一种新型合成水蛭肽纤溶动力学研究

目的 研究水蛭肽Hirulog-s影响单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和纤溶酶原相互活化作用考察新型合成水蛭肽的纤溶作用特性。方法 构筑单链尿激酶型纤溶酶原激活剂（pro-uPA）和纤溶酶原（plg）相互活化反应体系,添加Hirulog-s成反应体系不同浓度,比较pro-uPA和plg相互活化反应体系中纤溶酶（plm）作用于pro-uPA反应的酶促反应动力学常数（Km,kcat）,分析Hirulog-s对plm作用于pro-uPA反应的催化速率及亲和性。纤溶活性作用检测采用底物酶促反应法,酶促反应动力学常数的测定基于基于单链尿激酶型纤溶酶原激活剂激活纤溶酶原的反应。 结果 在plm作用于pro-uPA的反应体系中,30 μmol·L-1 Hirulog-s与对照相比kcat值增大了3.1倍,Km值减小了1.6倍,表明Hirulog-s可以显著提高plm的最大催化速率同时增强亲和性。30 μmol·L-1 Hirulog-s与对照相比kcat/Km值增大了4.75倍,表明Hirulog-s明显提高了plm的催化效率。通过活性对比表明Hirulog-s的纤溶活性强于水蛭肽Hirulog-1。 结论 Hirulog-s促进单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和纤溶酶原相互活化作用而发挥纤溶作用,新型合成水蛭肽从酶促反应动力学参数显示出优良的纤溶作用特性。     

海洋微生物代谢产物FGFC1的纤溶促进作用

目的:研究海洋微生物产生的吡喃并异吲哚酮化合物FGFC1体外和实验动物体内促纤溶作用.方法:采用异硫氰酸荧光素(F1TC)纤维蛋白降解法和急性肺血栓大鼠模型法研究FGFC1体外和体内的纤溶促进作用.结果:在体外FITC-纤维蛋白降解实验中,FGFC1在0.5～ 25 μmol/L浓度范围内,其纤溶促进作用随着浓度升高逐渐增强;当FGFC1浓度≥25 μmol/L时,其纤溶促进作用维持在最高水平,EC50为5 μmol/L.在大鼠急性肺血栓实验中,FGFC1的剂量为5或10 mg/kg能溶解肺血栓,达到与5 nmol/L剂量单链尿激酶型纤溶酶原激活剂相当的溶栓效果.结论:溶栓药物先导化合物FGFC1具有优良的纤溶促进作用和溶栓效果.     

葡萄糖甘油二脂促进大白鼠肺血栓溶解及其作用机制研究

目的研究葡萄糖甘油二脂(Glucosyldiacylglycerol,GDG自马尾藻分离提取)促进大白鼠肺血栓溶解及其作用机制。方法用荧光异硫氰酸异构体Ⅰ(Fluorescein isothiocyanate isomerⅠ,略写为FITC)标记纤维蛋白以建立肺血栓动物模型,GDG尾静脉注射,观察其肺血栓溶解的药理作用。通过建立的体外纤溶反应体系,研究GDG对纤溶酶原和单链尿激酶型纤溶酶原激活剂体活性的影响,并且用圆二色谱进一步研究GDG对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂构象的影响。结果GDG具有促进肺血栓溶解的作用;建立体外纤溶反应体系,发现GDG不能促使纤溶酶原和尿激酶型纤溶酶原激活剂分别直接转化为纤溶酶和尿激酶;用圆二色谱研究发现,GDG使单链尿激酶型纤溶酶原激活剂在208nm处的负峰向长波方向移动,并且α-螺旋结构减少β-折叠结构增加。结论GDG提高了单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的内因性尿激酶型纤溶酶原活化因子的作用     

链霉菌产生的新型纤溶酶的纤溶性质和溶栓作用

目的旨在进一步确证纤溶活性的蛋白酶SW-1的溶栓作用和性质。用体外加热平板法、试管凝块法和在体内对大鼠静脉血栓溶解及对纤溶因子的作用等实验,发现SW-1在体外可直接降解纤维蛋白,而无激活纤溶酶原的作用。在体内,SW-1对大鼠静脉血栓有显著的溶解效果,与同剂量尿激酶的溶栓作用相当。给药(iv)30min后,SW-1引起大鼠血浆中纤溶酶、纤溶酶原水平提高,纤维蛋白原水平下降,而对组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、α₂-纤溶酶抑制剂无显著影响。提示SW-1是一种具有纤溶活性的蛋白酶,而不是纤溶原激活剂。     

