HPLC法测定格列美脲中间体的有关物质

目的:建立HPLC法测定格列美脲原料药中间体的有关物质。方法:采用五氟苯基键合硅胶(150 mm×4.6 mm, 2.7μm)色谱柱,以磷酸二氢铵缓冲溶液-乙腈为流动相,等度洗脱,流速0.5 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长225 nm。结果:格列美脲中间体与4个已知杂质A～D色谱峰均能良好分离,并分别在0.008～6.024μg·mL^-1(r=0.999 9)、0.005～6.013μg·mL^-1(r=0.999 6)、0.011～5.987μg·mL^-1(r=0.999 8)、0.012～6.045μg·mL^-1(r=0.999 8)、0.029～5.989μg·mL^-1(r=0.999 6)范围内线性关系良好(n=6)。格列美脲中间体、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D的定量限分别为8.3、5.0、10.6、11.9、29.4 ng·mL^-1;杂质A～D平均回收率(n=9)分别为107.0%、100.0%、98.0%、101....     

HPLC-ELSD法同时测定棕榈酸帕利哌酮注射剂中聚山梨酯20和聚乙二醇4000的含量

目的:建立HPLC-ELSD法同时测定棕榈酸帕利哌酮注射液中聚山梨酯(polysorbate, Tween)20和聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)4000的含量。方法:采用TSK gel 3000 PWxl (7.8 mm×300 mm)色谱柱,以20 mmol·L^-1的乙酸铵水溶液-乙腈(60∶40)为流动相,流速为0.6 mL·min^-1,柱温25℃,进样量20μL;采用蒸发光散射检测器(ELSD),雾化器温度与漂移管温度均为50℃,气体流速2.0 L·min^-1(0℃,1atm)。结果:PEG4000在0.3～0.75 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 4;Tween 20在0.12～0.3 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 6;PEG4000的检测限为0.02 mg·mL^-1,定量限为0.03 mg·mL^-1;Tween 20的检测限为0.05 mg·mL^-...     

HPLC法检测依折麦布中的有关物质

目的:建立采用高效液相色谱法测定依折麦布有关物质。方法:采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5.0μm)色谱柱,以0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-乙腈-四氢呋喃(60∶20∶20)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长232 nm,进样体积20μL。结果:依折麦布峰与各杂质峰分离良好;依折麦布峰与杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E与杂质F的线性范围分别为0.409～4.090μg·mL^-1(r=0.995 0)、0.402～4.020μg·mL^-1(r=0.998 1)、0.408～4.080μg·mL^-1(r=0.999 1)、0.411～4.110μg·mL^-1(r=0.999 3)、0.4050～4.050μg·mL^-1(r=0.998 1)、0.541～5.41μg·mL^-1(r=0.998 5)、0.657～6.57μg...     

HPLC法同时测定乙肝扶正胶囊中丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量

目的:建立同时测定乙肝扶正胶囊中丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A含量的高效液相色谱法。方法:采用Agilent ZORBAX-SB C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相，梯度洗脱，检测波长为270 nm。结果:丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A分别在7.82～313.01μg·mL^-1(r²=0.999 8)、0.087～17.324μg·mL^-1(r²=1.000 0)、0.067～13.468μg·mL^-1(r²=1.000 0)范围内线性关系良好，平均回收率分别为103.99%、97.76%、100.88%,RSD均≤1.00%。测定样品83批次，丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮IIA的含量分别为0.16～4.06、0.00～103.53、0.00～126.49μg·粒^-1。结论:本方法为提升乙肝扶正胶囊的质量控制手段提供了理论依...     

