复方鱼腥草合剂中3个有效成分及防腐剂的含量测定

目的 考察市售复方鱼腥草合剂的质量。方法 收集10批不同厂家生产的复方鱼腥草合剂,应用HPLC测定3个有效成分（绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷）及防腐剂（苯甲酸钠、羟苯乙酯）含量。结果 10批复方鱼腥草合剂中绿原酸的含量为29.74~84.13μg·mL^-1、连翘酯苷A的含量为22.69~113.44 μg·mL^-1、黄芩苷的含量为0.587~1.662 mg·mL^-1;苯甲酸钠和羟苯乙酯含量均符合标准规定。结论 复方鱼腥草合剂质量情况较乐观,但是不同批次内在质量有较大差异,现行标准的质量控制方法较简单,不能有效控制其质量,建议修订完善标准。     

川菊止痛胶囊的质量标准研究

目的 建立川菊止痛胶囊质量标准。方法 采用薄层色谱法对复方中柴胡、菊花进行定性鉴别。HPLC同时测定制剂中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素及甘草苷含量,色谱柱：Kromasil 100-5C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长为280 nm;流速：1.0 mL·min^-1;进样量：10 μL。结果 薄层色谱斑点清晰且阴性样品无干扰。甘草苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷及汉黄芩素分别在10.7~107 μg·mL^-1、12.12~121.2 μg·mL^-1、11.2~112 μg·mL^-1、10.02~100.2 μg·mL^-1、10.32~103.2 μg·mL^-1内线性关系良好,精密度、重复性、稳定性试验RSD均<1.8%,加样回收率分别为98.34%~101.77%（RSD=1.28%,n=6）、98.69%~101.36%（RSD=1.01%,n=6）、98.46%~101.06%（RSD=0.92%,n=6）、98.67%~101.33%（RSD=1.17%,n=6）、98.43%~100.79%（RSD=0.92%,n=6）。结论 本研究建立的质量标准方法准确、简便,可用于川菊止痛胶囊的质量控制,且所建立的菊花、柴胡薄层鉴别方法可供其他含有二药的复方标准建立作参考。     

基于HPLC指纹图谱和化学计量学的不同产地雪菊质量评价

目的 建立雪菊HPLC指纹图谱，结合化学计量学，测定4种成分含量，评价不同产地雪菊质量。方法 采用依利特SinoChrom ODS-BP C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱；流速为0.6 mL·min^-1；检测波长为295 nm；柱温为30℃；建立不同产地雪菊指纹图谱，进行相似度评价、聚类分析、主成分分析、偏最小二乘法-判别分析，结合变量重要性投影值筛选指认主要差异成分，进行含量测定。结果 12批雪菊指纹图谱含21个共有峰，所有样品与对照图谱相似度均≥0.942；经聚类分析和主成分分析，12批雪菊聚为3类；偏最小二乘法-判别分析结果与聚类分析一致，变量重要性投影值筛选的4个主要差异成分含量分别为马里苷40.05~61.25 mg·g^–1，黄诺马苷7.44~19.82 mg·g^–1，芦丁0.85~2.03 mg·g^–1，绿原酸2.56~9.73 mg·g^–1。结论 建立的指纹图谱分析与含量测定方法可靠、重复性好，为雪菊的整体质量评价提供了参考。     

清火退热口服液的特征图谱及5种成分的含量测定

目的 采用HPLC建立清火退热口服液的特征图谱,并同时测定5种成分的含量。方法 以绿原酸、葛根素、连翘酯苷B、连翘酯苷A和黄芩苷为对照品;采用CAPCELL PAKC₁₈ MGⅡ S5（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,流动相为甲醇-0.5%磷酸水溶液,线性梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长305 nm,柱温30℃。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对结果进行分析。结果 绿原酸、葛根素、连翘酯苷B、连翘酯苷A和黄芩苷分别在3.06~61.16,6.51~130.22,4.68~93.55,3.43~68.56,14.61~292.28 μg·mL^-1内呈良好的线性关系,相关系数均≥0.999 9;平均加样回收率分别为98.81%,98.32%,95.99%,98.59%,97.26%。结论 所建立的特征图谱相关性强,可结合5种成分含量测定全面控制清火退热口服液的质量。     

