康艾注射液体内外对肿瘤细胞增殖抑制作用的对比研究

目的：通过康艾注射液体内、外对肿瘤细胞增殖抑制作用的比较,考察其体内转化过程对抑瘤作用的影响。方法：SD大鼠尾静脉注射给药,心脏采血,采用MTT法测定大鼠给药后不同时间血清对卵巢癌H0-8910细胞增殖的抑制率,并与康艾注射液体外抑制肿瘤细胞增殖作用进行对比分析。结果：1．苦参素注射液、康艾注射液对HO-8910细胞的IC50分别为：681．64、686．27mg·L^-1,苦参素注射液和康艾注射液体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用无显著性差异（P〉0．05）,结果提示氧化苦参碱为康艾注射液中直接抑制肿瘤细胞增殖的主要有效成分;     

康艾注射液对HO-8910肿瘤细胞增殖的抑制作用

目的:比较康艾注射液对卵巢癌细胞HO-8910的抑制作用。方法:40只SD大鼠均分为2组,分别尾静脉注射康艾注射液和苦参素注射液,剂量均为200mg.kg-1(以苦参素计),心脏采血,采用MTT法测定大鼠给药后不同时间血清对卵巢癌HO-8910细胞的抑制率。并与康艾注射液及苦参素注射液体外抑瘤作用进行对比分析。结果:康艾注射液和苦参素注射液对HO-8910细胞的IC50分别为686.27和681.64mg.L-1,两者差异无显著性(P>0.05);含药血清中康艾注射液的IC50为347.06mg.L-1,显著低于前两者;大鼠给药后血清对肿瘤细胞的抑制率为即刻最高,且随时间延长和血药浓度的降低逐渐下降。结论:康艾注射液有较好的抑瘤作用,其主要的抑瘤成分为氧化苦参碱;且体内转化过程显著增强了其抑瘤作用。     

康艾注射液和苦参素注射液对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用

目的:通过康艾注射液和苦参素对不同肿瘤细胞增殖抑制作用的对比研究,考察复方对抑瘤作用的影响。方法:(1)MTT法分别测定苦参素注射液、康艾注射液对体外培养的不同肿瘤细胞HCT-8、K-562、HO-8910、SGC-7901的抑率,求算IC50;(2)比较苦参素注射液和康艾注射液对不同瘤株的抑制率,考察不同肿瘤细胞对药物的敏感性差异;(3)比较苦参素注射液和康艾注射液对同一肿瘤细胞的抑制率,考察复方和单方抑瘤活性的差异。结果:(1)苦参素注射液和康艾注射液对HCT-8、K-562、HO-8910、SGC-7901的抑瘤率均随浓度的增高而增强,浓度与抑瘤率呈正相关,其相关系数r分别为:0.935、0.933、0.942、0.952和0.947、0.915、0.953、0.964;(2)苦参素注射液和康艾注射液对HCT-8、K-562、HO-8910、SGC-7901的IC50分别为:1012.03、719.28、681.64、1 034.15 mg.L-1和905.99、764.10、686.27、995.52 mg.L-1,苦参素注射液和康艾注射液对HO-8910细胞相对较为敏感;(3)相同浓度的苦参素注射液和康艾注射液体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用无显著性差异(P>0.05),结果提示氧化苦参碱为康艾注射液中直接抑制肿瘤细胞增殖的主要有效成分。结论:康艾注射液有较好的抑瘤作用,其主要的直接抑瘤成分为苦参素,即氧化苦参碱。     

康艾注射液和苦参素注射液在大鼠体内的药代动力学

目的：研究康艾注射液（复方）和苦参素注射液（单方）中氧化苦参碱在大鼠体内的药代动力学,考察康艾注射液中多种成分对氧化苦参碱体内过程的影响。方法：SD大鼠尾静脉注射给药,给药剂量为200mg·Kg^-1（按氧化苦参碱计）,心脏采血,采用高效液相色谱法测定血清中氧化苦参碱和其活性代谢物苦参碱的浓度。药-时数据采用3P97软件进行处理。结果：康艾注射液和苦参素注射液中氧化苦参碱及苦参碱在大鼠体内的药动学均符合二房室模型。     