HPLC法同时测定五维赖氨酸口服溶液中4种水溶性主成分的含量

目的:建立直接同时测定五维赖氨酸口服溶液中盐酸赖氨酸和三种水溶性维生素含量的RP-HPLC法。方法:采用Phenomenex Gemini C₁₈ 100A(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱，以0.03 mol·L^-1磷酸二氢铵溶液(pH 3.0)-甲醇(98∶2)为流动相，检测波长为205 nm,流速1.0 mL·min^-1。结果:盐酸赖氨酸、维生素C、维生素B₆和烟酰胺分别在30.56～488.9μg·mL^-1(r=1.000 0)、24.86～397.8μg·mL^-1(r=0.999 8)、1.018～16.29μg·mL^-1(r=1.000 0)、10.72～171.5μg·mL^-1(r=0.999 0)范围内与峰面积呈良好的线性关系；定量限分别为10.39、0.466 1、0.092 79、0.136 2 ng;平均回收率分别为100.6%、98.5%、98.0%、99.2%,RSD分别为0...     

UPLC-MS/MS同时测定乳核内消液中的贝母素甲、贝母素乙、西贝母碱和湖贝甲素

目的 采用超高效液相色谱-串联质谱法同时测定乳核内消液中贝母素甲、贝母素乙、西贝母碱、湖贝甲素的含量。方法 经超声离心后,采用YMC-Triart C₁₈色谱柱(150 mm×2.1mm, 3μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温35℃;质谱采用ESI⁺离子源,多反应监测模式检测。结果 贝母素甲、贝母素乙、西贝母碱、湖贝甲素等的线性范围分别为0.119～23.72μg·mL^-1(r=0.9958)、0.120～23.94μg·mL^-1(r=0.9951)、0.105～20.93μg·mL^-1(r=0.9942)、0.109～21.72μg·mL^-1(r=0.9900),平均回收率(n=6)分别为99.4%(RSD=2.00%)、98.3%(RSD=2.20%)、100.9%(RSD=1.90%)、98.7%(RSD=2.50%)。结论 所用方法同时测定了乳核内消液中4种生物碱成分的含量,方...     

高效液相色谱法测定曲伏噻吗滴眼液中曲伏前列素有关物质含量

目的 建立高效液相色谱法测定曲伏噻吗滴眼液中曲伏前列素有关物质的含量。方法 采用Phenomenex LUNA苯基己基色谱柱(3.0 mm×150 mm, 3μm)色谱柱;流动相A为20 mmol·L^-1庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调pH值至2.5),流动相B为甲醇,流动相C为乙腈,洗脱梯度;检测波长220 nm;柱温40℃;流速0.5 mL·min^-1。结果 在该色谱条件下,曲伏前列素与各杂质均可良好分离;曲伏前列素、曲伏前列素杂质A、曲伏前列素15-表非对映异构体、曲伏前列素5,6-反式杂质异构体、曲伏前列素15-酮衍生物分别在0.02～219.29μg·mL^-1(r=1.000 0),0.02～3.10μg·mL^-1(r=0.999 9),0.02～3.87μg·mL^-1(r=1.000 0),0.02～4.37μg·mL^-1(r=1.000 0),0.02～3.98μg·mL^-1(r=0.999 9)浓度范围内与峰面积呈良好线性关系...     

气相色谱法测定聚乙二醇单甲醚中2-甲氧基乙醇的残留量

目的:建立直接进样气相色谱法测定聚乙二醇单甲醚中2-甲氧基乙醇残留量的分析方法，为聚乙二醇单甲醚的质量控制提供参考依据。方法:采用Agilent DB-WAX(30 m×0.53 mm, 1.0μm)气相色谱柱，起始柱温40℃,保持5 min,以10℃·min^-1的速率升温至200℃,保持10 min。进样口温度200℃,氢火焰离子化检测器温度为250℃。样品以水溶解，液体进样。结果:2-甲氧基乙醇在0.5～2.0μg·mL^-1浓度范围内线性良好(r=0.995 7),平均回收率为(105.0±3.9)%(RSD=4%),检测限为0.3μg·mL^-1,定量限为0.5μg·mL^-1。2-甲氧基乙醇对照品水溶液在5 d内稳定。结论:本方法操作简便、环保，具有良好的系统适用性、线性、稳定性、精密度和准确度，可用于聚乙二醇单甲醚中2-甲氧基乙醇残留量的测定。     