活血化瘀中药的纤溶和纤溶抑制作用

分别用尿激酶型纤溶酶原激活剂，组织型纤溶酶原激活剂激活纤溶酶原的纤溶试验，观察了２０余种常用活血化瘀药对纤溶的影响，结果表明，１１味中药的水浸液在含纤溶酶原和不含纤溶酶原的纤维蛋白板上都出现同样程度的纤溶活性，按由强到弱的排列是益母草，三棱，水蛭，五灵脂，炮山甲、姜黄、川芎、红花、土鳖虫，桃仁，元胡，但未发现对ｔ－ＰＡ，ｕ－ＰＡ激活纤溶的增强作用。部分药物不同程度抑制ｔ－ＰＡ，ｕ－ＰＡ激活纤溶。其     

注射用人组织尿激酶型纤溶酶原激活剂质量标准研究

目的:建立注射用人组织尿激酶型纤溶酶原激活剂(HTUPA)的质控方法和质量标准。方法:以纤维蛋白平板法测定HTUPA 的生物学活性,还原型 SDS-PAGE 确定相对分子质量,SDS-PAGE 和反相高效液相色谱测定纯度,毛细管电泳法测定等电点,用胰蛋白酶酶切后分析肽图,其余检测项目按2005年版中国药典三部规定进行。结果:用建立的方法对原液和成品进行了检定,各项指标均符合《人用重组 DNA 制品质量控制技术指导原则》和2005年版中国药典三部的要求。结论:建立的质控方法和质量标准具有保证产品安全、有效、质量可控的特点,可用于注射用人组织尿激酶型纤溶酶原激活剂产品的常规检定。     

肾炎患者外周血单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体及相关细胞因子的表达

目的　探讨肾炎患者外周血单个核细胞尿激酶受体及相关细胞因子的表达。方法　采用流式细胞术测定肾炎患者外周血单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体、IL - 2R和整合蛋白 β2 水平 ,双抗体夹心ELISA法测定血清IL - 2 ,IL - 4和IL - 10水平。结果　肾炎患者外周血单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体、IL - 2R和整合蛋白 β2 表达水平分别为 (15 .94± 3.2 1) %、(10 .93± 4.2 4) %和 (12 .87± 4.79) % ,均显著高于正常组的 (4.2 1± 1.0 2 ) %、(1.49± 0 .47) %和 (2 .0 8± 1.0 1) % (P <0 .0 1) ;血清IL - 2和IL - 4水平分别为 (2 1.14± 8.2 4) μg/L和 (43.5 6± 10 .2 4) μg/L ,亦均显著高于正常组的 (8.73± 4.0 2 ) μg/L和 (2 3.0 4± 4.78) μg/L(P <0 .0 1) ;IL - 10水平 (8.34± 2 .0 1) μg/L则显著低于正常组的 (12 .0 1± 2 .34 ) μg/L(P <0 .0 1) ;89例肾炎患者外周血单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体表达水平随病情好转而逐渐恢复正常 ,13例患者激素治疗 2周病情无缓解 ,但外周血单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体表达水平也逐渐恢复。结论　肾炎患者外周血单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体表达水平与多种细胞因子有关 ,参与肾小球肾炎的发病 ,在肾小球基底膜?     

短尾蝮蛇毒纤溶酶原激活剂的分离纯化及活性测定

目的从短尾蝮蛇毒中分离纯化纤溶酶原激活剂(plasminogen activator of Gloydius brevicaudus venom,GBV-PA),对其理化性质及部分生物活性进行研究。方法应用苯甲脒-琼脂糖凝胶(Benzamidine Sepharose6B)亲和层析及Lichrospher C18反相层析柱进行分离纯化,应用SDS-PAGE测定分子量、聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳测定等电点,以发色底物法测定生物活性。结果通过亲和层析、反相层析等方法可从短尾蝮蛇毒中分离纯化出纤溶酶原激活剂至电泳纯以上,其相对分子质量约为32.6×103,等电点约为5.2,能特异激活人纤溶酶原为纤溶酶,其比活性为2.87t-PA IU.mg-1;该酶为丝氨酸蛋白酶,对纤维蛋白无亲和性。结论应用亲和层析和反相层析可从短尾蝮蛇毒获得一种纤溶酶原激活剂;该酶为丝氨酸蛋白酶,对纤维蛋白无亲和性。     

重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对家兔纤溶和凝血系统活性的影响

目的 :观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 (reteplase ,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法 :采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果 :Ret(3.75、7.5 0、15 .0MIU·kg-1)可明显降低纤溶酶原含量 ,使血浆纤维蛋白降解产物转呈阳性反应 ,缩短优球蛋白溶解时间 ,同时延长血浆凝血酶时间 ,凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。结论 :Ret可促进血液纤溶系统活性和抑制凝血系统活性     

