人肝癌中p57kip2 mRNA及其蛋白表达研究

【目的】研究p57kip2基因在人体肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)不同阶段的mRNA和蛋白表达情况,以探讨HCC发生的分子生物学机制。【方法】运用原位分子杂交和免疫组化技术分别检测30例正常肝组织、30例癌周肝硬化和30例肝癌组织中p57kip2mRNA及P57kip2蛋白的表达情况。【结果】p57kip2mRNA表达:正常肝组织组未见表达,癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率分别为33.33%和16.67%。肝癌组分化好和分化差阳性表达率之间差异有统计学意义,相关分析呈正相关。P57kip2蛋白表达:正常肝组织组未见表达;癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率分别为56.67%和63.33%。肝癌组分化好者与分化差者阳性表达率之间差异有统计学意义,相关分析呈正相关。【结论】p57kip2基因mRNA和蛋白表达缺失或下降与HCC分化程度低呈正相关,提示p57kip2基因的失活可能是进展期HCC的晚期分子事件,并可能是一个新的预后指标。     

p57 kip2在大肠癌中的表达及其意义

目的:探讨细胞周期调控抑制因子p57kip 2在大肠癌的发生、发展及转移中的作用。方法:运用免疫组织化学S-P法和原位杂交技术,检测p57kip 2在基因和蛋白水平上在60例大肠癌组织、23例正常肠组织中的表达。结果:1.p57kip 2蛋白在大肠癌组织中的阳性表达显著低于正常肠组织(t=14.711,P<0.01),并与大肠癌组织的分化程度、淋巴转移(P<0.01)有关;在浸润深度中无统计学意义(P>0.05);2.p57kip 2mRNA在大肠癌组织中的阳性表达显著低于正常肠组织(t=10.395,P<0.01),并与癌组织的分化程度、淋巴转移(P<0.01)有关。结论:p57kip 2的低表达可能在大肠癌的发生、发展及转移中发挥重要作用。     

p57kip2在膀胱癌的表达及意义

目的 :探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子 p5 7kip2 蛋白在膀胱癌的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化技术检测p5 7kip2 蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)在 5 0例膀胱癌和 14例正常膀胱黏膜中的表达。结果 :p5 7kip2 蛋白阳性表达率在膀胱癌组织中为 4 6 % (2 3/ 5 0 ) ,显著低于正常膀胱黏膜组织 78.6 % (11/ 14 ) (χ2 =4 .6 6 0 ,P <0 .0 5 ) ,并与膀胱癌组织病理分级、生存率显著相关 (χ2 =8.5 92 ,P <0 .0 5 ;χ2 =4 .5 4 6 ,P <0 .0 5 ) ,但与临床分期无关 (χ2 =0 .5 73,P >0 .0 5 )。PCNA阳性表达率在膀胱癌组织中为 6 0 % (30 / 5 0 ) ,显著高于正常膀胱黏膜组织的 0 % (0 / 14 ) (χ2 =15 .812 ,P <0 .0 1) ,并与膀胱癌组织病理分级 ,临床分期和生存率显著相关 (P <0 .0 5 )。p5 7kip2 和PCNA蛋白的表达呈负相关 (r =- 0 .4 4 3,P <0 .0 1)。结论 :p5 7kip2 的低表达与膀胱癌的发生发展密切相关 ,可以作为判断膀胱癌不良预后的参考指标。     

鼻咽癌组织p16蛋白、p27kip1表达与CT表现的关系

目的研究p16蛋白、p27kip1(kinase inhibition protein 1,kip1)表达与鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)CT表现的关系.方法回顾性分析确诊的47例鼻咽癌患者CT表现,应用免疫组化法检测其与18例相应癌旁组织p16蛋白、p27kip1表达状况.结果 NPC中p16蛋白、p27kip1表达阳性率分别为40.43%、34.04%,癌旁组织中表达阳性率分别为88.89%、83.33%,两组差异有显著性(P＜0.01).p16蛋白、p27kip1表达缺失均与颅内转移、骨远处转移密切相关(均P＜0.05),均与咽旁间隙浸润无明显关系(P＞0.05).结论 p16蛋白与p27kip1表达缺失与NPC发生及颅内转移、骨远处转移有密切关系.     

