P16蛋白表达与胃癌及淋巴结转移的关系

目的：前瞻性研究抑癌基因P16蛋白在人胃癌及转移淋巴结中的表达与胃癌转移的关系。方法：应用SP免疫组织化学方法检测46例原发性胃癌及69枚转移淋巴结中P16蛋白表达。结果：P16蛋白在受检原发性胃癌中的阳性率分别为17．4％（8／46）,在转移淋巴结中的阳性率分别为19．9％（11／69）。原发癌伴淋巴结转移组P16的阳性表达率（6．9％）低于不伴淋巴结转移组的阳性率（35．3％）,差异有显著性（P＜0．05）。P16表达与肿瘤大小、部位、浸润深度、Bormann分型、年龄及性别等因素无相关性（P＞0．05）。P16在原发性胃癌及转移淋巴结中的表达无相关性（P＞0．05）。结论：P16基因蛋白对胃癌的发展及淋巴结转移有抑制作用。检测胃癌P16蛋白对评估胃癌生物学行为、预测胃癌淋巴结转移以及预后可能具有一定的价值。     

尿激酶型纤溶酶原激活物受体表达与胃癌中浸润和转移过程的关系

目的：研究尿激酶型纤溶酶原激活物受体（uPAR)在胃癌浸润和转移过程中所起的作用。方法：采用免疫组化SP法检测59例胃癌组织中uPAR折表达，观察其与癌组织学类型、浸润深度以及淋巴结转移的关系。结果：59例中uPAR阳性28例；在乳头状、管状腺癌和粘液腺癌中uPAR阳性率较高，而在低分化癌和印戒细胞癌中阳性率较低（P＜0．01）；有淋巴结转移组uPAR阳性率为60．5％（23／38），高于无淋巴结转移组的23．8％（5／21）（P＜0．01）；uPAR在早期胃癌阳性率为12．5％（1／8），侵及肌层组阳性率为38％（6／16），侵犯全层组阳性率为60％（21／35），差别有显著性（P＜0．05）。结论：uPAR与胃癌的浸润和转移密切相关，也与胃癌组织学类型有关。     

弥漫型胃癌组织中增殖细胞核抗原的表达

目的：研究弥漫型胃癌增殖细胞核抗原（PCNA）的表达与肿瘤浸润，淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化法，对11例弥漫型胃癌组织中PCNA的表达水平进行检测，结果：112例弥漫型胃癌中96例（85．7％）PCNA阳性，粘膜及粘膜下肿瘤PCNA阳性率（28．6％）明显低于浆浆膜外肿瘤（93．0％），（P＜0．05），淋巴结转移组PCNA阳性率（82．0％）明显高于无淋巴结转移组（34．8％），淋巴结转移≥10枚淋巴结组PCNA阳性率（94．1％）明显高于＜10枚淋巴结组（42．9％）（P＜0．05）。结论L对胃癌组织进行PCNA蛋白的检测，有助于预测胃癌进展程度和诊断淋巴结转移，以及评估胃癌的预后。     

前哨淋巴结活组织检查技术在胃癌根治术中的应用价值

目的：探讨前哨淋巴结定位与活组织检查在胃癌根治术中的作用。方法：使用亚甲蓝对22例胃癌患者先行前哨淋巴结标识活组织检查,然后行标准胃癌根治术,术后行常规HE病理及免疫组化检查,通过前哨淋巴结计算胃癌淋巴结转移诊断的准确率、敏感性及假阴性率。结果：22例患者中21例成功捡出前哨淋巴结,检出率为95．5％（21／22）。前哨淋巴结预测胃周淋巴结转移的准确率为95．2％（20／21）,敏感性为94．1％（16／17）,特异性为100％（21／21）,假阴性率为5．9％（1／17）。结论：术中使用亚甲蓝染色定位胃癌前哨淋巴结安全可行,并能准确反映胃癌周围淋巴结的转移状态,可用于指导胃癌的淋巴结清扫范围。     

CD44V6、PCNA在弥漫型胃癌中的表达与浸润、淋巴结转移的相关性分析

目的：研究胃癌CD44V6、PCNA的表达与肿瘤的分化、浸润及淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化的方法,对112例弥漫型胃癌组织中CD44V6、PCNA的表达水平进行检测。结果：112例弥漫型胃癌中41例（36．6％）CD44V6阳性,96例（85．7％）PCNA阳性,96例（85．7％）PCNA阳性。淋巴结转移组CD44V6阳性率76．4％,明显高于无转移组21．7％（P＜0．01）;淋巴结转移：≥10枚淋巴结组CD44V6表达（85．3％）明显高于＜10枚结巴组23．8％（P＜0．01）。粘膜及粘膜下肿瘤PCNA阳性率28．5％,明显低于肌层及浆膜外肿瘤的93．0％（P＜0．01）。结论：CD44V6、PCNA的表达可作为预测胃癌浸润和转移的较好指标。     

