人结直肠癌干细胞休眠与增殖阶段细胞形态学的研究

目的初步研究人结直肠癌干细胞休眠与增殖阶段细胞形态的变化。方法流式细胞仪从新鲜人结直肠癌组织中分选EpCAMhigh／CD44＋／CD133＋细胞亚群,并通过裸鼠（NOD／SCID）成瘤实验鉴定其干细胞特性：采用三维培养,WST．1绘制人结直肠癌干细胞的生长曲线;流式细胞仪测定P27及Ki一67的表达水平,区分人结直肠癌干细胞休眠和增殖时相;细胞免疫荧光显示休眠期与增殖期人结直肠癌干细胞形态的变化。结果EpCAMhigh／CD44＋／CDl33‘细胞亚群在人结直肠癌组织中占1．6％．经NOD／SCID成瘤实验证实为人结直肠癌干细胞。人结直肠癌干细胞生长曲线呈“S”型;前3d生长缓慢,细胞为静止阶段（休眠期）,P27表达水平逐渐增加,Ki．67表达偏低;从第4d开始,细胞进入增殖期,Ki-67表达逐渐增加,P27表达降低。细胞免疫荧光染色显示：休眠期人结直肠癌干细胞圆而大,伪足少;而增殖期细胞伪足增多,呈现增殖和侵袭的状态。结论肿瘤的复发、转移可能与肿瘤干细胞的生长状态发生改变有一定关系;人结直肠癌干细胞增殖期与休眠期相比。呈现出明显增殖和侵袭能力：这为治疗人结直肠癌及其他肿瘤的复发和转移提供了新的切人点。     

胃癌前哨淋巴结活检染色剂选择的实验研究

目的 用亚甲蓝(methylene blue, MB),专利蓝(patent blue, PB)及两者混合为染色剂,进行动物实验研究,为临床挑选合适的染色剂提供依据. 方法 24只成年大耳家兔随机分为3组,观察3种不同的染色剂在胃浆膜下注射后到达前哨淋巴结(sentinel lymph node, SLN)及下一站淋巴结的时间,染色淋巴结枚数以及褪色时间.结果 在兔的胃浆膜下分别注射了亚甲蓝,专利蓝及两者联合的染色剂后到达SLN的平均时间为7.56s,9.13s,8.69s,专利蓝与联合组之间没有统计学意义(P=0.435),亚甲蓝组时间则短于专利蓝(P=0.000)和两者联合组(P=0.009).到达第2站淋巴结的时间分别为19.32s,31.56s,23.34s.第2站淋巴结染色时间上亚甲蓝组快于联合组(P=0.017),联合组快于专利蓝组(P=0.000).各组在检出前哨淋巴结的数目上没有明显区别(P>0.05).褪色时间专利蓝为13.06min,两者结合组为82.13min,亚甲蓝组在观察了120min后没有明显褪色.组间比较差异明显(P=0.000).结论 亚甲蓝和专利蓝各有其优缺点,实验中两种联用可以取得互补的作用,是一种较理想的示踪剂.     

胰腺假性囊肿15例临床观察

目的:探讨胰腺假性囊肿的诊断方法和治疗效果。方法:对2006年1月~2008年12月收治的15例胰腺假性囊肿的诊断和治疗效果进行回顾分析。结果:保守治疗2例,内引流6例,外引流5例,肿块切除2例。无手术死亡,3年随访无复发。结论:B超和CT扫描是主要的诊断方法,MRCP可了解胰管病变和囊肿关系。大多数患者需外科手术,囊肿空肠Roux-Y吻合内引流术是主要的手术方式。     

合并脾功能亢进原发性肝癌双介入治疗利弊和指征

目的 :探讨肝、脾动脉双栓塞治疗伴脾功能亢进原发性肝癌的利弊和指征。方法 :经股动脉穿刺分别行肝、脾动脉的化学灌注栓塞和明胶海绵栓塞为观察组 ,并对比观察单纯行肝动脉化学灌注栓塞术组 (对照组 )对血细胞、肝功能、免疫状况、生活质量及平均住院日等方面的影响。结果 :观察组 6 8例治疗后血细胞均见不同程度增高 ,白细胞分布范围 (5 .0～ 2 0 .0 )× 10 9/ L,血小板多在原水平呈现倍增 ;对照组 6 0例治疗后均出现白细胞和血小板减少 ,两组肝功能、免疫指标、KPS评分等未见明显异常 ,平均住院日分别为 16 .2天和 31.4天。结论 :肝脾动脉双栓塞对合并脾功能亢进原发性肝癌有较好疗效 ,特别是外周血白细胞、血小板明显减少者 ,为综合治疗赢得了时间 ,但对老年患者和肝功能 Child分级差者慎用     