HPLC法测定马来酸噻吗洛尔滴眼液中的对映异构体

目的:建立马来酸噻吗洛尔滴眼液对映异构体含量的HPLC测定方法。方法:应用手性液相色谱法,采用InfinityLabPoroshell 120 Chiral-T柱色谱柱(100 mm×4.6 mm, 2.7μm),对左旋噻吗洛尔进行定量分析,以甲酸铵溶液(取甲酸铵1.26 g,加水900 mL使溶解,甲酸调pH至3.5,加水至1 000 mL)-无水乙醇(8∶92)为流动相,流速为0.5 mL·min^-1;柱温为30℃;检测波长为297 nm。结果:在此色谱条件下,测定的2批原料所制的6批样品含量分别为1.1%、1.1%、1.2%、0.053%、0.053%及0.057%;噻吗洛尔峰与对映异构体峰分离度良好(R>2.0),噻吗洛尔在质量浓度0.5～15.3μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=1.000),对映异构体在质量浓度0.7～15.4μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.999 7),噻吗洛尔、对映异构体的定量限分别为0.5和0.6μg·mL^-1;12份供试品对映异构体含量...     

固相萃取-高效液相色谱法测定泻痢固肠片中芍药苷、甘草苷、橙皮苷的含量

目的建立固相萃取-高效液相色谱同时测定泻痢固肠片中芍药苷、甘草苷、橙皮苷含量的方法。方法采用固相萃取对泻痢固肠片中的有效成分进行净化、富集,用高效液相色谱法测定含量。色谱柱为Kromasil C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相乙腈-0.1%磷酸溶液（24∶76）,检测波长230、284 nm,柱温25℃,进样量20μL,流速1 mL·min^-1。结果芍药苷、甘草苷、橙皮苷分别在3.998¹99.9μg·mL^-1（r=1.000）、0.6356³1.78μg·mL^-1（r=0.9999）、0.4940²4.70μg·mL^-1（r=0.9998）线性关系良好,平均回收率（n=6）分别为98.6%、97.0%、98.0%,RSD分别为0.34%、0.63%、0.62%。结论该方法操作简单,结果准确,可用于泻痢固肠片中芍药苷、甘草苷、橙皮苷有效成分的含量测定。     

尿激酶中分子组分比2种测定方法的建立和比较研究

目的:建立尿激酶中分子组分比测定的分子排阻色谱法与十二烷基硫酸钠毛细管电泳法,并对2种方法的方法学验证与样品测定结果比较。方法:分子排阻色谱法采用TSKgel G2000SWXL色谱柱(7.8mm×300 mm,5μm),以0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠缓冲液(pH 3.0)为流动相,流速0.5 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长280 nm,进样量50μL;十二烷基硫酸钠毛细管电泳法采用未涂层熔融石英毛细管(50μm×30.2cm,有效长度20.2 cm),分离电压为15 kV,柱温25℃,检测波长214 nm,进样端为正极,5 kV压力进样20 s。结果:通过对分子排阻色谱法与十二烷基硫酸钠毛细管电泳法的方法学验证与样品测定结果的比较,证明两种方法测定结果基本一致。分子排阻色谱法:高分子量与低分子量尿激酶质量浓度在0.05~5.1mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系;检测下限分别为1.5μg·mL^-1与5.1μg·mL^-1,定量下限分别为5.1μg·mL^-1与16.9μg·m L^-1;8批样品中高分子量与低分子量尿激酶相对含量范围分别为87.0%~96.4%与3.6%~13.0%。十二烷基硫酸钠毛细管电泳法:高分子量与低分子量尿激酶质量浓度在0.1~5.2 mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系;检测下限分别为2.5μg·mL^-1与51.8μg·mL^-1,定量下限分别为7.5μg·mL^-1与155.4μg·m L^-1;8批样品中高分子量与低分子量尿激酶相对含量范围分别为88.2%~97.3%与2.7%~11.8%。结论:分子排阻色谱法与十二烷基硫酸钠毛细管电泳法都适用于尿激酶中分子组分比的测定并互为补充。     

HPLC法测定妇康丸中大黄素等6个成分的含量

目的:建立同时测定妇康丸中橙皮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的HPLC方法.方法:采用依利特C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;柱温:30℃;检测波长:283 nm,进样量:10μL.结果:在优...     

