猪肝细胞膜蛋白结构与异种移植细胞免疫反应原性的关系

探讨猪肝细胞膜蛋白结构与异种移植细胞免疫反应原性的关系。方法：肝衰大鼠分为冻存细胞移植值,新鲜细胞移植组和对照组,腹腔内分别移植新鲜和冻存的猪肝细胞,记录鼠的存活率。圆二色光谱测定新鲜和冻存猪肝细胞的膜蛋白构象,抗体依赖性细胞毒性试验检测肝细胞破损情况。     

深低温在肝细胞移植中减轻免疫排斥反应的作用

目的：探讨深低温减轻肝细胞移植免疫排斥作用。方法：抗体依赖性细胞毒性（ＡＤＣＣ）检测猪肝细胞溶解率，圆二色测定其膜蛋白构象。移植新鲜或冻存猪肝细胞于肝衰鼠腹腔内，并行ＳＤ鼠冻存肝细胞同种移植，观察鼠存活率。结果：ＡＤＣＣ显示新鲜细胞数０．２４×１０５，冻存细胞０．６８×１０５；新鲜肝细胞膜蛋白中α螺旋为４７．５％，液氮处理后，α螺旋增至５６．５％。肝衰鼠３３．３％存活，新鲜猪肝细胞移植鼠６６．７％；移植冻存猪肝细胞后，存活率显著提高到９４．１％，但与ＳＤ鼠冻存肝细胞同种移植组（７１．４％）间无显著差异。结论：深低温使膜蛋白中α螺旋增加，并导致移植细胞的免疫反应原性降低；冻存肝细胞移植可提高急性肝衰治愈率。     

深低温在肝细胞移植中减轻免疫排斥反应的作用

探讨深低温减轻肝细胞移植免疫排朱作用。方法：抗体依赖性细胞毒性检测猪肝细胞溶解率，圆二色测定其膜蛋白要象。移植新鲜或冻存猪肝细胞于肝衰鼠腹腔内，并行ＳＤ鼠东存肝细胞同种移植，观察鼠存活率。结果；ＡＤＣＣ显示新鲜细胞数０．２４×１０＾５，冻存细胞０．６８×１０＾５，新鲜肝细胞膜蛋白中α螺旋为４７．５％，液氮处理后，α螺旋增至５６．５％。     

冻存猪肝细胞移植治疗Wistar鼠急性肝衰的初步研究

探讨冻存猪肝细胞异种移植治疗大鼠急性肝衰的可能性。将中国实验用小型猪的肝细胞在液氮中冻存150d后移植给切除80％肝叶的Wistar鼠,移植前检测冻存肝细胞的活率为冻前的78％,光镜及电镜检查显示细胞结构完整,组化检测糖原和葡萄糖-6-磷酸酶丰富,冻存猪肝细胞培养,生长良好。移植冻存猪肝细胞组Wistar鼠的存活率为16/17,对照组的存活率为3/9,P=0.0022。结果表明,将液氮冷冻保存的猪肝细胞移植给大鼠后可提高急性肝衰的存活率。     

异种冻存肝细胞移植治疗急性肝衰的可行性研究

目的：探讨冻存猪肝细胞移植治疗大白鼠急性肝衰的可行性。方法：将猪肝细胞在液氮中冻存１５０ｄ后移植给切除８０％肝叶的大鼠。结果：冻存肝细胞活率为冻前的７８％，光、电镜显示细胞完整，细胞内糖原和葡萄糖－６－磷酸酶丰富。移植组鼠的存活率为１６／ｌ７，明显高于对照组３／９，Ｐ＝０．００２。但肝衰后２和７ｄ的两组间残肝重量及肝功能生化值并无显著差异。结论：冻存猪肝细胞移植可治疗急性肝衰，其作用机理可能是综合效应的结果。     

