72～118.25)%.结论 左氧氟沙星500mg片剂单次口服给药后吸收迅速,且吸收完全.提示临床可以每日一次,500mg顿服,用于左氧氟沙星先静脉给药,继以口服的序贯疗法.     

高效液相色谱法测定人血浆中的西洛他唑及其药动学

目的 :建立高效液相色谱法 (HPLC)测定西洛他唑在健康人体内的药动学参数。方法 :血浆样品以地西泮作内标 ,经乙醚提取并浓缩进样 ;采用HYPERSILC18分析柱 (2 0 0mm× 5 .0mm ,5 μm) ,以乙腈 磷酸盐缓冲液 (5 0∶5 0 )为流动相 ,流速 1.0mL·min- 1;柱温 2 5℃ ;在紫外 2 5 7nm处检测。结果 :标准曲线线性范围为 0 .0 2 73～ 3.4 880mg·L- 1,r=0 .9994 ;方法回收率 91.74 %～ 110 .0 9% ;日内RSD为 1.0 2 %～ 7.4 2 % ,日间RSD为 5 .0 8%～6 .85 %。结论 :HPLC测定西洛他唑血药浓度灵敏、可靠 ,回收率高 ,结果准确 ,能满足西洛他唑临床药动学和生物等效性研究     

国产与进口头孢布烯片在健康人体的生物等效性

目的研究国产与进口头孢布烯片(β内酰胺类抗生素)在健康人体的生物等效性。方法对入选的22名男性健康受试者随机交叉给药,分别单剂量口服头孢布烯试验制剂(国产)和参比制剂(进口)各400 mg;用高效液相色谱法测定血药浓度,用3P97软件计算2者的药代动力学参数及相对生物利用度。结果试验和参比制剂主要药代动力学参数,tmax分别为(2.18±0.97)和(2.43±0.81)h;Cmax分别为(18.58±2.70)和(18.95±4.38)μg.mL-1;t1/2分别为(2.41±0.86)和(2.36±0.70)h;AUC0-t分别为(95.76±14.54)和(96.14±18.87)μg.h.mL-1。试验制剂对于参比制剂的平均相对生物利用度F为(101.77±17.72)%。结论2种头孢布烯制剂为生物等效制剂。     

体外受精-胚胎移植出生子代性别比影响因素分析

目的　探讨行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）治疗出生子代性别比（secondary sex ratio,SSR）的相关影响因素。方法　收集2013年6月至2021年6月在广州中医药大学第二附属医院生殖医学科接受体外受精-胚胎移植治疗分娩的胎儿性别数据,分别按移植卵裂期胚胎与囊胚、体外受精与卵胞浆内单精子显微注射（intracytoplasmic sperm insemination,ICSI）受精胚胎、不同来源精子行ICSI治疗胚胎进行分组比较,并按多因素logistic回归分析法进行分析。计量资料采用单因素ANOVA检验（方差齐）,计数资料采用χ^２检验及Fisher’s确切概率法。结果　IVF-ET治疗男女出生性别比为116∶100（1 158∶998）。移植卵裂期胚胎1 310个分娩周期与移植囊胚433个分娩周期进行比较,出生男女性别比：108∶100（870/809）比147∶100（277/189）,差异存在统计学意义（P<0.05）。移植IVF胚胎1 306个分娩周期与移植ICSI 胚胎433个分娩周期进行比较,出生男女性别比为121∶100（879/724）比97∶100（264/272）,差异有统计学意义（P<0.05）。穿刺取精来源精子男女出生性别比为90.2∶100（37∶41）,不同来源精子行ICSI治疗出生子代性别比差异无统计学意义（P>0.05）,睾丸穿刺来源精子子代出生性别比略高于附睾穿刺来源精子子代出生性别比。logistic回归分析显示移植胚胎期别是影响出生性别比的独立危险因素。结论　囊胚移植出生性别比高于卵裂期胚胎出生性别比,移植IVF受精胚胎出生性别比高于移植ICSI受精胚胎出生性别比。胚胎期别是影响出生性别比的独立危险因素。     

缢死血液生化学变化的实验研究

研究缢死的血液生化学变化,探讨血气分析和K+、Cl-的检验对鉴定缢死的法医学意义。将家兔用缢颈的方法处死,进行血气分析和K+、Cl-的测定。缢死家兔血中pH值下降(P<0.005),Pco2增高(P<0.01),Po2降低(P<0.05),O2SAT下降(P<0.001),Hco3-增加(P<0.005),Tco2增加(P<0.05),BE变化不明显。静脉血中K+浓度明显增高(P<0.01),Cl-浓度变化不明显(P>0.05)。缢死家兔血气分析和K+浓度发生明显变化,检验血气分析和K+、Cl-浓度对鉴定缢死具有法医学意义。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中染料木素及其葡萄糖醛酸代谢物

目的建立液相色谱-串联质谱联用法测定人血浆中染料木素(雌激素类药物)及其葡萄糖醛酸代谢物(GGS)并研究其在健康人体中的药代动力学。方法10例健康受试者空腹口服染料木素50 mg,血浆加入内标物地塞米松后,经液-液萃取,色谱柱为Capcell Pak C8(2 mm×150 mm,5μm),流动相为:甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵-乙腈(70∶20∶10),以ESI源正离子MRM模式测定染料木素的血药浓度,GGS先酶解为原形后间接测定,用DAS 2.0程序计算药代动力学参数。结果线性范围为0.3~500.0μg.L-1(γ=0.9983),回收率在92.9%~104.9%,绝对回收率在74.2%~89.2%,日内、日间变异(RSD)均<15%。染料木素和GGS的主要药代动力学参数:tmax分别为(5.0±1.3),(6.0±2.4)h,Cmax分别为(10.1±6.3),(218.7±68.6)μg.L-1,AUC0-t分别为(31.2±10.3),(3344.0±1635.0)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(33.9±11.4),(3703.0±2031.0)μg.h.L-1。结论测定方法灵敏、准确...