HPLC法同时测定人血浆和尿液中三氟柳及其活性代谢物HTB

目的:采用HPLC法测定三氟柳(TFL)及其活性代谢产物HTB的血药浓度、尿药浓度。方法:采用岛津公司2010型HPLC仪,紫外检测波长为234 nm,萘普生作内标。色谱柱为YMC C₁₈(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(75∶25∶0.1),流速0.78 mL·min^-1,柱温30℃。血浆和尿液样本酸化后200~5μg·mL^-1,尿液标准曲线范围分别为200~5、40~1μg·mL^-1,其线性、准确度、精密度、定量下限、提取回收率、特异性、稳定性等指标均符合NMPA的指导原则要求。12例受试者单次口服TFL胶囊(含TFL 600mg)后,用所建方法检测了经时血药浓度和尿药浓度,结果可靠。结论:本法稳定可靠,可用于TFL、HTB的血药、尿药浓度测定和体内药代动力学研究。     

HPLC法测定扎来普隆分散片的含量及有关物质

目的:建立HPLC法测定扎来普隆分散片的含量及有关物质.方法:采用Agilent TC-C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.004 mol·L-1醋酸铵溶液(用醋酸调pH至4.0)(38:62),流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长339 nm.结果:在选定的色...     

肉苁蓉与沙苁蓉中6种苯乙醇苷类成分的UPLC含量测定及化学计量学评价

目的:建立肉苁蓉、管花肉苁蓉及沙苁蓉中松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、金石蚕苷和2′-乙酰金石蚕苷的UPLC含量测定方法,并比较其含量的异同。方法:采用Waters HSS T3(100mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,检测波长330nm,柱温30℃,进样量1μL。获得数据进行化学计量学评价,并对6个成分的含量测定进行方法学考察。结果:在上述条件下,6个成分均获得良好的分离,其线性范围分别为30.80~1232、0.7980~31.91、3.310~132.4、0.933~37.32、59.02~885.3、35.73~536.0μg·mL^-1,线性关系良好(r≥0.9999);平均加样回收率(n=6)分别为98.5%、97.3%、98.7%、99.3%、99.7%和98.4%;精密度、重复性和稳定性的RSD均<4.0%。金石蚕苷、2′-乙酰金石蚕苷为沙苁蓉特有成分,毛蕊花糖苷为肉苁蓉、管花肉苁蓉及沙苁蓉共有成分但种间差异大,沙苁蓉所含苯乙醇苷的种类和含量与肉苁蓉及管花肉苁蓉均有较大的差异;主成分分析可将正品肉苁蓉与伪品沙苁蓉明显区分开。结论:该方法简便,准确,重复性好,可为肉苁蓉、管花肉苁蓉及沙苁蓉的质量评价及种间鉴别提供参考依据。     

复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶含量测定方法的改进

目的:改进复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent 5 TC-C18(2)(4.6×250 mm,5μm),流动相为6.8 g·L-1的磷酸二氢钾溶液(用5 mol·L-1氢氧化钾溶液调节pH值至5.7±0.1):甲醇(95:5),检测波长为265 nm.结果:氟尿嘧...     