HepaRG细胞移植治疗鼠特异性Fas抗体诱导的小鼠急性肝衰竭

目的 探讨HepaRG细胞移植对鼠特异性Fas抗体诱导的急性肝衰竭小鼠的治疗作用和人肝细胞异种移植的策略.方法 利用特异性鼠抗Fas抗体(Jo2 mAb)腹腔注射,剂量为0.3 mg/kg,诱导20只SCID小鼠制备急性肝衰竭模型,24 h内按照实验动物随机数字表分组方法 ,经脾移植2×106HepaRG细胞的小鼠为实验组(10只),未经HepaRG细胞移植的小鼠为对照组(10只).观察小鼠的存活率、肝脏功能、肝组织变化情况.实验组移植4周免疫组化检测肝组织人白蛋白、人CK18、人Hep Par1的表达,免疫荧光检测人白蛋白的表达.结果 实验组小鼠有9只存活超过4周,而对照组小鼠3 d内先后死亡9只,实验组血清ALT和AST趋于正常,显著低于对照组(P<0.01),且存活时间显著高于对照组(P<0.01).实验组经HepaRG细胞移植能避免Jo2 mAb所致肝组织出血、坏死,移植后4周免疫组化可见人白蛋白、CK18、Hep Par 1阳性表达细胞,肝组织免疫荧光可见人白蛋白阳性细胞的表达.结论 移植HepaRG细胞可治疗Jo2mAb腹腔注射小鼠诱导的急性肝衰竭,HepaRG细胞不仅在小鼠肝内存活,且得以增殖.     

人脐带间充质干细胞治疗大鼠缺氧缺血性脑病的研究

目的探讨冻存人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)异体移植对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)的修复作用。方法将96只7日龄SD新生大鼠随机分为正常对照组(n=24)、HIE组(n=24)、新鲜hUC-MSCs移植组(n=24)、冻存hUC-MSCs移植组(n=24),使用RICE法制备HIE模型,术后3d分别将相同体积的生理盐水、新鲜、低温冻存复苏的hUC-MSCs经立体定向仪移植到乳鼠左侧脑室。注射前48h用BRDU标记细胞。术后通过组织切片HE染色、免疫荧光染色鉴定细胞的存活,感觉运动功能测试评定大鼠功能恢复情况。结果复苏后hUC-MSCs增长速度较新鲜hUC-MSCs明显增快,且先进入对数生长期;移植后脑组织HE染色结果显示:与HIE组比较,细胞移植组海马及大脑皮质区的神经元及少突胶质细胞明显增多,组织结构相对清晰;免疫荧光结果显示,移植后的hUC-MSCs可以存活并向损伤部位迁移,在组织中存活至少4w;感觉运动功能测试结果显示:4组足错误左右差值、姿势反射、肢体放置比较差异有统计学意义(P<0.01),移植组较HIE组有明显改善(P<0.05),新鲜hUC-MSCs移植组与冻存hUC-MSCs移植组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论冻存hUC-MSCs复苏后仍具有活跃的增殖和分化潜能,异体移植治疗新生大鼠HIE,可促进大鼠感觉运动功能恢复,是HIE移植治疗有价值的细胞资源,可建立脐带库,实现终身干细胞移植。     

鼠血管平滑肌细胞转人CD59基因的实验研究

目的 :在培养的鼠主动脉平滑肌细胞膜上表达人CD5 9蛋白 ,研究通过转基因方法抑制异种移植超急性排斥反应。方法 :分别从新鲜的鼠主动脉和人脐静脉分离培养鼠主动脉平滑肌细胞、人脐静脉内皮细胞 ,并用免疫荧光和免疫组化的方法鉴定。构建含人CD5 9cDNA的真核细胞表达载体LXSN CD5 9,用脂质体转染法将LXSN和LXSN CD5 9转化进鼠主动脉平滑肌细胞 ,40 0～ 80 0mg·L-1G418筛选得到稳定转化子。流式细胞仪筛选得到表达人CD5 9蛋白最强细胞株。与含有异种活性抗体和补体的人血清和猴血清共孵育 ,分析乳酸脱氢酶 (lacticde hydrogenase ,LDH)释放率测定人CD5 9蛋白功能活性。结果 :与未转基因的对照组细胞比较 ,表达人CD5 9蛋白组细胞与不同浓度人血清和猴血清共孵育时 ,人血清和猴血清中补体及抗体对这些细胞的杀伤作用被显著抑制 ,统计学检验差异有显著性。结论 :通过转基因方法在鼠血管平滑肌细胞膜上表达人补体调节蛋白 ,能使异种移植超急性排斥反应得到抑制     

