高效液相色谱—质谱法测定泌尿系结石中的三聚氰胺

目的建立应用高效液相色谱—质谱法(LC/MS)检测泌尿系结石中三聚氰胺含量的方法。方法应用高效液相色谱—质谱法对17例因怀疑食用三聚氰胺污染奶粉在婴幼儿形成的泌尿系结石以及4例既往保存的成人尿酸结石进行三聚氰胺含量分析。采用正离子模式的电喷雾质谱检测。三聚氰胺最低检出限为0.1 mg/kg。结果 4例已知成人尿酸结石标本中均未检测到三聚氰胺,17例疑似标本中应用液相色谱—质谱联用仪分析后共4例标本中检测出三聚氰胺,含量浓度分别为0.8、0.5、1.2和64 mg/kg。结论高效液相色谱—质谱法准确度高、稳定性好,可以有效检测泌尿系结石中三聚氰胺含量,为进一步治疗和随访提供了帮助,但含三聚氰胺奶粉对患儿的长期影响还需进一步随访研究。     

对三聚氰胺污染奶粉喂养婴幼儿行泌尿系统超声检查的所见与思考

目的 观察食用“问题奶粉”中三聚氰胺对婴幼儿相关性泌尿系结石的超声影像特点,以及在筛查过程中发现泌尿系统先天性畸形的超声所见.方法 对7217例婴幼儿行泌尿系超声检查,注意是否为三聚氰胺相关性结石及泌尿系统先天性畸形,如遇有畸形者行CT或造影检查.所有患儿均进行常规尿液检查,遇有异常结晶者进行液相色谱分析.结果 323例诊断为泌尿系结石,总发病率为4.5％,其中尿常规异常者59例(18％),7例尿中出现三聚氰胺与尿酸的混合结晶体.被筛查的婴幼儿中先天性泌尿系畸形68例,多数为输尿管狭窄.结论 食用含三聚氰胺的奶粉可致一定比例的三聚氰胺相关性结石产生;婴幼儿中存在一定比例的泌尿系统先天畸形,应积极筛查以前在早期即可得到有效的治疗.     

食用受三聚氰胺污染奶粉的小儿泌尿系统超声表现及临床分析

目的 了解食用受三聚氰胺污染奶粉的小儿泌尿系统B超的异常改变.方法 应用超声诊断仪对4 388例曾食用受三聚氰胺污染奶粉的小儿进行泌尿系统超声筛查,根据年龄分为4个年龄段组.结果 筛查阳性率为1.07%(47/4 388),泌尿系统异常者的男女比例及各年龄段组的性别构成比差异无统计学意义(P＞0.05),但各年龄段组泌尿系异常发生率比较差异有统计学意义(P＜0.01),年龄越小发生率越高.住院患儿的血清尿素氮、肌酐、尿酸以及尿红细胞的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 此次筛查泌尿系超声异常表现为肾结石、输尿管结石并肾积水者,与食用含三聚氰胺的奶粉密切相关.年龄越小泌尿系结石的发生率越高.     

食用三聚氰胺污染的婴幼儿配方奶粉的小儿泌尿系统筛查情况分析

目的:探讨与食用三聚氰胺污染的婴幼儿配方奶粉相关的婴幼儿泌尿系结石的临床特点、诊断和治疗措施.方法:回顾分析2008年9月～10月中日友好医院儿科门诊2539例食用可疑受三聚氰胺污染的婴幼儿配方奶粉的小儿泌尿系统筛查情况.筛查项目包括尿常规和泌尿系超声检查.对确诊因食用受污染配方奶粉致泌尿系结石的患儿行血尿素氮、肌酐检测.分析三聚氰胺相关泌尿系结石的流行病学、临床及影像学特点.结果:2539例接受筛查的小儿中结果异常者54例.其中21例患儿初步诊断三聚氰胺相关泌尿系结石.泌尿系超声检查提示双侧肾结石6例,左肾结石8例.右肾结石7例,其中2例合并单侧肾盂积水和肾盂扩张.21例肾结石患儿血尿素氮、肌酐均正常.结论:食用三聚氰胺污染的婴幼儿配方奶粉可以导致婴幼儿泌尿系结石.泌尿系超声检查对诊断、鉴别诊断三聚氰胺相关泌尿系结石十分重要.对较小结石、无尿路梗阻和临床症状者.无需特殊干预,可定期随诊;对较大结石、有短期部分尿路梗阻者多首选内科保守治疗.     