逆转录-聚合酶链反应检测胃癌淋巴结微转移

目的 检测胃癌常规病理检查阴性的淋巴结微转移的发生及与其它临床参考指标的关系。方法 利用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测68枚胃癌胃周淋巴结癌胚抗原（CEA）mRNA基因表达，同时比较RT－PCR与免疫组化（IHC）方法的检测敏感性。结果 CEAmRNA RT－PCR是一种很敏感的方法，可以检测1／10^6个转移的癌细胞；检测19例胃癌患者取材的68枚胃周淋巴结，IHC阳性率28％（19／68），RT－PCR阳性率57％（39－68），两组之间差异有非常显著性意义（P＜0.01）；RT－PCR阳性率与胃部临床参考指标密切相关，且随着病期进展而增大。结论 CEA mRNA RT-PCR是比免疫组化更敏感的方法，可以预测胃癌淋巴结微转移，能够有效地避免已有微小转移的患者被漏诊。     

血清Livin水平与胃癌临床分期的关系探讨

目的探讨血清Livin水平与胃癌临床分期的关系。方法用ELISA法检测36例术前胃癌患者和5例健康人血清Livin水平。结果胃癌患者血清中Livin阳性表达率为52．8％（19／36）,正常健康人血清中未见阳性。Livin在低分化腺癌中阳性率为69．6％（16／23）,与高、中分化腺癌23．1％（3／13）相比有显著性差异;伴有淋巴结转移者阳性率为68．0％（17／25）。无淋巴结转移者阳性率为18．2％（2／11）,两者有显著性差异;伴有浆膜层浸润者阳性率为70％（14／20）,无浆膜层浸润者阳性率为31．3％（5／16）,两者比较有显著性差异。TNM分期Ⅲ期的胃癌患者Livin阳性率为91．7％（11／12）,显著高于I、Ⅱ期者33．3％（8／24）。Livin基因表达与胃癌组织的分化程度、临床分期及淋巴结转移呈正相关。结论血清Livin水平与胃癌的分期和病理组织学类型有关,为术前评估胃癌的TNM分期和淋巴结转移提供可靠依据。     

胃癌选择性D3清除术的临床探讨

目的：分析胃癌患者施行选择性D3清除术的必要性。方法：回顾性研究近五年来诊治的各部位胃癌183例，其中行D3清除术122例，D2术33例，D1术2例，姑息性切除14例，未能切除12例。其中行D3清除术者取第二、三站淋巴结作病理学检查，共检获第二、三站淋巴结总数为1632枚，平均每例检获13．4枚。分析第二、三站淋巴结转移度与胃癌分化程度、浸润深度及与病灶大小的关系。结果：本组122例D3清除术中，低分化～未分化癌62例，中一高分化癌60例，第二、三站淋巴结的转移率分别为67．7％（42／62）和46．7％（28／60），两者比较P〈0．01；转移度分别为52．2％（485／930）和47．6％（334／702），转移度有显著性差异（P〈0．05）。浸润深度不同时淋巴结转移度分别为T1期0（0／26），12期35．3％（178／504），T3期56．3％（401／712），T4期61．5％（240／390），浸润深度间经多个率的比较，有极显著性差异（P〈0．005）。病灶大小按〈3cm、3—5cm、〉5cm分类，其淋巴结转移度分别为54．4％（245／450）、50％（310／620）、47％（264／562），其差异无显著性（P〉0．05）。结论：胃癌分化程度越低、浸润深度越深，其胃周第二、三站淋巴结转移度越高，而病灶大小与淋巴结转移度的关系不肯定。由于国人胃癌患者就诊时以Ⅱ-Ⅳ期居多，因此，对分化程度低和／或浸润深度深者不管病灶大小，建议行D3淋巴结清除术，而非D2清除术。     