p57kip2和cyclin D2在人脑胶质瘤中的表达和临床意义

目的:探讨p57kip2蛋白和Cyclin D2蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况及其临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测p57kip2,Cyclin D2在55例人脑胶质瘤和10例正常脑组织中的表达.结果:在55例胶质瘤中,p57kip2蛋白阳性率为38.2%(21/55),低于正常脑组织(80%,P＜0.05).低度恶性(Ⅰ～Ⅱ级)与高度恶性(Ⅲ～Ⅳ级)间及不同生存时间组间阳性率差异有统计学意义(P＜0.05).Cyclin D2蛋白阳性率为52.7%(29/55),高于正常脑组织(0%,P＜0.01).脑胶质瘤不同恶性程度组间阳性率差异有统计学意义(P＜0.05),不同生存时间组间差异无统计学意义(P＞0.05).p57kip2蛋白的表达与Cyclin D2蛋白的表达无相关(P＞0.05).结论:p57kip2蛋白和Cyclin D2蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用.且与肿瘤的分化程度,预后相关.     

p57kip2和cyclin E在人宫颈癌中的表达及其与临床病理及预后的关系

目的:探讨抑癌基因p57kip2和细胞周期素E(cyclin E)在宫颈癌发生发展中的作用及其与临床病理及预后的意义. 方法: 采用免疫组化二步法检测p57kip2和cyclin E在48例宫颈癌、13例宫颈上皮内瘤变(CIN)和15例正常宫颈组织中的表达. 结果: p57kip2在宫颈癌中的阳性表达率为21%,低于正常组(93%)和CIN组(77%),差异有显著性意义(P＜0.01). cyclin E在宫颈癌中的阳性表达率为77%,明显高于正常组(13%),差异有显著性意义(P＜0.01). 在宫颈癌组织中p57kip2和cyclin E的表达呈负相关(r=-0.597, P＜0.01). p57kip2的表达与病理分化程度及肿瘤直径有关(P均＜0.05);cyclin E的表达与病理分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.01,P＜0.05). Kaplan-Meier单因素分析宫颈癌患者生存时间与p57kip2,cyclin E阳性表达有关(P＜0.01,P＜0.01). 结论: p57kip2的低表达或缺失和/或cyclin E的高表达可能在宫颈癌发生发展中起重要作用,与不良预后有关,两者在宫颈癌细胞周期调控中可能存在着负反馈调节机制.     

大肠癌中p53和PCNA表达水平的研究

目的 :研究大肠癌p53蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达及与肿瘤的浸润、转移的关系。方法 :应用免疫组化SP法 ,检测并观察 6 4例大肠癌p53和PCNA的表达水平。结果 :大肠癌中 p53阳性率为 57.8% ;p53表达水平与性别、年龄及肿瘤部位、组织学类型和肿瘤分化程度无关 (P >0 .0 5) ;与浸润深度和淋巴结转移有关 (P <0 .0 5)。大肠癌中PCNA阳性率为 85.9% ;PCNA表达水平与肿瘤组织学类型、分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关 (P <0 .0 5)。结论 :p53和PCNA过表达在大肠癌浸润转移和细胞增殖过程中起重要作用 ,检测 p53和PCNA对于判断大肠癌的恶性程度、预测其淋巴结转移趋势有重要价值。     

宫颈癌组织中p57KIP2及p27KIP1在表达及预后的临床观察

目的探究在宫颈癌患者组织切片中P57KIP2及P27KIP1在表达及预后间的相互关系。方法截取我院2008年5月至2010年12月共50例宫颈癌组织,20例上皮内瘤变组织,20例正常组织行免疫组化结果比较分析。结果 p57KIP2、p27kip1两者正常组、瘤变组、肿瘤组阳性率分别为：95%、85%、14%;90%、85%、20%。p57KIP2、p27kip1随着患者病变处恶性程度的逐渐性升高及肿瘤直径的增大呈现降低,经统计学检验提示,P均〈0.05,差异具统计学意义。结论 p57KIP2及p27KIP1在宫颈癌病情发展及临床检测中具有重要作用。     

