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1.
2.
陈梦  朱玲燕  黄真  葛宇清  张光霁  程汝滨 《中草药》2019,50(22):5554-5562
目的 建立三斑海马Hippocampus trimaculatus的COI、16 S rRNA和ATP6的条形码序列数据库,应用DNA条形码技术从分子水平快速准确鉴定三斑海马和其他正伪品海马,探讨海马属药材鉴定的新方法。方法 提取三斑海马药材的基因组DNA,PCR扩增COI、16 S rRNA和ATP6的序列并进行双向测序,所得序列采用软件Codon Code Aligner V4.2对测序峰图进行校对拼接,应用ClustalX软件进行序列比对,MAGA5.0软件计算三斑海马的种内种间遗传距离(Kimura2-Parameter,K2P),构建邻接树(Neighbor-joingtree,NJTree)聚类分析不同品种海马药材的鉴定结果。结果 获得的三斑海马线粒体COI、16 S rRNA、ATP6序列长度分别649、572、603~605 bp,其中3个条形码序列的种内变异位点碱基数分别为8、4和15,种内的变异率较小,COI、16 S r RNA、ATP6序列的平均种内K2P遗传距离0.002、0.001和0.006,均远小于三斑海马的种间K2P距离;NJ树结果显示三斑海马与其他海马均可明显区分,具有良好的单系性。结论 COI、16 S r RNA、ATP6序列作为条形码均可以鉴定三斑海马及其他混伪品海马药材,为动物类药材及其混伪品和近源物种的分子鉴定提供依据,为对保障海马临床用药安全提供了新的技术手段。  相似文献   
3.
目的:探讨马尾松松针提取物(PNE)对大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤的保护作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、依达拉奉组、PNE小剂量组(200?mg/kg)、PNE中剂量组(400?mg/kg)、PNE大剂量组(800?mg/kg), 于造模前连续7?d及造模后6?h分别灌胃给药。其中,手术对照组和模型对照组灌胃给予等渗氯化钠溶液,依达拉奉组灌胃给予等渗氯化钠溶液的同时腹腔注射依达拉奉3?mg/kg,PNE各组灌胃给予各剂量PNE。通过大脑中动脉阻塞法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型,于再灌注24?h后测定各组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积。采用苏木素-伊红染色观察大脑皮层及海马组织结构病理变化并统计正常神经细胞数;TUNEL法检测大脑皮层神经细胞凋亡率;试剂盒检测缺血侧脑组织一氧化氮、丙二醛含量与超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白质印迹法检测大脑皮层c-Jun氨基末端激酶(JNK)3、磷酸化JNK3、B淋巴细胞瘤蛋白(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C、胱天蛋白酶(caspase)-3的蛋白表达水平。结果:与模型对照组比较,PNE各剂量组行为学评分、脑组织含水量及脑梗死体积均显著降低(均P<0.05),大脑皮层及海马CA1区组织病理性损伤显著减轻,缺血侧皮层及海马CA1区中正常神经细胞数增加(均P<0.05),以PNE中剂量组效果最好。与模型对照组比较,PNE中剂量组皮层神经细胞凋亡率显著减小,大脑皮层组织中一氧化氮、丙二醛含量显著减少,SOD活性显著升高,磷酸化JNK3/JNK3比值、细胞色素C、caspase-3蛋白表达水平均显著降低,Bcl-2/Bax比值显著升高(均P<0.05)。结论:PNE对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,这种保护作用可能与清除一氧化氮和丙二醛,抑制氧化应激介导的JNK3/caspase-3信号转导来抑制神经细胞凋亡有关。  相似文献   
4.
正交试验法优化畲药山里黄根多糖的提取工艺   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:优选山里黄根多糖的提取工艺。方法:设计单因素试验和正交试验,以多糖含量为指标,采用苯酚-硫酸法,比较影响多糖含量主要因素的主次关系,优化提取条件,确定最佳提取工艺。结果:影响山里黄根多糖提取率的主次因素为:料液比>提取次数>提取温度>提取时间;山里黄根多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度100℃、提取时间100 min、料液比1∶10(g/m L)、提取次数3次,在此条件下,多糖提取率可达72.49 mg/g。结论:优选的山里黄根多糖提取工艺提取率较高,且方法稳定可行。  相似文献   
5.
葛宇清  程汝滨  杨波  黄真  陈喆 《中国中药杂志》2015,40(12):2389-2395
隐丹参酮是丹参中主要的脂溶性活性化合物之一,对白血病等多种恶性肿瘤有显著的抑制作用,并可有效提高伊马替尼的化疗效果,但其发挥功能的分子机制仍未阐明.该文利用白血病细胞K562及其伊马替尼耐药株K562-R,系统研究了隐丹参酮对细胞伊马替尼的敏感性和P-糖蛋白表达的影响.利用MTT法检测隐丹参酮对伊马替尼增殖抑制功能的影响,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western blot检测细胞凋亡调控蛋白Caspase-3,Caspase-9,PARP的活性变化情况;梯度浓度的隐丹参酮处理细胞后,Western blot和流式细胞仪检测细胞中P-糖蛋白的表达水平变化,高效液相色谱法检测伊马替尼的胞内药物浓度的变化.结果隐丹参酮预处理后,显著增强了伊马替尼对K562和K562-R细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,细胞的促凋亡蛋白Caspase-3,Caspase-9,PARP的降解产物表达水平显著提高,与对照组相比有显著性差异(P<0.01).而隐丹参酮对白血病细胞中P-糖蛋白表达和伊马替尼胞内药物积累没有影响.结果表明隐丹参酮可提高CML细胞对伊马替尼的化疗敏感性,其作用机制不依赖于对P-糖蛋白表达的抑制和胞内药物浓度的提高.  相似文献   
6.