进展期胃癌淋巴结转移影响因素的分析

目的探讨影响进展期胃癌淋巴结转移的因素，指导选择合适的治疗方案。方法回顾性分析96例进展期胃癌患者临床病理资料与淋巴结转移的关系。结果肿瘤直径〉5cm、3cm〈肿瘤直径≤5cm的淋巴结转移率分别为90．5％（38／42）、78．4％（29／37）明显高于肿瘤直径≤3cm的29．4％（5／17）（P〈0．01）；侵及邻近组织和器官、穿透浆膜层而未侵及邻近组织及器官、侵及浆膜层的淋巴结转移率分别为91．7％（11／12）、77．8％（21／27）、89．7％（26／29），高于侵及肌层的50．0％（14／28）（19〈0．01或P〈0．05）。性别、年龄、肿瘤部位以及组织学类型间的淋巴结转移率没有显著差异。结论肿瘤大小、浸润深度是影响进展期胃癌淋巴结转移的因素，应根据肿瘤大小和浸润深度选择合适的治疗方案。     

MMP-9在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨MMP-9在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化技术SP法检测MMP-9基因蛋白在68例胃癌的表达情况，以20例非肿瘤性胃黏膜组织作对照。对随访14个月至13年的35例患者作了生存分析。结果68例胃癌组织MMP-9阳性表达率86．76％（59／158），对照组胃黏膜组织阳性表达率20．00％（4／20）。有淋巴结转移胃癌的MMP-9阳性表达率比无淋巴结转移者高，分别为95．65％、68．18％（P〈0．05）；侵及黏膜及黏膜下层、肌层和浆膜层胃癌的MMP-9阳性表达率分别为33．33％、91．30％、92．05％（P〈0．05）。MMP-9阳性者术后1、3、5、7、10年以上生存率分别为90．00％、56．67％、36．67％、10．00％和3．33％，MMP-9阴性患者术后1、3、5、7、10年以上生存率分别为100％、100％、80．00％、60．00％和40．00％。MMP-9阳性患者术后生存率比MMP-9阴性患者显著降低（P〈0.01）。结论MMP-9高表达促进肿瘤转移。MMP-9在胃癌的表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关；与患者年龄、性别无关。     

胃癌前哨淋巴结术中标识

目的:了解前哨淋巴结亚甲蓝显影对胃癌淋巴结转移的诊断价值。方法:术中向肿瘤边缘的正常胃壁浆膜下肌层、粘膜下层注射亚甲蓝,观察淋巴结显影的情况;切取各站淋巴结行病理检查。结果:术中进行淋巴结标识72例,成功检测出前哨淋巴结68例。术中病理检查,33例有淋巴转移。结论:前哨淋巴结术中能准确预测胃癌淋巴结转移状况。在手术治疗淋巴结转移阴性的胃癌患者中,前哨淋巴结术中标识有望免除常规淋巴清扫。     

亚甲蓝示踪法定位乳腺癌前哨淋巴结的评价

目的 评估亚甲蓝在乳腺癌前哨淋巴结活检（SLNB）中的应用价值。方法 对100例临床分期为T1-2N0M0的乳腺癌患者，术中用1%亚甲蓝注射在原发肿瘤周围进行腋淋巴结定位并前哨淋巴结切除；随即行乳腺癌根治或改良根治切除术，全部标本作病理学检查。结果 本组100例患者中78例发现了前哨淋巴结（SLN），占78%，发现前哨淋巴结的患者中40例（51.2%)有腋窝淋巴结癌转移，其中有3例SLN阴性，用亚甲蓝为示踪剂SLNB的准确率为96.1%(75/78)，假阴性率为7.5%(3/40)；SLN对腋窝淋巴结状况预测的敏感性为92.5%(37/40)；阳性预测值和阴性预测值分别为100%和90.2%。结论 亚甲蓝示踪法在探查乳腺癌前哨淋巴结估测癌转移，指导根治切除术范围具有临床应用价值。     

Radical resection of gastric carcinoma with pancreas and spleen preservation a nd functional cleaning of lymph nodes