蛇毒纤溶酶原激活剂的研究进展

蛇毒是含有多种生物活性蛋白质和多肽的混合物,其中一些蛋白可作用于人的凝血系统。蛇毒纤溶酶原激活剂是具独特活性的蛇毒丝氨酸蛋白酶,具有较长的半衰期,可专一性地裂解人Glu-纤溶酶原的Arg^561-Val^562肽键,使之变成有活性的纤溶酶,从而发挥溶栓作用。该文主要对蛇毒纤溶酶原激活剂的结构特点和作用机制进行了阐述,旨在为新型溶栓剂的研究提供方向。     

Theoretical π-π* absorption and circular dichroic spectra of cyclic dipeptides

The dipole interaction model, treated by the partially dispersive normal mode method, is used to calculate circular dichroic spectra of cyclo(Gly-Gly), cyclo (Ala-Gly), cyclo(Ala-Ala), cyclo(Pro-Gly), cyclo(Pro-Ala), cyclo(Pro-Val), cyclo (Pro-D-Val), and cyclo(Pro-Pro) in the amide π-π* absorption band near 190 nm. Assuming a standard backbone geometry, spectra which are in fair to good agreement wth experiment are obtained for these molecules. The spectra are predicted to be sensitive to conformations of Pro and Val side chains. The effects of dipeptide ring folding on calculated CD spectra are mostly consistent with those found by other workers, except that it is found that a planar ring conformation of cyclo (Ala-Ala) and cyclo (Ala-Gly) gives predicted spectra comparable to experiment. The same model gives theoretical absorption spectra consistent with available experimental data.     

HPLC法测定丝裂霉素C聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒中丝裂霉素C的含量

目的:建立高效液相色谱法测定丝裂霉素 C 聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(MMC-PBCA-NP)中药物含量。方法:采用C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以混合磷酸盐缓冲液-乙腈(85:15)为流动相,流速为1 mL·min~(-1),紫外检测器,检测波长为365 nm。结果:丝裂霉素 C(MMC)浓度在5～250 μg·mL~(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率(n=6)为98.15%。结论:本法专属性强,操作简便,结果准确。适用于 MMC-PBCA-NP 的质量控制。     

乙酰吉他霉素临床前药理学研究

乙酰吉他霉素对临床分离的革兰氏阳性球菌有较好的抑菌活力，其对金葡球菌、β－溶血性链球菌、表葡球菌的ＭＩＣ_（５０）分别为１、０．２２和４ｍｇ／Ｌ，对耐红霉素、青霉素的金葡球菌、表葡球菌半数以上较敏感，与吉他霉素相似，但其对革兰氏阴性菌无明显作用。乙酰吉他霉素对小鼠实验性细菌感染有明显保护作用。对金葡球菌、肺炎双球菌感染小鼠口服用药的ＥＤ_（５０）分别为７９．６和２５．１ｍｇ／ｋｇ。其疗效与吉他霉素、麦白霉素、乙酰螺旋霉素相似。乙酰吉他霉素小鼠１次口服的ＬＤ_（５０）＞１５ｇ／ｋｇ，与吉他霉素相比毒性无差异。     

The pathogenesis of,and pharmacological treatment for,Canavan disease

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Effects of Nitro-L-Arginine on Blood Pressure and Cardiac Index in Anesthetized Rats: A Pharmacokinetic-Pharmacodynamic Analysis

Purpose. Nitric oxide synthase (NOS) inhibitors such as Nitro-L-arginine (L-NA) are being considered for the management of hypotension observed in septic shock. However, little information is available regarding the pharmacokinetic and pharmacodynamic properties of these agents. Our objective was to examine the relationships between L-NA plasma concentration and various hemodynamic effects such as cardiac index (CI), mean arterial pressure (MAP), and heart rate (HR) elicited by L-NA administration in rats. Methods. L-NA was infused at doses between 2.5 – 20 mg/kg/hr in anesthetized rats over one hour. Hemodynamic effects and plasma L-NA levels were determined. Results. Infusion of L-NA resulted in dose-dependent increases in MAP and systemic vascular resistance (SVR), decreases in CI, and minimal change in HR. The relationships between the hemodynamic effects and plasma L-NA levels were not monotonic, and hysteresis was observed. Using nonparametric analysis, the equilibration half-time (t_1/2,keo) between plasma L-NA and the hypothetical effect site was determined to be 51.5 ± 6.6 min, 42.4 ± 10.1 min, 43.4 ± 9.0 min for MAP, CI, and SVR, respectively (n = 14). The E_max and EC₅₀ values obtained were + 32.5 ± 8.4 and 2.6 ± 1.3 g/ml for MAP and –52.9 ± 15.6 and 3.7 ± 1.8 g/ml for CI, respectively. Conclusions. Although L-NA can bring about beneficial elevation of MAP, such effect is always accompanied by a stronger effect on CI depression. Dose escalation of L-NA may bring about detrimental negative inotropic effect and loss of therapeutic efficacy.     