芩珠凉血合剂的质量标准

摘 要 目的：建立芩珠凉血合剂的质量标准。方法: 采用TLC法对处方中的黄芩、甘草和薏苡仁进行定性鉴别,采用HPLC法测定制剂中黄芩苷和甘草酸的含量。结果: TLC能够特异性的鉴别黄芩、甘草和薏苡仁,黄芩苷在0.030~0.971 mg·mL^-1范围内,线性关系良好,r=1.000 0,平均回收率是97.74%,RSD是2.76%（n=9）;甘草酸铵在0.013~0.220 mg·mL^-1范围内,线性关系良好,r=1.000 0,平均回收率是99.02%,RSD是1.79%（n=9）。结论:该法专属性强,简便,准确,可作为控制芩珠凉血合剂的方法。     

衢枳壳不同组分体外降糖活性研究及4种黄酮组分含量分析

目的 研究衢枳壳不同极性组分体外降糖活性,并明确各组分中4种黄酮类化合物的含量。方法 采用系统溶剂法提取与分离衢枳壳中不同极性的黄酮组分,通过体外试验明确各组分对α-葡萄糖苷酶活性和HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。采用Agilent Zorbax SB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.02%磷酸水溶液（20︰80）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长280 nm,柱温35℃,外标法测定衢枳壳各组分中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量。结果 衢枳壳各组分均具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,抑制强弱顺序为正丁醇组分[IC₅₀：（0.033±0.010） mg·mL^-1] > 甲醇组分[IC₅₀：（0.092±0.006） mg·mL^-1] > 乙酸乙酯组分[IC₅₀：（0.170±0.014） mg·mL^-1] > 氯仿组分[IC₅₀：（0.509±0.070） mg·mL^-1];衢枳壳甲醇组分和正丁醇组分能够显著促进HepG2细胞葡萄糖的消耗,差异具有统计学意义（P<0.05）。含量测定方法经方法学认证,各项参数均符合要求。经分析发现：衢枳壳各组分中均含有芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷等黄酮类化合物,且正丁醇组分中各黄酮成分含量最高。结论 衢枳壳各组分均具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,且随着各组分中黄酮类化合物含量增高作用增强。同时,含有较高黄酮类组分含量的衢枳壳组分具有促进HepG2细胞葡萄糖消耗的作用,如甲醇、正丁醇和乙酸乙酯组分。     

双香退热口服液GC指纹图谱分析及4种指标成分含量测定

目的 建立双香退热口服液指纹图谱方法,并同时进行4种指标成分含量测定。方法 采用HP-5弹性石英毛细管柱（30 m×0.32 mm,0.25 μm）;柱升温程序：起始温度110℃,保持10 min,25℃·min^-1的速度升温至230℃,保持9.2 min;进样口温度220℃;FID检测器温度220℃;载气：高纯N₂（>99.99%）;柱流量1.0 mL×min^-1;分流比10：1;进样量1 μL。结果 建立了双香退热口服液GC指纹图谱方法,10批成品中检测到的色谱峰为13个,其中1,2,3,4号峰来源于香薷药材,5,6,7,8号峰来源于厚朴药材,9~13号峰在香薷和厚朴药材及其阴性中均有出现,初步推测此类成分为香薷和厚朴两药材共有成分。以对照品与样品出峰时间比对,标定1号峰为麝香草酚、2号峰为香荆芥酚、7号峰为厚朴酚、8号峰为和厚朴酚,4种指标成分线性范围分别为0.226~2.260 mg·mL^-1,0.105 5~1.055 0 mg·mL^-1,0.082 8~0.828 0 mg·mL^-1,0.072 0~0.720 0 mg·mL^-1。平均加样回收率分别为100.1%~103.5%,100.2%~104.4%,99.4%~100.7%,96.3%~99.27%;RSD分别为2.8%,2.1%,2.4%,2.1%。结论 本法稳定、合理、可行,为该复方中药质量评价提供科学依据。     