氧化苦参碱对卵巢癌HO8910细胞凋亡影响的血清药理学研究

目的探讨氧化苦参碱体内生物转化及含氧化苦参碱血清对人卵巢癌细胞HO8910的诱导凋亡作用机制。方法采用中药血清药理学实验方法,获得大鼠含氧化苦参碱血清,通过HPLC测定含药血清中氧化苦参碱的生物转化情况,通过MTT法、荧光显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳测定含药血清对人卵巢癌HO8910细胞的诱导凋亡作用,流式细胞术检测含药血清作用后细胞周期时相分布。结果给药大鼠血清中出现保留时间为10.8m in的氧化苦参碱峰图,且血清提取液中氧化苦参碱的浓度为40μg/mL,含氧化苦参碱血清能抑制HO8910细胞生长,经含药血清处理的细胞48h出现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带,HO8910细胞被阻滞在G0-G1期。结论氧化苦参碱经肌注体内生物转化后,血清中的主要代谢成分仍保持不变,含氧化苦参碱血清也具有诱导HO8910细胞凋亡的作用。     

氧化苦参碱对卵巢癌HO8910细胞凋亡影响的血清药理学研究

目的探讨氧化苦参碱体内生物转化及含氧化苦参碱血清对人卵巢癌细胞HO8910的诱导凋亡作用机制。方法采用中药血清药理学实验方法,获得大鼠含氧化苦参碱血清,通过HPLC测定含药血清中氧化苦参碱的生物转化情况,通过MTT法、荧光显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳测定含药血清对人卵巢癌HO8910细胞的诱导凋亡作用,流式细胞术检测含药血清作用后细胞周期时相分布。结果给药大鼠血清中出现保留时间为10.8m in的氧化苦参碱峰图,且血清提取液中氧化苦参碱的浓度为40μg/mL,含氧化苦参碱血清能抑制HO8910细胞生长,经含药血清处理的细胞48h出现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带,HO8910细胞被阻滞在G₀-G₁期。结论氧化苦参碱经肌注体内生物转化后,血清中的主要代谢成分仍保持不变,含氧化苦参碱血清也具有诱导HO8910细胞凋亡的作用。     

苦参碱抑制人卵巢癌细胞株HO-8910PM增殖及其机制研究

目的 研究苦参碱对人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM增殖的影响及其作用机制.方法 以MTT法和台盼蓝拒染法检测苦参碱对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞增殖的影响;流式细胞术检测药物作用后该细胞细胞周期的改变.结果 苦参碱能明显抑制细胞的增殖,苦参碱作用后出现细胞周期的改变,S期细胞比例明显增加(0.4977±0.0358),与对照组相比(0.2980±0.0421)P＜0.05.结论 苦参碱能抑制高转移性人卵巢癌细胞HO-8910PM的增殖能力,其抗肿瘤细胞增殖的能力与细胞周期改变有关.     

番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响效果初探

目的研究番茄红素异构体对体外培养的人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法观察含不同比例的顺、反式异构体番茄红素对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制作用;采用PI流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞有一定程度的抑制增殖和诱导凋亡的作用,且呈浓度依赖性。结论对人卵巢癌HO-8910细胞,含较高比例顺式番茄红素的Ⅱ号药组抑制增殖与诱导凋亡的作用比全反式番茄红素的I号药组具更强的生物活性。     

rhEPO对多卵巢癌HO-8910细胞表面TfR表达及细胞增殖的影响

目的：通过卵巢癌HO-8910细胞表面的TfR（CD71）在rhEPO干预前后的表达情况来观察rhEPO对细胞增殖的影响，探讨其在肿瘤相关性贫血中的治疗价值。方法：用RT—PCR法检测经不同浓度的rhEPO处理后的和未经rhEPO处理的HO-8910细胞表面的TfRmRNA表达情况：用流式细胞仪观察和检测处理前后的HO-8910细胞周期上的差异。结果：不同浓度的rhEPO培养HO-8910细胞48h，72h后，TfR表达均减少，与同期对照组相比差异有显著意义（P〈0．01）；经不同浓度的EPO在不同时间处理后的HO-8910及未经EPO处理的HO-8910在细胞周期上，与同期对照组相比差异有显著意义（P〈0．01），且较对照组有所减少。结论：经过高浓度的rhEPO处理后，卵巢癌HO-8910细胞表面TfR的表达减少，S期细胞百分率也有所降低，间接提示了高浓度的rhEPO可能通过铁代谢抑制卵巢癌HO-8910细胞的生长、增殖。     