含三聚氰胺奶粉致婴幼儿泌尿系结石的超声筛查分析

目的：探讨含三聚氰胺奶粉喂养的婴幼儿泌尿系超声特征性表现。方法：依据卫生部下发的诊断标准,按照超声标准扫查方法对3163例含三聚氰胺奶粉喂养史的婴幼儿泌尿系进行超声检查,对其结果进行筛查分析。结果：3163例婴幼儿中检出’肾脏结石152例,男性96例,女性56例;维吾尔族（维族）92例,汉族60例;结石最大直径1．8cm,最小0．4cm;单侧单发78例,单侧多发33例,同时伴发积水者30例;伴发膀胱结石1例,伴发输尿管结石17例。结论：含三聚氰胺奶粉所致的结石以肾脏结石多见,以单侧单发结石多见,多位于中下盏,结构疏松。     

ELISA法测定三聚氰胺效果分析

目的探讨以ELISA法检测三聚氰胺的可行性。方法采用竞争酶联免疫吸附法检测三聚氰胺及调查深圳市奶粉三聚氰胺污染状态。结果检测方法具有灵敏度高、干扰少、测定步骤简便、快速、操作安全、测定结果准确可靠,在三聚氰胺浓度为20.0～500.0(μg/kg)之间变异系数为1.0%～6.3%,回收率为96.4%～104.8%,标准曲线的R值为0.995。结论检测方法的测定结果令人满意,是目前国内外测定三聚氰胺的科学而理想的方法。建议日常工作中先用ELISA法快速筛选检测,阳性样品再用液相色谱—质谱联用仪分析法进行确证实验。     

三聚氰胺安全性毒理学评价

目的对三聚氰胺进行安全性毒理学评价。方法通过急性毒性试验、遗传毒性试验及喂养试验确定三聚氰胺在体内各器官分布、三聚氰胺毒作用剂量范围,是否有遗传毒性及毒作用靶器官。结果经口给予小鼠三聚氰胺,其雄性、雌性LD50均为5840mg/(kg.bw);Ames试验结果阴性;1/2、1/4、1/8LD50剂量系列遗传毒性小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠睾丸染色体畸变实验结果阴性;大鼠喂饲含有三聚氰胺的饲料(饲料中三聚氰胺含量分别为500、250、125mg/kg)28d后表现多尿、少动、体重下降,血清肌酐、尿素氮增高,肾脏外观明显改变,组织病理检查可见肾小管中存在大量晶体,肾小管上皮受损。肾脏内的晶体经液相色谱-质谱联用检测含有三聚氰胺和三聚氰酸。结论三聚氰胺雄性、雌性LD50为5840mg/(kg.bw),无遗传毒性,三聚氰胺雄性LOAEL为12.5mg/(kg.bw),雌性25mg/(kg.bw),毒作用靶器官为肾脏。     

三聚氰胺污染奶粉喂养婴幼儿致泌尿系结石并发肾积水46例分析

目的:了解三聚氰胺污染奶粉喂养婴幼儿泌尿系结石并发肾积水的临床特点.方法:回顾性分析三聚氰胺污染奶粉喂养致泌尿系结石并发肾积水婴幼儿46例和无肾积水患儿115例的临床特征,依据Grignon等婴幼儿肾积水分级标准,分为轻、中和重度3组,比较结石患儿(161例)和无泌尿系疾病患儿(30例)血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、血清尿酸(BUA)、尿pH水平.结果:161例三聚氰胺污染奶粉喂养患儿中发生泌尿系结石并发肾积水46例.半数患儿临床症状不明显,有17.0%的患儿发生排尿困难(包括排尿费力、尿不成线呈滴沥状),14.6%的患儿不明原因哭闹、拒食,10.7%的患儿少尿无尿,6.6%的患儿出现血尿.轻度肾积水7例,中度22例,重度17例.其中并发输尿管扩张21例.肾积水组与无积水组相比,结石直径差异有统计学意义(P<0.05).结石形态差异无统计学意义(P>0.05).输尿管结石并发积水发生率显著高于肾结石并发积水发生率(P<0.05).肾积水组、无积水组和对照组患儿血清BUN、SCr、BUA差异均无统计学意义(P>0.05);肾积水组、无积水组治疗前尿pH均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).经卫生部推荐方案治疗(9±5)d后,患儿结石排出率为42.7%,肾脏积水减轻或消失,肾脏功能恢复.尿量正常.结论:三聚氰胺污染奶粉喂养致婴幼儿泌尿系结石并发肾积水发病率高;结石并发积水与结石发生部位、大小有关;该类疾病保守治疗效果好.     