HPLC测定盐酸达泊西汀片中的异构体

目的 建立盐酸达泊西汀片剂中异构体的HPLC检测方法。方法 采用DAICEL CHIRALPAK OZ-H色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温：40℃,检测波长：293 nm,流速：1.0 mL·min^-1,流动相：正己烷-异丙醇-二乙胺（80：20：0.05）。结果 盐酸达泊西汀及其异构体在0.01~0.50 mg·mL^-1内具有良好的线性关系（r=0.999 9）,盐酸达泊西汀定量限为0.002 mg·mL^-1（相当于0.02%）,最低检测限为0.001 mg·mL^-1（相当于0.01%）;异构体定量限浓度为0.001 mg·mL^-1（相当于0.01%）,最低检测限为0.000 5 mg·mL^-1（相当于0.005%）。结论 该方法操作简便,结果准确,可用于盐酸达泊西汀片剂中异构体的含量测定。     

HPLC同时测定复方鱼腥草片中4个有效成分的含量

目的 建立HPLC同时测定复方鱼腥草片中绿原酸、连翘酯苷A、槲皮苷和黄芩苷含量的方法。方法 采用CAPCELL PAK MG（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）,梯度洗脱（0~12 min,9% A;12~15 min,9%→15% A;15~32 min,15% A;32~48 min,15%→29% A;48~60 min,29% A）,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长：330 nm。结果 绿原酸、槲皮苷浓度在2~100 μg·mL^-1内,连翘酯苷A浓度在4~200 μg·mL^-1内,黄芩苷浓度在12~600 μg·mL^-1内,与峰面积均呈良好的线性关系（r=0.999 9）;平均回收率（n=6）分别为98.0%,99.8%,99.1%和98.3%,RSD均<2.0%。结论 建立的HPLC可实现同时测定绿原酸、连翘酯苷A、槲皮苷和黄芩苷4种有效成分,方法快速、简便、结果准确,可为复方鱼腥草片提供更全面、可靠的质量控制方法。     

健胃合剂质量控制方法研究

目的 建立健胃合剂质量控制的方法。方法 采用薄层色谱法对甘草、黄连和麸炒枳壳进行定性鉴别;采用HPLC测定柚皮苷含量。色谱柱为Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.2%磷酸（40：60）,检测波长为283 nm,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30℃,进样量为5 μL。结果 建立的薄层色谱法样品斑点清晰,分离度好。含量测定结果显示,柚皮苷在0.005 33~0.085 23 mg·mL^-1内线性关系良好,平均回收率为99.42%,RSD为0.76%。结论 该方法准确可靠,专属性好,可以用于健胃合剂的质量控制。     

HPLC测定人血浆中吡非尼酮浓度的不确定度评定

目的 建立HPLC测定人血浆中吡非尼酮浓度的不确定度分析方法。方法 分析HPLC测定吡非尼酮浓度的全过程,分析测量不确定度的来源和大小,量化各个测量不确定度分量,合成标准测量不确定度并报告扩展测量不确定度。结果 人血浆中低浓度（0.511 0 mg·mL^-1）、中浓度（2.038 mg·mL^-1）和高浓度（19.95 mg·mL^-1）的扩展不确定度分别为0.105 1,0.137 6,1.069 mg·mL^-1（P=95%）。结论 本方法不确定度来自标准曲线的拟合,其适用于HPLC测定人血浆吡非尼酮的不确定度评定。     

仿生提取-高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱技术测定冰硼散及朱砂药材中可溶性汞的含量

目的： 建立仿生提取-高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱技术测定冰硼散及朱砂药材中可溶性汞含量的分析方法，可用于研究冰硼散及朱砂药材的用药安全性。方法： 通过模拟人体胃肠道环境，采用人工胃液提取冰硼散及朱砂中的可溶性汞，结合高效液相色谱（以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；8%甲醇-0.06 mol·L^-1乙酸铵-0.05% 2-巯基乙醇的水溶液为流动相；流速0.4 mL·min^-1；进样体积20 μL）-电感耦合等离子体质谱技术进行分析测定。结果： 通过检测15批冰硼散样品及9批朱砂药材，结果甲基汞、乙基汞、无机汞分别在0.0007~0.28、0.007~1.4、0.17~34 ng·mL^-1范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，r值分别为0.9997、0.9995、0.9998，平均回收率分别为96.8%、99.7%、98.0%，RSD分别为2.3%、2.8%、5.5%（n=6）。冰硼散中甲基汞含量为0.00046~0.018 mg·kg^-1，无机汞含量为0.64~4.73 mg·kg^-1，乙基汞含量为0.075~0.096 mg·kg^-1；朱砂中甲基汞含量为0~0.034 mg·kg^-1，无机汞含量为8.54~101.07 mg·kg^-1，乙基汞含量为0~0.82 mg·kg^-1。结论： 该方法简便、快速、灵敏，重现性好，可用于冰硼散及朱砂药材中可溶性汞的测定。     