非小细胞肺癌中p53与PCNA的表达及临床意义

目的:探讨p53蛋白、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化技术(SP法)对72例NSCLC组织及10例正常支气管黏膜组织进行p53蛋白与PCNA的检测。结果:p53蛋白与PCNA在NSCLC组织中的表达明显高于正常组织,在NSCLC组织中的阳性表达率分别为58.3%(42/72),91.7%(66/72);PCNA强阳性表达率为58.3%(42/72);p53阳性表达率及PCNA强阳性表达率均与肺癌组织的分化程度、肿瘤组织大小、淋巴转移等因素密切相关,差异具有显著性(P<0.05);p53蛋白阳性表达与PCNA阳性表达呈正相关(P<0.05)。结论:p53蛋白及PCNA的表达与肺癌的发生发展过程并与分化程度及有否淋巴结转移有关。     

p57^kip2和ki67在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨p57kip2和ki67在胃癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学Envision二步法检测40例胃癌组织的p57kip2和ki67表达水平。结果：p57kip2和ki67在胃癌组织中的阳性表达率分别为35（14/40）和87.5%（35/40）,两者的表达与胃癌组织的病理组织学分级及临床分期有关（P〈0.05）,而与组织学类型无关（P〉0.05）;p57kip2与ki67表达强度呈负相关,相关系数r=-0.093（P〈0.01）。结论：p57kip2表达下调及ki67表达上调在胃癌的发生、发展过程中发挥着重要的作用。     

肝癌组织survivin的表达与凋亡,增殖和p53的关系

目的：研究肝癌survivin的表达与细胞增殖、凋亡以及053表达的关系．方法：应用免疫组化法检测原发性肝癌组织42例、癌旁肝硬化组织34例、正常肝组织10例中survivin，p53，增殖细胞核抗原（PCNA）的表达．应用TUNEL法检测细胞凋亡．结果：在42例肝癌组织中survivin阳性30例（71．4％），显著高于癌旁肝硬化组织（11．8％）和正常肝组织（0％，P〈0．001）．肝癌中survivin蛋白的高表达与病理分级（P=0．003），p53蛋白水平（P=0．008）、细胞增殖凋亡比（P=0．001）及患者生存时间（P=0．002）存在显著相关性，而与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、门脉癌栓（局部转移）无显著相关（P〉0．05）．结论：肝癌组织survivin高表达在打破肝癌细胞的增生和凋亡之间的平衡中起着重要作用．Survivin可能抑制p53阴性肝癌细胞的凋亡，在肿瘤细胞的进一步恶性转化中发挥作用．     

Expression of p57kip2 and cyclinE proteins in human pancreatic cancer

Objective To investigate the effects of p57kip2 and cyclinE proteins on the genesis and progression of human pancreatic cancer. Methods The expression of p57kip2 and cyclinE proteins in tumor tissues and adjacent tissues of pancreatic cancer in 32 patients was detected by SP immunohistochemical technique. Results The p57kip2 protein positive-expression rate in tumor tissues of pancreatic cancer was 46.9%, which was lower than that in adjacent pancreatic tissue (P&lt;0.05). The p57kip2 protein positive-expression correlated significantly with tumor cell differentiation (P&lt;0.05) and did not correlate significantly with lymph node metastasis (P&gt;0.05). The cyclinE positive-expression rate in tumor tissues was 68.8%, which was higher than that in adjacent pancreatic tissues (P&lt;0.05). The cyclinE positive-expression also correlated significantly with tumor cell differentiation and lymph node metastasis (P&lt;0.05). The cyclinE protein positive-expression rate in the tumor tissues of the p57kip2 protein positive-expression group was lower than that in the p57kip2 protein negative-expression group, and there were no significant correlation between the two groups (r= -0.112, P＞0.05).Conclusion Decreased expression of the p57kip2 protein and/or over-expression of the cyclinE protein may play an important role in the genesis and progression of human pancreatic cancer.     