利用bcl-2抗Fas凋亡特性联合Fas抗体促进人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖

目的 移植bcl-2转基因HepaRG细胞到小鼠体内,并联合使用Jo2抗体诱导鼠肝细胞凋亡策略,促进人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖.方法 SCID鼠经脾移植2×106 bcl-2转基因HepaRG细胞,移植后1d始腹腔注射0.2mg/kg Jo2抗体,每周1次,持续10周为实验组;移植未转染bcl-2基因的HepaRG细胞,同样给予Jo2 抗体腹腔注射为对照1组,移植未转染bcl-2基因的HepaRG细胞,未腹腔注射Jo2抗体为对照2组,建立人鼠嵌合肝动物模型.从2周开始,后4、8、12、16、20、24周,分别采用免疫组化、免疫荧光和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时相点实验组和对照组嵌合肝中肝组织人清蛋白以及人清蛋白mRNA,并用酶联免疫法(ELISA)定量检测鼠血清人清蛋白的含量.结果 实验组和对照组小鼠均能存活至24周,鼠肝组织和血清中均能检测到清蛋白的表达.实验组肝组织和血清人清蛋白的表达均可持续到24周,人血清清蛋白高峰值为95.32ng/mL,出现在16周;而对照1组肝组织和血清人清蛋白的表达可持续到20周,人血清清蛋白高峰值为42.37ng/mL,出现在12周;对照2组肝组织和血清人清蛋白的表达可持续到12周,人血清清蛋白高峰值为22.91ng/mL,出现在8周.结论 利用bcl-2抗Fas凋亡特性,转染bcl-2基因的HepaRG细胞移植并联合小剂量Jo2抗体腹腔注射SCID鼠,有利于人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖和存活.     

冷冻猪肝细胞在生物型人工肝系统中的生存状态研究

目的研究冷冻复温后猪肝细胞在生物型人工肝支持系统(BALSS)中的生存状态.方法用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离出猪肝细胞;将1×1010猪肝细胞冷冻保存在-196 ℃液氮中;1个月后复温,将等量的冷冻和新鲜猪肝细胞分别培养在BALSS中,比较其形态、存活率和白蛋白、尿素、葡萄糖合成功能及对利多卡因的转化功能.结果冷冻保存的猪肝细胞,复温后其存活率较高;在培养于BALSS时其生化功能、利多卡因转化功能及超微结构与新鲜肝细胞类似.结论用该冻存方法保存的猪肝细胞可试用于BALSS系统.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

十二指肠损伤的治疗体会

目的：提高十二指肠损伤的诊治水平，方法：回顾总结该院1999年－2001年间收治的十二指肠损伤7例临床经验。结果：合并其他腹部脏器损伤86％（6／7），单纯十二指肠损伤14％（1／7）。损伤部位以十二指肠降部为多占71％（5／7），水平部和球部各占14％（1／7），术后并发症发生率28％（2／7）、病死率14％（1／7）。结论：掌握十二指肠损伤的特点，早诊断、早手术、术中认真探查，掌握好检查指征，选择合理恰当术式，加强术后管理，可提高治愈率。     

断指再植的护理体会

随着医疗水平的提高,显微手外科技术在各基层医院已得到广泛开展,所收治的此类患者在逐年增加.随机统计了近两年我院20份34指的病例,通过观察认为手术的成功与否不但取决于损伤的局部条件、术中的操作和术后的治疗,同时与术前、术后的护理也密不可分.对离断指及伤口的妥善处理,积极的术前准备和术后的精心护理,特别是术后对血运的密切观察,同时通过术前术后的健康教育使患者对该疾病的知识有了一定的掌握,认识了康复训练的重要性从而使功能达到最大限度的恢复.