番薯藤提取物抗痤疮丙酸杆菌有效部位筛选研究

目的 研究番薯藤提取物对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌作用,并对其有效部位进行筛选。方法 采用固体平板法、试管2倍比稀释法测定番薯藤水、醇提物对痤疮丙酸杆菌的抑菌圈大小和最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,采用系统溶剂法对番薯藤醇提物进行梯度提取,分别得到石油醚层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层5个不同极性部位,并确定其有效部位及相应的MIC、最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）。结果 番薯藤醇提物对痤疮丙酸杆菌有较强抑制作用,其MIC为50 mg·mL^-1。其中石油醚部位的抑菌作用最强,MIC为12.5 mg·mL^-1,MBC为25 mg·mL^-1;其次为正丁醇部位,MIC为25 mg·mL^-1,MBC为100 mg·mL^-1。结论 番薯藤醇提物对痤疮丙酸杆菌存在体外抑制作用,其有效成分主要集中于石油醚和正丁醇部位。     

响应面法优化雪松松针中金丝桃苷的回流提取工艺

目的 优化雪松松针中金丝桃苷的回流提取工艺。方法 采用HPLC测定雪松松针中金丝桃苷的含量;基于单因素试验结果,以金丝桃苷含量为指标,根据Box-Behnken设计对影响回流提取的3个因素（料液比、乙醇浓度、提取时间）进行考察;通过响应面分析优化雪松松针中金丝桃苷的最佳回流提取工艺。结果 优化得到的最佳回流提取工艺参数为乙醇浓度60%、料液比1︰16（g·mL^-1）、回流提取1次,时间为100 min;在此工艺条件下提取得到的金丝桃苷平均含量为0.119 6 mg·g^-1,与预测值0.119 4 mg·g^-1的相对偏差较小。结论 优选得到的雪松松针中金丝桃苷回流提取工艺合理、可行。     

GC法同时测定狗皮膏中樟脑、异龙脑、龙脑的含量

目的: 测定狗皮膏中樟脑、异龙脑及龙脑的含量。方法: 采用气相色谱法,以交联聚乙二醇为固定相的弹性石英毛细管柱,FID检测器。结果: 樟脑线性范围为0.182 1～9.104 0 mg·mL^-1,平均回收率102.2%(RSD为3.3%);异龙脑线性范围为0.031 4～1.570 0 mg·mL^-1,平均回收率101.7%(RSD为3.2%);龙脑线性范围为0.050 8～2.539 5 mg·mL^-1,平均回收率101.1%(RSD为3.4%)。结论: 本法简便、准确,可用于狗皮膏的质量控制。     

青天葵甲醇提取物通过ERK通路抑制人肝癌细胞增殖并诱导其凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 紫外-可见分光光度法测定青天葵中总黄酮和总多酚的含量；MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，1.5，2 mg·mL^-1）NFME处理24 h对SMMC7721、HepG2和LO2细胞生长抑制率的影响；克隆形成试验观察NFME对SMMC7721和HepG2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对SMMC7721细胞凋亡的影响；流式细胞术检测NFME对SMMC7721细胞凋亡和细胞周期的影响；Western blotting测试NFME作用下caspase3、PARP、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 NFME中总多酚含量为（4.25±0.46）mg·g^-1，总黄酮含量为（4.72±0.13）mg·g^-1；MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制SMMC7721和HepG2细胞的增殖（P<0.001）；克隆形成试验表明，0.125 mg·mL^-1的NFME能够抑制SMMC7721和HepG2细胞集落的形成（P<0.001）；Hoechst凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到SMMC7721细胞发生凋亡（P<0.05）；流式细胞试验结果证实0.5 mg·mL^-1的NFME能够诱导SMMC7721细胞的凋亡（P<0.01），凋亡率14.43%，阻滞细胞周期于S期；Western blotting结果表明NFME能使SMMC7721细胞中caspase3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.05），活化的caspase3剪切下游PARP的表达；同时NFME能够降低SMMC7721细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 NFME能抑制人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的活性并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路从而诱导细胞凋亡有关。     