高效毛细管电泳法测定磺胺类药物的离解常数及其制剂的含量

目的:采用毛细管电泳法测定磺胺甲唑(sMZ)、磺胺嘧啶(SD)和甲氧苄啶(TMP)的离解常数及其在制剂中的含量。方法:采用未涂层的弹性石英毛细管柱(60.2 cm×75 μm,有效长度50 cm),柱温25 ℃,正极压力进样,检测波长214 nm。将3种化合物的有效电泳淌度与 pH 进行非线性拟合,测定其离解常数;最佳的分离条件为:50 mmol·L~(-1)磷酸二氢钠(pH 6.0)缓冲液,分离电压27.5 kV,在此条件下测定其在制剂中的含量。结果:SMZ、SD、TMP 的离解常数分别为5.69,6.36,6.68;在0.1～1000μg·mL~(-1)的浓度范围内线性关系良好(相关系数:0.9992～0.9999),回收率为95.6%～105.0%。结论:该方法简便、快速、准确,可用于测定3种磺胺类药物的解离常数及其在制剂中的含量。     

脑脊液转铁蛋白及免疫球蛋白含量变化在小儿中枢神经系统感染时的临床意义

目的　通过对小儿中枢神经系统感染时Tf、Ig在脑脊液中含量的变化及其相关性分析 ,为鉴别诊断及更切实的判定病情和估计预后提供参考依据。方法　应用速率散射比浊法测定脑脊液中Tf、Ig。结果　 (1 )三组急性期脑脊液中Tf、Ig含量均高于恢复期。 (2 )结脑组Tf、IgG增高明显 ,化脑组IgM增高明显。病脑组变化最小。 (3)恢复期脑脊液中Tf、Ig含量与对照组比较 ,结脑中Tf、IgG、IgM高于对照组 ,化脑和病脑组IgM均高于对照组 ,Tf、IgG均无差异 ,各组IgA与对照组相比无显著性差异。 (4)病脑急性期Tf与IgG呈正相关 ,恢复期与IgA呈正相关 ;化脑组急性期Tf与IgM、IgG呈正相关 ,恢复期与IgM呈正相关 ;结脑急性期Tf与IgA、IgM均呈正相关 ,恢复期与IgG呈正相关。结论　 (1 )Tf与IgG是诊断结脑的良好指标 ,IgM是诊断化脑的良好指标 ,当脑脊液中IgM >30mg L时 ,可基本除外病脑 ,当脑脊液中IgM <60mg L时 ,化脑的可能性较小。 (2 )Tf与Ig一样 ,可作为判断中枢神经系统感染时血脑屏障及脑损伤与恢复程度的重要指标     

甘草甜素脂质体和甘草甜素的药动学比较

目的:比较健康志愿者口服甘草甜素脂质体(Glycyrrhizin liposome,GL-L)和甘草甜素药片(Glycyrrhizin,GL)后的药动学.方法:用高效液相色谱检测血浆甘草次酸(Glycyrrhetinic acid,GA)的浓度,流动相为甲醇-水-醋酸-三乙胺(87:12.15:0.3:0.55),流速为1.0 mL·min-1,用乙腈提取,在254 nm下检测.用上述HPLC法测定8例健康志愿者口服GL-L和GL后的药动学.结果:血浆GA的出峰时间大约为12 min,检测限为0.062 5μg·mL-1.口服两种制剂后,血浆中未检测到GL,仅检测到GA,口服GL-L后血中GA的浓度-时间曲线下面积(AUC)、血药峰值(Cmax)较口服GL高.结论:口服GL很少被吸收,而口服GL-L后可促进GL转变为GA和GA的吸收.     

镇静小鼠的非侵入式气道反应性测定法及药物作用

目的：建立并验证镇静小鼠气道反应笥的非侵入式测定法,探讨小鼠气道高反应性与气道炎症的关系。方法：观察致敏及药物对小鼠引喘阈浓度的影响,及支气管－肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞渗出量的变化。结果：与未致敏小鼠相比,致敏小鼠吸入ＯＡ６ｈ的ＭＣｈ引喘阈逍度显著降低,ＢＡＬＦ中细胞渗出量显著增高,地塞米松（７．５ｍｇ／ｋｇ）和氨茶碱（３７．５ｍｇ／ｋｇ）可降低致敏小鼠吸入ＯＡ引起的气道反应性增高和ＢＡＬＦ