Expression of Survivin, p53 and its relationship with apoptosis, proliferation in hepatocellular carcinoma（HCC）

Objective:To investigate the expression of Survivin p53 and its relationship with apoptosis、proliferation in hepatocellular carcinoma(HCC). Methods:The expression of Survivin, p53 and the proliferation of tumor cells marked by proliferation cell nuclear antigen (PCNA) in 42 cases of HCC were assessed by immunohistochemical method. TUNEL was used to detect apoptosis. Results:Survivin protein was expressed in 30 of 42 cases of HCC(71.4%) and in 4 of 34 cases of adjacent cirrhosis tissues(11.8%). Expression of Survivin protein was negative in 10 cases of normal tissues. Survivin protein positive expression rate in HCC was significantly higher than adjacent cirrhosis tissues and normal tissues(P < 0.001). The increased Survivin protein expression in cancer was significantly associated with histological grade(P = 0.003), p53 protein(P = 0.013), survival time(P < 0.05) and the ratio of proliferative index to apoptotic index(P < 0.01), but was not significantly correlated with age, sex, clinical stage, tumor size, metastasis, AFP, HBs-Ag(P > 0.05).Conclusion:There is a marked increased expression of Survivin in HCC, which may play an important role in breaking the balance of proliferation and apoptosis of HCC cells. The correlation between Survivin and p53 expression in HCC indicates that cooperation between Survivin and p53 plays a certain role in occurrence and /or development of HCC.     

原发性肝细胞癌癌组织中p33ING1b与p53基因的表达

目的研究p33ING1b与p53蛋白在原发性肝细胞癌中表达的相关性及ING1b基因在原发性肝细胞癌中的突变率.方法应用免疫组织化学SP方法检测了57例原发性肝细胞癌癌组织、51例癌旁肝组织及12例正常肝组织中p33ING1b和p53蛋白的表达,并分析了原发性肝细胞癌癌组织中乙肝病毒(HBV)的感染率;应用聚合酶链式反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测了28例配对癌及癌旁肝组织中ING1b基因两个外显子的突变情况,对有异常泳动条带的DNA片段分别克隆测序.结果在57例原发性肝细胞癌癌组织中,p33ING1b、p53蛋白的阳性率分别为42.1%和57.9%,p33ING1b、p53表达均呈阳性者有19例(33.3%),且两者在癌组织中阳性分布区域相同;p33ING1b蛋白表达与p53蛋白表达在癌组织中呈显著正相关(r=0.783, P<0.01);配对癌旁肝组织及正常肝组织中p53蛋白表达均为阴性,p33ING1b蛋白在13例癌旁肝组织及2例正常肝组织中呈弱阳性表达;在57例原发性肝癌组织中有35例(61.4%)HBV X蛋白呈阳性,其病理类型均为肝细胞肝癌,在51例癌旁肝组织中检出HBV X蛋白阳性者39例(76.47%),癌组织中HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关(P<0.01);PCR-SSCP结果表明,ING1b基因在原发性肝细胞癌中突变率较低为7.1%(2/28).结论 p33ING1b、p53蛋白在原发性肝细胞癌中的表达呈显著正相关,p33ING1b的存在可能还有其他不依赖p53蛋白的途径;HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关;基因突变不是p33ING1b丧失抑癌功能的主要因素.     