青天葵甲醇提取物通过ERK信号通路诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，2，3 mg·mL^-1）的NFME处理CNE-2细胞24，48 h对CNE-2细胞生长抑制率的影响；克隆原形成试验观察NFME对CNE-2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对CNE-2细胞凋亡的影响；Western blotting测定NFME作用下caspase-3、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞的增殖（P<0.05），抑制率为12.64%。而在给药48 h时0.25 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞增殖（P<0.05），抑制率为22.43%；克隆原形成能力试验表明，0.25 mg·mL^-1的NFME能够抑制CNE-2细胞集落的形成（P<0.05）；Hoechst33258凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到CNE-2细胞发生凋亡（P<0.05），凋亡率达到17.91%；Western blotting结果表明0.5 mg·mL^-1的NFME能使CNE-2细胞中caspase-3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.01），同时0.5 mg·mL^-1的NFME能够降低CNE-2细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 青天葵甲醇提取物能抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。     

金荞麦提取物体外抗流感病毒作用研究

目的 研究金荞麦提取物的体外抗流感病毒作用。方法 采用血凝试验,考察金荞麦提取物对鸡胚内流感病毒增殖的抑制作用;采用MTT法检测细胞活性,考察金荞麦提取物对流感感染细胞活性的影响。结果 与病毒对照组比较,金荞麦提取物高剂量组（10 mg·mL^-1）、中剂量组（5 mg·mL^-1）均能显著降低鸡胚尿囊液的血凝滴度（P<0.01）,而低剂量组（2.5 mg·mL^-1）则无显著性差异;在0.63~2.50 mg·mL^-1浓度内,金荞麦提取物各剂量组流感感染细胞的活性均明显高于病毒对照组,组间均存在显著性差异（P<0.01）,且病毒抑制率随着药物浓度的增大而增高,呈一定的量效关系,其中金荞麦提取物最大无毒浓度（2.5 mg·mL^-1）对流感病毒的直接抑制率达66.12%。结论 金荞麦提取物具有一定的体外抗流感病毒作用。     

仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3和PANC-1增殖的抑制作用研究

目的 研究仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3和PANC-1增殖的抑制作用。方法 SRB法检测不同浓度仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3（仙鹤草水提液浓度：0.15,0.3,0.6,1.2,2.4,4.8 mg·mL^-1）和PANC-1（仙鹤草水提液浓度：0.125,0.25,0.5,1.0,2.0,4.0 mg·mL^-1）分别作用24,48,72 h后的增殖抑制率;流式细胞仪检测0.5,1,2 mg·mL^-1仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3周期分布的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测1,2,4,8 mg·mL^-1仙鹤草水提液对BXPC-3细胞凋亡的影响。结果 仙鹤草水提液可显著抑制BXPC-3和PANC-1细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性;仙鹤草水提液可显著增加BXPC-3细胞停滞在G1期的百分率,促进BXPC-3细胞的早期凋亡和晚期凋亡。结论 仙鹤草水提液可通过或部分通过诱导胰腺癌细胞BXPC-3和PANC-1的凋亡,抑制胰腺癌细胞的增殖,发挥抗胰腺癌作用。     

注射用血栓通和血栓通注射液降压物质及过敏反应方法学研究

目的: 建立注射用血栓通和血栓通注射液"降压物质"和"过敏反应"检查项,提高其临床用药安全。方法:通过对注射用血栓通和血栓通注射液与组胺对照品引起麻醉猫血压下降程度进行比较,以确定降压物质检查法的限值。测定注射用血栓通和血栓通注射液豚鼠腹腔和静脉给药的无毒反应剂量,采用豚鼠过敏试验的方法设定腹腔致敏和静脉过敏激发的剂量限值。结果:降压物质检查中,注射用血栓通和血栓通注射液限值分别为15,7 mg·kg^-1;过敏反应检查中,注射用血栓通和血栓通注射液限值试验浓度分别为5,4 mg·mL^-1,致敏每只用0.5 mL,激发每只用1 mL。结论:为减少本品临床使用的不良反应,建议在其质量标准的[检查]项中增加"降压物质"和"过敏反应"项目。