血清药理学方法观察复方斑蝥胶囊对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响

目的 :研究复方斑蝥胶囊含药动物血清对人肝癌细胞SMMC -7721增殖的影响。方法 :采用血清药理学方法 ,对兔灌胃给予不同剂量 (临床等效剂量、2倍临床等效剂量和3倍临床等效剂量 )的复方斑蝥胶囊混悬液 ,应用MTT比色法观察含药血清对人肝癌细胞SMMC -7721增殖的抑制作用 ,同时观察临床等效剂量组各采血时间点的抑制作用。结果 :3个剂量组的含药血清对SMMC -7721细胞增殖均有抑制作用 (P<0 01) ,其中以3倍临床等效剂量组含药血清的抑制率最高 ;临床等效剂量组各采血时间点的含药血清对SMMC -7721细胞增殖均有抑制作用 (P<0 05) ,其中3h时含药血清的抑制率最高。结论 :复方斑蝥胶囊含药动物血清对人肝癌细胞SMMC -7721增殖具有一定的抑制作用 ,并具有剂量依赖性。     

全硫代反义寡核苷酸对卵巢癌细胞生长抑制作用

目的采用针对人端粒酶hTR基因的反义寡聚脱氧核苷酸,探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸（antisense oligodeoxy nucleotides,ASODN）对卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法将实验分为空白对照组、脂质体对照组、端粒酶全硫代正义寡聚脱氧核苷酸（Phosphorathioatesense oligodeoxy nucleotides,PS-SODN）组和不同剂量的全硫代反义寡聚脱氧核苷酸（Phosphorat-hioate an-tisense oligodeoxy nucleotides,PS-ASODN）组;②脂质体介导的细胞转染后,PS-ASODN和PS-SODN分别作用于卵巢癌HO-8910细胞后并培养24、48、72h,分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）、吖啶橙染色法、四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）、流式细胞术检测HO-8910细胞的端粒酶活性、细胞形态、体外增殖、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果ELISA法检测结果显示端粒酶PS-ASODN作用卵巢癌HO-8910细胞72h后端粒酶活性表达为阴性,说明端粒酶PS-ASODN能够抑制端粒酶活性;②吖啶橙染色观察细胞形态：PS-ASODN作用的卵巢癌HO-8910细胞有明显凋亡现象,凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩,说明PS-ASODN能够促进卵巢癌HO-8910细胞凋亡;③MTT实验：PS-ASODN明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖（P〈0.0l）,并呈一定剂量和时间依赖关系;④流式细胞仪检测细胞凋亡和周期：与空白对照组比较,PS-ASODN组G0/G1期细胞明显增多,差异显著（P〈0.01）;在G0/G1期前出现亚二倍体凋亡峰,表明细胞被阻止在G1/S期。结论PS-ASODN作用于卵巢癌HO-8910细胞后,卵巢癌HO-8910细胞增殖受到明显抑制,并出现凋亡;②PS-ASODN对端粒酶活性的抑制率与PS-ASODN的浓度和作用时间呈依赖关系,即抑制率随着反义寡核苷酸的浓度和作用时间的增加而增大;③以端粒酶RNA模板区为靶点的PS-ASODN明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖,其机制可能是通过降低细胞的端粒酶活性而诱发细胞的凋亡,PS-ASODN对卵巢癌的治疗具有重要价值。     

扶正抑瘤方含药血清对PC-3细胞作用的实验研究

目的：通过体外细胞实验,探讨扶正抑瘤方有效治疗前列腺癌的作用机理。方法：以人前列腺癌PC-3细胞为模型,观察扶正抑瘤方高、中、低剂量（9.58、19.17、38.33 g/kg）及不同浓度含药血清对PC-3细胞形态、细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。结果：扶正抑瘤方含药血清处理后,PC-3细胞可发现不同程度的细胞皱缩,染色质凝集,或细胞核固缩碎裂;MTT实验表明含药血清能明显抑制PC-3细胞增殖,且剂量越高细胞增殖抑制率越高,20%高剂量含药血清组抑制率约50%;流式细胞仪检测发现,含药血清组处理后48 h,各组在非凋亡细胞二倍体峰（G1）之前均出现大小不等的凋亡细胞峰,凋亡率均显著高于空白血清组,而且G0/G1期细胞比例增加,S期及G2/M期细胞比例下降。结论：扶正抑瘤方含药血清能抑制PC-3细胞增殖,且呈剂量、浓度依赖性,其抗肿瘤活性可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