应用组织芯片技术研究Skp2、p27 kip1在肾细胞癌中的表达及意义

目的 检测S期激酶相关蛋白2(Skp2)和抑癌基凶p27kip1在肾细胞癌(RCC)中的表达,探讨其与肾细胞癌生物学特征的关系及意义.方法 采用组织芯片技术及免疫组化SP法检测Skp2和p27kip1在80例肾细胞癌组织和40例癌旁正常肾组织中的表达,并做统计学分析.结果 (1)Skp2在肾细胞癌中的表达率高于正常肾组织(P=0.025);随肿瘤恶性程度增加,Skp2阳性表达率升高(P=0.002),其表达率与肾癌患者的年龄、性别、临床分期、淋巴结转移及肿瘤大小无关(P>0.05).(2)p27kpi1在肾细胞癌中的表达率低于正常肾组织(P=0.007);p27kip1阳性表达率与肿瘤分级及临床分期呈负相关((P<0.05),与肾癌患者的年龄、性别、淋巴结转移及肿瘤大小无关(P>0.05).(3)Skp2与p27kip1表达呈显著负相关(r=-0.273,P=0.014).结论 肾细胞癌中Skp2蛋白的过度表达与p27kip1蛋白降解增强有关,提示Skp2可能在肾细胞癌发生中扮演着重要角色.     

肝细胞肝癌和肝硬变组织中P21~(WAF1)与P53,PCNA表达之间的关系

目的：分析在肝细胞肝癌（HCC）和肝硬变组织中P21WAF1与P53，PCNA表达之间的关系．方法：用免疫组织化学的方法分别检测了102例HCC和肝硬变组织中上述三种蛋白的表达，并用免疫组化双标记的方法同时检测了P21WAF1和P53，P21WAF1和PCNA的分布．结果：38例肝硬变组织中，均为P53阴性而P21WAF1阳性或弱阳性．64例HCC组织中，P21WAF1阳性、弱阳性和阴性分别占P53阳性组的0，21．1％和78．9％；占P53阴性组的46．7％，24．4％和28．9％．31例肝硬变组织中，P21WAF1阳性、弱阳性组织平均PCNA阳性细胞百分率分别为14％和30％．56例HCC组织中，P21WAF1阳性、弱阳性和阴性组织平均PCNA阳性细胞百分率分别为16％，39％和49％．免疫组化双标记证实了P53阳性的肝癌组织P21WAF1阴性，而癌旁则恰恰相反；未见P21WAF1与PCNA之间有明确的定位关系．结论：HCC中，P53的异常改变是引起P21WAF1表达减弱或消失的主要原因之一；P21WAF1可以抑制肝细胞和HCC细胞的增殖活性．     

肝癌组织中PTEN的表达及其与p53、细胞增殖和凋亡的关系

目的:研究肝细胞肝癌(HCC)组织中PTEN的表达与细胞增殖及凋亡的关系及其与p53的相关性,明确PTEN是否参与HCC的发生、发展. 方法:利用免疫组织化学技术检测47例经术后病理学证实的HCC组织、42例癌旁肝组织及10例健康肝组织中PTEN,p53,增殖性核抗原(PCNA)的表达;用TUNEL法检测HCC中细胞凋亡水平. 结果:10例正常肝组织、42例癌旁肝组织中PTEN全部阳性表达(100%);53%(25/47)的HCC组织PTEN蛋白表达缺失. PTEN的表达与肝癌细胞的增殖指数和凋亡指数无相关性,与肝癌的浸润转移具有相关性,与p53的表达有相关性. 结论:肿瘤抑制基因PTEN和p53有相互作用. PTEN蛋白表达缺失可能在HCC的进展过程中发挥主要作用.     

肺腺癌患者组织中肿瘤标志物P16和P53蛋白的表达及意义

目的:研究肺腺癌患者组织中P16和P53蛋白的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学方法对57例不同临床病理参数肺腺癌患者肺腺癌组织和癌旁组织中p16和p53基因表达产物进行检测,并进行比较。结果:肺腺癌组织中P16蛋白的阳性率为35.1%,明显低于癌旁组织59.6%;P53蛋白的阳性率为80.7%(46/57),明显高于癌旁组织42.1%(P<0.05)。P16和P53蛋白表达与肺腺癌分化程度、浸润深度及淋巴结有无转移有关(P<0.05)。结论:肺腺癌组织P16和P53蛋白的异常表达可能与其发生、发展和预后有关。