HPLC法测定苯丙氨酯原料药及片剂的含量和有关物质

目的:建立反相高效液相色谱法测定苯丙氨酯及其片剂的有关物质和含量。方法:采用Phenomenex Luna C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(60∶40)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为259 nm,柱温为40℃,进样量为20μL。结果:有关物质线性范围为0.51~30.24μg·mL^-1,r=0.9999,检出限为4 ng,精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤0.8%;含量测定线性范围为12.60~100.82μg·mL^-1,r=0.9999;苯丙氨酯片的平均回收率为99.7%,RSD=0.6%(n=9);原料含量测定结果为99.3%~99.8%;片剂含量测定结果为99.0%~103.6%。结论:本法简便、准确、专属性好、灵敏度高,可用于苯丙氨酯及其片剂的质量控制。     

防己饮片中生物碱成分的含量测定方法研究

目的:建立高效液相色谱法同时测定防己中木兰花碱、汉防己丙素、防己诺林碱和粉防己碱含量的方法.方法:采用Diamonsil Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.3％磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长282 nm,柱温30.0℃.结果:木兰花碱、汉防己丙素...     

HPLC法同时测定复方金刚烷胺氨基比林片中氨基比林和马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度

目的:建立同时测定复方金刚烷胺氨基比林片中氨基比林和马来酸氯苯那敏含量的高效液相色谱(HPLC)法,并考察马来酸氯苯那敏的含量均匀度。方法:色谱柱采用XBridge C 18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.05 mol·L^-1磷酸二氢钠-乙腈(80∶20)(用磷酸调pH值至2.5),流速为1.0 mL·min^-1,柱温为40℃,检测波长为262 nm,进样量为20μL。结果:复方金刚烷胺氨基比林片中的氨基比林和马来酸氯苯那敏的分离度均符合要求,质量浓度线性范围分别为36~96μg·mL^-1(r=0.9999),12~32μg·mL^-1(r=0.9998);平均加样回收率分别为99.92%、100.70%,RSD分别为0.89%、0.84%(n=9)。按拟定的方法,分别对3个批次的样品进行含量测定,计算含量,氨基比林的含量分别为104.4%、104.2%、99.5%;马来酸氯苯那敏的含量分别为98.8%、102.8%、101.5%。结论:该方法简便、快捷、准确,适用于复方金刚烷胺氨基比林片中氨基比林和马来酸氯苯那敏的含量测定以及马来酸氯苯那敏含量均匀度的测定,有利于质量控制。     

服用盐酸甲氯芬酯后人血浆中二甲氨基乙醇浓度的检测

目的:建立高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中二甲氨基乙醇(DMAE)浓度的方法。方法:采用API 3000型LC-MS/MS液质联用仪,Phenomenex Ultimate C₁₈色谱柱(50 mm×3.0 mm,5μm),流动相为甲醇-水(80∶20)(含0.1%甲酸),流速0.3 mL·min^-1。样品在碱性条件下用乙酸乙酯漩涡萃取,定量转移出乙酸乙酯层后再用0.1%的甲酸水溶液反萃,最后取酸性水溶液进样。以MRM模式检测,外标法定量。结果:DMAE的保留时间为2.79 min,在3.125~500 ng·mL^-1浓度范围内线性关系良好,定量下限为3.125 ng·mL^-1,日内、日间RSD分别小于4.8%和6.0%,方法回收率为98.7%~101.9%,萃取回收率为32.5%~34.5%。21位健康受试者交叉服用2种胶囊制剂,在单次口服300 mg盐酸甲氯酚酯后,采用本方法测定血浆中DMAE经时浓度,比较2种制剂的药代动力学参数并评价其相对生物利用度。试验制剂和参比制剂的C_{max分别为(277.66±107.25}、(266.18±118.37)μg·L^-1,AUC0-t分别为(721.05±172.72)、(736.03±216.90)h·μg·L^-1,AUC_0-∞分别为(776.17±203.89)、(835.52±269.99)h·μg·L^-1,2种制剂生物等效。结论:本法具有快速、简便、灵敏、准确等特点,适用于血浆中DMAE的浓度测定及药代动力学、生物利用度研究。