硝酸镓对卵巢癌细胞增殖与凋亡的作用

目的：探讨硝酸镓对卵巢癌HO-8910细胞诱导凋亡、抑制增殖的影响。方法通过对卵巢癌HO-8910细胞培养及干预（硝酸镓不同浓度及时间作用）,采用流式细胞仪技术对凋亡细胞进行测定;MTT技术对肿瘤细胞增殖进行测定。结果 MTT及流式细胞仪检测结果显示,增殖抑制率（80μg/ml）24 h为57.1%、48 h为59.4%、72 h为68.1%;凋亡率5μg/ml为（9.92±1.04）%、10μg/ml为（28.31±1.22）%、20μg/ml为（38.59±1.21）%、40μg/ml为（45.48±1.43）%、80μg/ml为（52.25±2.18）%,硝酸镓对HO-8910细胞作用呈剂量-时间±赖效应。结论硝酸镓对卵巢癌细胞作用明显,为肿瘤治疗及制备抗肿瘤药物提供新的途径。     

复方苦参注射液4种生物碱大鼠体内药动学研究

目的建立LC-MS法测定大鼠血浆中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱的质量浓度,研究复方苦参注射液在大鼠体内药动学过程及其参数。方法在血浆样品中加入内标,采用氯仿提取处理,以甲醇-0.2mL.L-1甲酸水溶液-10mmol.L-1NH4Ac水溶液(85∶7.5∶7.5)为流动相;VP-ODS柱分离,检测健康大鼠iv 2g.kg-1复方苦参注射液后12h内血浆样品中4种生物碱的质量浓度,用DAS 2.0药动学程序处理4种生物碱的血药浓度-时间数据。结果静注复方苦参注射液后,4种生物碱在大鼠体内的药代动力学符合二室开放模型,Cmax与原药液中质量浓度比例基本相符,苦参碱和氧化苦参碱AUC(0-∞)较为相近;苦参碱和槐果碱K12分别约为K21的2倍多,氧化槐果碱为3倍多,氧化苦参碱二者基本相近;表观分布容积顺序为槐果碱>氧化槐果碱>苦参碱>氧化苦参碱;氧化苦参碱t1/2β最短;苦参碱和槐果碱MRT(0-∞)较大,氧化苦参碱最小。结论氧化苦参碱部分代谢为苦参碱而增加了后者的血药浓度;氧化苦参碱主要分布在血液,消除最快,而其他3种生物碱会分布到组织;苦参碱、槐果碱和氧化槐果碱从中央室转运到周边室较为迅速,而氧化苦参碱转运速度相等。     

不同剂量苦参碱给药后的药动学及其在唾液中的分布

目的探讨苦参碱不同剂量给药后苦参碱在大鼠体内的动态变化规律及其在唾液中的分布情况。方法大鼠静脉注射苦参碱注射液后,用反相高效液相色谱法测定苦参碱在血液、唾液中的浓度,采用药动学软件MULTI97V10进行数据处理,确定药动学参数。结果苦参碱不同剂量给药后在大鼠体内符合二室模型分布,其高、中、低剂量主要药动学参数分别如下：t1/2=2．38h,AUC=203．0g·h·L^-1,Ve=675．3mL,CL=190．6L·h^-1。t1/2=1．39h,AUC=70．7g·h·L^-1,Vc=489．4mL,CL=243．3L·h^-1;t1/2=1．66h,AUC=41．85g·h·L^-1,Ve=500．2mL,CL=208．4L·h^-1。结论通过高、中、低剂量及相应的AUC对比,可知苦参碱中、低剂量给药后在体内呈线性药动学消除过程,高剂量给药后呈非线性药动学消除过程,中、低剂量给药后,苦参碱腮腺中唾液药物浓度与血液药物浓度有一定相关性,可以考虑利用腮腺唾液代替血液进行苦参碱的药动学研究。     

灯盏乙素的大鼠药代动力学和血小板聚集抑制率的相关性研究

目的：探讨灯盏花素注射液中灯盏乙素血药浓度与其药效学的相关性,为临床合理用药提供科学依据。方法：Wistar大鼠随机分为3.75、7.5和15 mg/kg三个剂量组,尾静脉注射灯盏花素注射液。给药前和给药后不同时间点取血测定三组血药浓度和ADP诱导的血小板聚集率,用统计学方法计算两者的相关性。结果：瞬时血药浓度（C）与ADP诱导的血小板聚集抑制率（Y）进行线性回归,相关系数r均〉0.7。经统计学处理,各给药剂量下的瞬时血药浓度均与ADP诱导的大鼠血小板聚集抑制率呈显著正相关（P〈0.01）。结论：灯盏乙素明显抑制ADP诱导的血小板聚集,并且其血药浓度与药效呈现一定的关系。本试验为灯盏乙素用于防治血栓性疾病提供了进一步的科学依据。     