三聚氰胺污染奶粉致婴幼儿泌尿系结石体外冲击波治疗体会

目的探讨体外冲击波碎石治疗三聚氰胺所致婴幼儿泌尿系结石的疗效。方法对2008年6月—2009年12月收治的94例三聚氰胺污染奶粉所致婴幼儿泌尿系结石病例,经体外冲击波碎石及碎石后药物综合治疗,观察1～4周进行疗效评定。结果共治疗97枚结石,其中镇痛组(丁卡因凝胶局部涂擦组)18例患儿结石全部排净,结石清除率100%(18枚/18枚);镇静镇痛组(苯巴比妥钠+哌替啶组)30例患儿结石清除率63.3%(19枚/30枚);静脉全麻组(氯胺酮+咪达唑仑)46例患儿结石清除率85.7%(42枚/49枚),总的治愈率81.4%(79枚/97枚),余下18枚结石中,9枚结石治疗有效,体内遗留有≤4mm结石,9枚结石治疗无效。未观察到并发症。结论三聚氰胺所致婴幼儿泌尿系结石体外冲击波治疗是一种创伤及副损伤小,较为安全有效治疗方法 。     

高效液相色谱法同时测定枸杞中单糖和低聚糖的含量

目的 建立同时测定枸杞中鼠李糖、果糖、葡萄糖三种单糖和蔗糖、麦芽糖两种低聚糖含量的高效液相色谱-示差折光检测方法.方法 枸杞中的单糖和低聚糖用蒸馏水提取后,经Zorbax Carbohydrate色谱柱分离,采用示差折光检测器检测.结果 本方法检测枸杞中的鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖在10.0～400.0 mg/L范围内,质量浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数r=0.9976～0.9998.方法的精密度RSD分别为2.15%、1.49%、1.09%、3.82%、4.65%,加标回收率为92.27%～101.93%,方法的检出限(信噪比S/N=3)分别为4 mg/kg、5 mg/kg、4 mg/kg、6 mg/kg、5 mg/kg.结论 高效液相色谱-示差折光检测方法简便、快速,适用于枸杞中鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定.     

国内十大医学新闻

1．三聚氰胺导致泌尿系结石事件2008年9月11日,甘肃等地上报卫生部发现多例婴幼儿泌尿系统结石病例。调查发现,上述病例与食用三鹿牌婴幼儿配方奶粉中含有三聚氰胺有关。截至11月27日,全国因食用三鹿牌奶粉和其他个别问题奶粉导致泌尿系统异常的患儿为29．4万例,累计住院51900例。     

南疆地区197例患者泌尿系结石成份分析

目的探讨南疆地区泌尿系结石患者的结石成份及防治方法。方法搜集新疆南部地区与三聚氰胺奶粉相关尿路结石病例197例。手术取石,采用红外光谱自动分析仪定性检测。结果除外8例资料不全,纳入统计189例,共检测出8种成份,其中单纯成份结石51.85%（98例）,混合成份结石48.15%（91例）。按结石主要成份分为含钙结石72例（38%）,非钙结石66例（34.8%）,混合型结石51例（28%）。各种成份的结石病例的构成比从高到低依次为尿酸铵结石44例（44.9%）,一水草酸钙和尿酸铵28例（28.5%）,一水草酸钙24例（26.3%）。三种结石的临床特点是67%为维吾尔族患者,男性占71%,且52.8%为3岁以下婴幼儿;肾结石占61.4%;尿酸铵是主要的结石成份,草酸钙结石具一定比例。结论新疆南部地区维吾尔族男性肾结石发病率明显高于汉族男性;同时发现三聚氰胺奶粉易诱导维族男性婴幼儿患尿酸铵结石,应进一步探讨诱因,及早治疗。     

儿童三聚氰胺结石8579例筛查结果回顾性分析

目的探讨服用三聚氰胺污染配方奶粉的儿童泌尿系结石以及肾积水的发生率,评价三聚氰胺对儿童泌尿系统的影响。方法2008-09～10在广西壮族自治区人民医院筛查三聚氰胺结石的儿童8579名,每例筛查儿童均有服用配方奶粉史。常规进行泌尿系统B超检查,观察是否发生泌尿系结石和肾积水。对超声检查阳性病例进行尿常规及血清BUN／Cr检测。结果超声检查发现阳性病例274例,其中泌尿系统结石173例,肾积水53例,肾盂分离49例,肾囊肿17例。重度肾积水5例住院治疗,其中1例发生肾功能衰竭,经治疗5例患儿均痊愈出院。结论三聚氰胺容易在婴幼儿泌尿系统形成泥沙样结石,造成肾盂输尿管连接部梗阻进而导致肾积水,严重者可影响肾功能。大量饮水可促进结石排出,解除梗阻情况;严重梗阻病例需要外科手术治疗来缓解长期肾功能损害。早期诊治是改善预后的关键。阳性病例建议超声随访,以利于监测病情变化。     