目的 探讨畲药山里黄根水提物对卡介苗(bacillus calmette-guérin,BCG)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法 ICR小鼠,♂,随机分为正常组、模型组、山里黄根高、中、低剂量组和联苯双酯组。小鼠尾静脉注射BCG和LPS诱导小鼠免疫性肝损伤,正常组注射等体积的生理盐水。全自动生化分析仪分析小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,ELISA法测定血清中IL-2、IL-4、IL-10和TNF-γ的含量。HE染色观察小鼠肝脏的病理改变。结果 与模型组相比,山里黄根水提物能显著降低小鼠血清ALT、AST的活性(P<0.05),显著升高炎性因子IL-2与IL-10水平(P<0.05),显著降低炎性因子IL-4与TNF-γ水平(P<0.05)。与模型组相比,山里黄根水提物组小鼠肝组织炎症细胞浸润、水肿、坏死结构和免疫复合沉淀物均明显减轻。结论 山里黄根水提物对BCG联合LPS诱导的免疫性肝损伤具有保护作用。  相似文献   
7.
8.
李祯鑫  黄真  程汝滨  钟晓明 《中成药》2021,(4):1008-1011
目的优化松茸水提物提取工艺,并分析其单糖组成。方法以提取温度、液料比、提取时间、提取次数为影响因素,多糖提取率为评价指标,正交试验优化提取工艺。水提醇沉法得到粗多糖后用三氟乙酸水解,加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化,HPLC法分析单糖组成。结果最佳条件为药材加入50倍量水,90℃下回流提取2 h,重复3次,多糖提取率为17.44%。多糖主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖组成,摩尔比为1:3.39:1.19:0.24:0.40。结论该方法快速稳定,准确简便,可用于松茸及其相关制剂的质量控制。  相似文献   
9.
目的 探讨化疗联合重组人血管内皮抑素(恩度)治疗ⅡB期骨肉瘤的远期疗效及安全性。方法 收集2008年1月至2012年4月北京积水潭医院骨肿瘤科住院治疗的ⅡB期骨肉瘤患者,分为恩度联合化疗组和单纯化疗对照组。化疗方案如下:甲氨蝶呤 10g/m2静滴,d1;异环磷酰胺 3g/m2静滴,d1~d5;顺铂 120mg/m2 静滴,d1;阿霉素30mg/m2静滴,d1~d3。联合组在化疗的基础上加用恩度(15mg静滴,d1~d14,21天为1周期,共4个周期)。结果 388例患者入组,剔除和研究终止有58例,共纳入评价330例,其中联合组58例,对照组272例。随访6~59个月,中位随访时间为20.2个月。对照组1、2、3年无远处转移生存率分别为79%、70%和65%,联合组分别为93%、86%和77%(P=0.045)。对照组1、2、3年无进展生存率分别为76%、66%和60%,联合组分别为90%、83%和74%(P=0.025)。对照组1、2、3年生存率分别为94%、84%和79%,联合组分别为98%、94%和85%(P=0220)。两组的不良反应以1~2级为主,3~4级不良反应主要为白细胞减少,贫血、恶心呕吐和肝功能损害,两组不良反应差异无统计学意义。结论 恩度联合化疗治疗骨肉瘤能显著提高无远处转移生存率和无疾病进展生存率,不良反应可耐受,值得临床深入研究。  相似文献   
10.
目的 分析脑卒中偏瘫患者未受累侧(健侧)上肢在够物动作中的生物力学特性。 方法 选取脑卒中偏瘫患者30例设为患者组,另选取健康受试者23例作为对照组。2组受试者均接受上肢够物测试,够物过程分为肩前屈和保持两个阶段。采用表面肌电技术和穿戴式微型运动捕获系统同步采集并提取上肢够物时相关肌肉的表面肌电参数(均方根值、积分肌电值)和三维运动学数据(躯干扭转度、肩关节运动幅度、肩关节运动速度、等张失稳度、肩关节角度分散度),患者组依据未受累上肢是否为利手侧,将其分为利手侧和非利手侧进行分别采集,对照组利手和非利手侧均进行采集,然后采用秩和检验对相关数据进行统计学分析。 结果 患者利手侧在前屈阶段斜方肌上部均方根值为34.3μV,躯干扭转度为-1.4°,均高于对照组利手侧的19.7μV和-2.3°,组间差异均有统计学意义(P<0.05),而肩关节运动速度则低于对照组利手侧,差异有统计学意义(P<0.05);在保持阶段斜方肌上部,患者利手侧均方根值为55.4μV,高于对照组利手侧,胸大肌均方根值和三角肌前组/斜方肌上部积分肌电值均低于对照组利手侧,差异均有统计学意义(P<0.05)。患者非利手侧在前屈阶段三角肌中组均方根值高于对照组非利手侧,肩关节运动速度低于对照组非利手侧的,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组双侧比较,在前屈阶段,非利手侧斜方肌上部均方根值大于利手侧,三角肌前组/斜方肌上部积分肌电值比在前屈和保持阶段均小于利手侧,组内差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 无论脑卒中偏瘫患者的未受累上肢是利手侧还是非利手侧,其够物动作的生物力学特点与健康人对应侧上肢并非完全一致,在对脑卒中偏瘫患侧上肢进行生物力学研究时最好以健康人对应侧上肢作为对照。  相似文献   
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