熊果酸含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1表达的影响

目的：观察熊果酸（ursolic acid,UA）含药血清对体外脂多糖（LPS）刺激下大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells,MCs）增殖与转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响,探讨其保护肾脏的作用机制。方法：体外原代培养并鉴定大鼠肾小球系膜细胞;熊果酸含药血清分为3个剂量干预组,按高剂量（100 mg·kg^-1）、中剂量（50 mg·kg^-1）、低剂量（25 mg·kg^-1）每日1次连续给大鼠灌胃,7 d后取血制备含药血清;正常对照组灌胃同体积生理盐水制备正常血清。系膜细胞用LPS（10 mg·L^-1）诱导后,分别加入正常血清对照或不同剂量熊果酸含药血清培养48 h。采用CCK-8法观察系膜细胞增殖,ELISA法检测细胞分泌TGF-β1水平,RT-PCR测定TGF-β1 mRNA的表达。结果：LPS明显诱导系膜细胞增殖,上调TGF-β1的表达。高、中、低剂量熊果酸含药血清均能抑制LPS刺激下系膜细胞增殖,并在基因水平呈剂量依赖性抑制 TGF-β1 的表达。结论：熊果酸含药血清可抑制炎症状态下系膜细胞增殖,并下调 TGF-β1 的表达,提示熊果酸对肾小球疾病可能发挥保护作用。     

消积饮对人A549肺癌细胞增殖的抑制作用

目的观察消积饮对人肺癌细胞株A549细胞增殖的影响。方法选取人A549肺癌细胞株作为研究对象,生长于RPMI 1640培养液中,细胞传代24 h进入对数生长期后分别加入低、中、高剂量含药血清(灌胃给予消积饮后的大鼠血清)及对照组大鼠血清进行细胞诱导。MTS法测定消积饮对A549细胞增殖的抑制作用。结果不同剂量的消积饮血清均可抑制人A549肺癌细胞的增殖,抑制率明显高于对照组(P<0.01)。消积饮高、中剂量组抑制率明显高于低剂量组(P<0.05),但高剂量组与中剂量组之间无明显差异。结论消积饮可在体外有效抑制人肺癌细胞株A549细胞的生长,在一定浓度范围内,具有量效关系。     

氧化苦参碱抗大鼠脑外伤后神经细胞凋亡及机制研究

目的观察氧化苦参碱对大鼠脑外伤后神经细胞凋亡、氧化损伤和炎症反应的影响,探讨氧化苦参碱抗神经细胞凋亡的机制。方法选用健康Wistar大鼠140只,♂,随机分成假手术组、脑外伤组、氧化苦参碱60 mg.kg?1组和氧化苦参碱120 mg.kg?1组,每组35只,利用改进的Feeney自由落体损伤装置制作脑外伤动物模型,分别于脑外伤模型形成后给予1 mL 0.9%氯化钠注射液及不同剂量氧化苦参碱(60和120 mg.kg?1)腹腔注射,每日1次,共5 d,在脑外伤后2,6,12 h,1,2,3和5 d断头取血和获取脑组织,利用黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶活性,利用硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛浓度,利用酶联免疫吸附试验测定血清白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度,利用原位末端转移酶标记技术检测脑组织中凋亡神经细胞,同时进行统计分析。结果脑外伤后2,6,12 h,1,2,3和5 d,氧化苦参碱60 mg.kg?1组大鼠凋亡神经细胞数量、血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛、白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度与脑外伤组比较差异没有统计学意义(P>0.05);脑外伤后12 h,1,2,3和5 d,氧化苦参碱120 mg.kg?1组大鼠凋亡神经细胞数量、血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛、白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度较脑外伤组显著减少(P<0.05),脑外伤后2 h和6 h,氧化苦参碱120 mg.kg?1组大鼠凋亡神经细胞数量、血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛、白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度与脑外伤组比较差异没有统计学意义(P>0.05)。结论氧化苦参碱可能通过降低体内自由基和炎症反应,从而抑制脑外伤后神经细胞凋亡,达到神经保护作用。     

左旋-二脱水伊地醇双甲磺酸酯含药血清对HL-60细胞增殖的影响

目的探讨左旋-二脱水伊地醇双甲磺酸酯含药血清对HL-60细胞的增殖抑制作用。方法运用CCK-8法测定不同剂量组DMDAI-L的含药血清对HL-60细胞的增殖影响。结果 DMDAI-L高中低剂量组含药血清作用HL-60细胞48 h抑制率分别为30.29%、20.72%、13.97%,而阳性组(环磷酰胺)抑制率为18.16%,高、中、低剂量组、阳性对照组与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论 DMDAI-L含药血清能够有效抑制HL-60细胞增殖。