Objective To study the clinical value of radical resection of gastric carcinoma with pancreas and spleen preservation (PSP) and functional cleaning of lymph nodes (LNs) of the spleen hillus and along the splenic artery. Methods Pancreas and spleen involvement was retrospectively reviewed among 439 cases of resectable carcinoma of the gastric cardia,gastric corpus and total stomach. During gastric surgery, 2 ml of methylene blue was injected into the subserosal space of the gastric cardia or corpus to observe the spread of lymphatic flow in 54 cases of gastric carcinoma. The metastatic rate of LNs in splenic hillus and along the trunk of the splenic artery (No10, No11), postoperative complications and survival rates were investigated in 63 gastric carcinoma patients that had received gastrectomy with pancreas and spleen preservation (PSP). These were compared with the pancreas preservation (PP) group and pancreas and spleen combined resection (PSR) group. Results Among these 439 cases, only 25 cases were observed with direct invasion to the pancreas (5. 7%), and 10 cases with direct invasion to the spleen (2. 3%). After pathological examination of the pancreatic body and tail, we found 22 cases with pancreas and spleen combined resection, 4 cases (18. 2%, 4/22) with direct invasion of the capsule and 2 with invasion to the superficial parenchyma (9. 1%, 2/22), without metastasis to the lymph nodes within the pancreas and spleen. The metastatic rate of No10,No11 lymph nodes were 17. 5% (11/63) and 19. 1% (12/63) in the PSP group, 20. 8% (45/216) and 25%(54/216) in the PP group, and 20% (6/30) and 23. 3% (7/30) in the PSR group. There were no statistically significant differences (P>0. 05). Injection of methylene blue into the subserosal space of the stomach did not diffuse into the spleen or pancreatic parenchyma. Postoperative complications, diabetes and mortality in PSP (0%,0%,0%) were lower than in PP (4. 2%, 0. 9%, 0. 9%) or PSR (40%,10%,3. 3%). The 5-year survival rate (5-YSR) and 10-YSR in PSP (57. 5%, 52. 0%) were higher than in PSR (37. 5%,30. 0%). Those patients with stage Ⅱ and Ⅲa treated by PSP, improved markedly. Conclusions The surgical procedure of pancreas and spleen preservation for gastric cancer is a safe and organ function protected method. Postoperative complications were lower and survival rates were higher , the radicality was not reduced. These results indicate that PSP is preferred in patients with gastric carcinoma of stage Ⅱ or Ⅲa.     

免疫组化法和RT-PCR法检测胃癌淋巴结微转移

目的 :应用免疫组化方法和RT PCR方法检测常规病理检查淋巴结阴性胃癌之淋巴结微转移 ,比较两种检测方法的敏感性同时探讨检测胃癌淋巴结微转移的临床意义。方法 :采用CEA单克隆抗体免疫组织化学方法和CEAmRNART PCR方法分别检测 11例常规病理检查淋巴结阴性胃癌的 2 0 5枚淋巴结。结果 :CEA单克隆抗体免疫组织化学法检出 18枚 (8.8% )微转移淋巴结 ,而CEAmRNART PCR法共检出 46枚 (2 2 .4% )微转移淋巴结 ,两者比较差异显著 (P <0 .0 1)。 11例患者中有 6例存在淋巴结微转移 ,此 6例患者的重新TNM分期均有所上升。随访中发现有 2例微转移阳性患者分别于根治术后第 6、9个月出现复发。结论 :应用CEA单克隆抗体免疫组织化学方法或CEAmRNART PCR法可以检测出常规病理检查遗漏的胃癌淋巴结微转移灶。而且RT PCR法检测胃癌淋巴结微转移较免疫组织化学法更为敏感。检测常规病理检查淋巴结阴性胃癌的淋巴结微转移 ,有助于临床准确分期 ,判断预后及指导治疗。     

胃癌前哨淋巴结活检染色剂选择的实验研究

目的 用亚甲蓝(methylene blue, MB),专利蓝(patent blue, PB)及两者混合为染色剂,进行动物实验研究,为临床挑选合适的染色剂提供依据. 方法 24只成年大耳家兔随机分为3组,观察3种不同的染色剂在胃浆膜下注射后到达前哨淋巴结(sentinel lymph node, SLN)及下一站淋巴结的时间,染色淋巴结枚数以及褪色时间.结果 在兔的胃浆膜下分别注射了亚甲蓝,专利蓝及两者联合的染色剂后到达SLN的平均时间为7.56s,9.13s,8.69s,专利蓝与联合组之间没有统计学意义(P=0.435),亚甲蓝组时间则短于专利蓝(P=0.000)和两者联合组(P=0.009).到达第2站淋巴结的时间分别为19.32s,31.56s,23.34s.第2站淋巴结染色时间上亚甲蓝组快于联合组(P=0.017),联合组快于专利蓝组(P=0.000).各组在检出前哨淋巴结的数目上没有明显区别(P>0.05).褪色时间专利蓝为13.06min,两者结合组为82.13min,亚甲蓝组在观察了120min后没有明显褪色.组间比较差异明显(P=0.000).结论 亚甲蓝和专利蓝各有其优缺点,实验中两种联用可以取得互补的作用,是一种较理想的示踪剂.     