前哨淋巴结活检在早期胃癌中的应用及微转移检测

目的:探讨前哨淋巴结活检(SLNB)技术在早期胃癌中的应用及前哨淋巴结(SLN)微转移检测的临床意义。方法:34例早期胃癌术中亚甲蓝定位活检前哨淋巴结,术后行常规HE病理和角蛋白单克隆抗体AE1/AE3免疫组化(ELIVISION二步法)检查。结果:34例中33例检出SLN,检出率为97.1%。由SLN状态预测胃周淋巴结转移情况的准确率为93.9%(31/33),敏感性为88.9%(16/18),特异性为100.0%(16/16),假阴性率为11.1%(2/18)。免疫组化法与常规HE法对SLN转移的检出率相比较,差异有统计学意义(P=0.034),免疫组化法共检出12枚/8例SLN存在微转移现象。结论:SLN能较准确反映早期胃癌的淋巴结转移状况,免疫组化法较常规HE病理检查更为敏感,AE1/AE3免疫组化法能提高SLN微转移的检测,对确定临床分期、诊疗及判断预后有积极临床意义。     

经胆囊管胆道镜胆总管探查及取石术的临床应用

目的探讨经胆囊管胆道镜胆总管探查及取石术的有效方法和适应证。方法选择疑有胆总管结石及有探查指征的61例患者,在胆囊切除时将胆囊管残端稍为留长,以便于提取牵拉。选用OLYMPUS—P20型胆道镜沿胆囊管轻柔插入,如胆囊管尚不够粗,可先予扩张。胆道镜发现结石后,以取石网篮套取拉出。如结石较大难以通过胆囊管者则常规切开胆总管取石。镜检及取石结束后经胆囊管注入庆大霉素8-16万单位后予胆囊管结扎。结果29例在胆总管下端发现结石,其中24例在胆道镜下予取石网套取除,5例因结石较大常规切开胆总管取除,32例未发现结石。61例患者术后均恢复良好,术后无胆漏、胆道出血发生。B超随访或术后T管造影无结石残留。结论经胆囊管行胆总管探查及取石术是一项较为有效的微创技术,可使部分患者减少创伤,缩短治疗周期,但其主要适用于胆总管继发性小结石同时伴胆囊管增粗者。     

三氧化二砷诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及对OPN表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）治疗肝癌的可行性及机制。方法将一定浓度梯度的As2O3与人肝癌细胞株SMMC-7721孵育后,采用MTT法、荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞增殖与凋亡变化,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝癌细胞株中骨桥蛋白基因（OPN mRNA）表达水平。结果As2O3作用后SMMC-7721细胞生长明显受抑,且呈时间-浓度依赖性;荧光显微镜下细胞呈典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见“凋亡峰”,细胞周期阻滞于G2／M期;细胞OPN mRNA表达阳性,OPN mRNA表达水平明显下调。结论As2O3体外能有效抑制肝癌细胞株生长;其机制可能为诱导细胞凋亡、下调OPN mRNA表达。     

143例急性胆源性胰腺炎治疗的临床分析

目的：探讨急性胆源性胰腺炎（BAP）的临床诊断和手术时机。方法：2005年6月—2008年12月之间收治的143例BAP患者,根据其是否有胆道梗阻及胰腺是否水肿或坏死分为非梗阻水肿型、非梗阻坏死型、梗阻水肿型以及梗阻坏死型4型,对其治疗方法和临床疗效进行总结分析。结果：非梗阻水肿型BAP93例和梗阻水肿型BAP28例均治愈。非梗阻坏死型BAP11例,治愈10例,死亡1例;梗阻坏死型BAP11例,治愈7例,死亡4例。结论：手术时机对胆源性急性胰腺炎患者的预后有重大影响,早期宜行积极的保守治疗,根据其具体分型制定个体化治疗方案是减少并发症、提高治愈率的关键。     

经胆囊管胆道镜胆总管探查及取石术的临床应用

目的 探讨经胆囊管胆道镜胆总管探查及取石术的有效方法 和适应证.方法 选择疑有胆总管结石及有探查指征的61例患者,在胆囊切除时将胆囊管残端稍为留长,以便于提取牵拉.选用OLYMPUS-P20型胆道镜沿胆囊管轻柔插入,如胆囊管尚不够粗,可先予扩张.胆道镜发现结石后,以取石网篮套取拉出.如结石较大难以通过胆囊管者则常规切开胆总管取石.镜检及取石结束后经胆囊管注入庆大霉素8-16万单位后予胆囊管结扎.结果 29例在胆总管下端发现结石,其中24例在胆道镜下予取石网套取除,5例因结石较大常规切开胆总管取除,32例未发现结石.61例患者术后均恢复良好,术后无胆漏、胆道出血发生.B超随访或术后T管造影无结石残留.结论 经胆囊管行胆总管探查及取石术是一项较为有效的微创技术,可使部分患者减少创伤,缩短治疗周期,但其主要适用于胆总管继发性小结石同时伴胆囊管增粗者.