亚甲蓝法在乳腺癌前哨淋巴结活检中的应用

目的:探讨亚甲篮作为示踪法进行前哨淋巴结活检在乳腺癌治疗中的应用价值。方法:对已确诊的172例临床腋窝淋巴结阴性的乳腺癌患者术中亚甲蓝乳晕周围皮下注射后行腋窝前哨淋巴结切除,送冰冻病理检查,再行乳腺癌改良根治术,并常规腋窝淋巴结清扫,术后病理石蜡切片检查前哨淋巴结及手术切除标本。结果:167例(97.1%)成功实施SLNB,5例(2.9%)术中未能发现SLN,立即改行腋窝淋巴结清扫术(ALND)。行SLNB的167例中,术中冰冻报告SLN癌转移21例,即行ALND;146例冰冻检查SLN未见癌转移。5例术后HE染色检查发现SLN存在1枚微转移淋巴结,4例接受ALND,1例拒绝行腋窝淋巴结清扫。142例SLNB代替ALND者中位随访时间18个月(3～64个月),均未发现腋窝淋巴结转移。结论:亚甲蓝法SLNB安全、有效、简便易行,SLNB阴性患者,可以替代ALND。     

早期宫颈癌前哨淋巴结的检测及术中诊断

目的探讨早期宫颈癌患者前哨淋巴结（SLN）检测的快速术中诊断方法和临床价值。方法采用联合放射性同位素和蓝染法对30例早期宫颈癌患者行SLN检测,按FIGO分期,30例患者中IBl期14例,ⅡA期16例。于术前在宫颈3′、6′、9′、12′各注射^99mTc-硫胶体0．4mci／0．4ml,开腹后在宫颈4个相同部位注射亚甲蓝各1ml,术中识别SLN,即蓝染淋巴结和／或热点淋巴结,并原位切除SLN,然后行经腹广泛子宫切除＋盆腔淋巴切除术。术中行印片细胞学和快速冰冻检查以检测SLN是否转移,比较SLN术中印片细胞学及快速冰冻检查和HE染色检查结果。结果30例患者中29例检出SLN,检出率为96．7％,HE检查示盆腔淋巴结转移者9例。检出SIN的29例中8例SLN阳性,20例SLN阴性,1例SLN假阴性。SLN检测的灵敏性为88．9％、准确性为96．6％,假阴性率为11．1％。SLN术中快速冰冻和印片细胞学检查的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为92．3％、100％、98．9％、100％、98．8％和92．3％、97．6％、96．8％、85．7％、98．8％。结论冰冻切片和印片细胞学病理检查是术中快速诊断SLN转移状态的可选择方法;SLN检测对宫颈癌盆腔淋巴结转移具有预测性。     

结直肠癌周围淋巴结CK20蛋白检测的临床应用研究

目的:探讨免疫组化(IHC)检测结直肠癌区域淋巴结微转移的细胞角蛋白20(CK20)对结直肠癌术后临床分期、预后判断和治疗干预的可行性和临床应用价值。方法:选取40例常规HE病理检查淋巴结转移阴性的结直肠癌患者为研究对象,术前抽取外周血行循环肿瘤细胞(CTCs)测定;术中、后沿亚甲蓝染剂标识的区域淋巴结按4站次淋巴结分别摘除、放置并标记,应用IHC技术检测淋巴结中CK20,统计淋巴结微转移患者的阳性例数及阳性率及其在各不同站次的分布情况,并对HE、CTC和IHC CK20方法检测的结果进行比较。结果:淋巴结CK20测定与HE染色法的淋巴结微转移阳性检出率间差异有统计学意义(P<0.01);不同站次间淋巴结微转移阳性检出率存在统计学差异(P<0.01或P<0.05);全组CK20检测有存在淋巴结微转移11例(11/40,27.5%);7例患者TNM分期提高,HE染色法重新分期率为17.5%(7/40)。全组CTC检测显现阳性7例,阳性表达率为17.5%(7/40),其中6例对应于IHC淋巴结CK20(+)患者,1例为IHC淋巴结CK20(-)患者,且CTCs细胞学分型表达与结直肠癌肿瘤分化程度、肿瘤浸润深度呈正相关性。结论:CK20免疫组化法是检测淋巴结微转移可靠而敏感的方法,结合亚甲蓝染色法显影淋巴结可简便、快速地发现微转移灶,与CTC检测联用可达互补效能,进一步提高微转移检出率,减少假阴性发生。