新木脂素的酶法糖基化及抗肿瘤活性

目的以厚朴酚与和厚朴酚为底物,进行酶法糖基化修饰以及检测其抗肿瘤活性,提高新木脂素类化合物（厚朴酚与和厚
朴酚）的水溶性和生物活性,。方法利用来源于Bacillus的糖基转移酶（YjiC）,通过酶法糖基化制备厚朴酚与和厚朴酚糖基化
产物;经高效液相色谱（HPLC）、液相串联质谱（LC-MS）、核磁共振（NMR）检测分析鉴定其结构;通过MTT法检测药物对多种
肿瘤细胞的增殖抑制效应。结果利用酶法糖基化反应制备了2个新木脂素（厚朴酚与和厚朴酚）糖基化产物,并显著提高了其
水溶性;糖基化产物分别鉴定为magnolol-2-O- β-D-glucopyranoside（1）和honokiol-4’-O-β-D-glucopyranoside（2）;MTT结果
显示,厚朴酚与和厚朴酚及其糖基化产物对4种肿瘤细胞均表现出较强的抑制细胞增殖的作用,且呈现浓度依赖性,其IC50范围
为9.41~111.21 μmol/L。结论厚朴酚与和厚朴酚糖基化产物显著提高水溶性以及增加了药物对SMMC7721细胞的敏感性,并
具有良好的应用前景。
     

UHPLC-MS/MS鉴定心肌重构大鼠单次腹腔注射益母草碱后的血浆代谢产物

目的:应用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)分析鉴定心肌重构大鼠经单次腹腔注射益母草碱后血浆代谢产物。方法:采用Waters BEH C18(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)色谱柱,0.002 mol/L甲酸铵-乙腈梯度洗脱。质谱为电喷雾电离源(ESI),正离子模式下检测,通过MassLynx V4.1质谱分析软件,结合保留时间、质谱特征碎片等信息,分析鉴定心肌重构大鼠经单次腹腔注射益母草碱后的血浆代谢产物。结果:鉴定出心肌重构大鼠以益母草碱低(7.5 mg/kg)、中(15 mg/kg)、高(30 mg/kg)剂量经单次腹腔注射后血浆代谢产物中的化合物共20个,其中低剂量组4个,中、高剂量组各8个。结论:本方法可快速鉴别益母草碱血浆代谢产物的化学成分,对益母草碱发挥抑制心肌重构作用有关物质基础研究提供参考。     

慢性微量铬暴露对小鼠肝细胞氧化应激的影响

目的通过对慢性微量铬（Ⅵ）染毒动物模型的制备,探讨金属对金属髋关节置换术后铬（Ⅵ）的释放对肝脏氧化应激的影
响。方法80只NIH小鼠随机分为4组,对照组及低、中及高剂量组。隔日1次分别给0、5、0、20 mg/kg体质量的三氧化铬腹腔注
射。分别于染毒4、8、12、16周用颈椎脱位法各处死小鼠5只,检测血铬含量、肝细胞活性氧自由基水平（ROS）、脂质过氧化产物
丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽（GSH）含量、谷胱甘肽还原酶（GR）活性及谷氨酸半胱氨酸连接酶（GCL）的表达,并对小鼠肝细胞
进行透射电镜观察。结果与对照组比,5 mg/kg组及10 mg/kg组血铬浓度、ROS升高并在第8周以后趋于稳定;20 mg/kg组血
铬浓度及ROS持续升高,呈一定的时间依赖性。各实验组MDA未见明显升高。各实验组GSH含量及GR活性随着染毒时间
的延长均下降;5 mg/kg 组及10 mg/kg 组在各个时间点中GCL表达增加,20 mg/kg 组GCL表达随逐渐降低。透射电镜显示
20 mg/kg组肝细胞均出现凋亡性改变。结论金属对金属髋关节置换术后微量铬（Ⅵ）的缓慢蓄积可能会引起肝细胞氧化应激
以及抗氧化应激系统的改变。     

邻苯二甲酸二丁酯和二（2-乙基已基）酯对大鼠尿液中超氧化物歧化酶酶活力和丙二醛含量的影响

摘要：目的探讨邻苯二甲酸二丁酯（DBP）和邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）一次性单独及一次性联合染毒对雄性SD大
鼠尿液超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量影响。方法选取60只体质量200 g左右SD雄性大鼠,测量其体质量
并随机分为10组,分别是阴性对照组（芝麻油）、DBP单独染毒组（低剂量：30 mg/kg;中剂量：100 mg/kg;高剂量：300 mg/kg）、
DEHP单独染毒组（低剂量：50 mg/kg;中剂量：150 mg/kg;高剂量：450 mg/kg）以及DBP和DEHP联合染毒组（低剂量：DBP 30
mg/kg+DEHP 50 mg/kg;中剂量：DBP 100 mg/kg+DEHP 150 mg/kg;高剂量：DBP 300 mg/kg+DEHP 450 mg/kg）,每组6只。采
用灌胃的方式进行一次性染毒,灌胃量为2 ml。染毒后收集24、48、72、96 h尿液,并测定其尿液中SOD酶活性和MDA含量。
结果DBP、DEHP单独和联合染毒均能在不同程度上降低大鼠24 h尿液中SOD酶活力,增加24 h尿液中MDA含量,但对大鼠
48、62、96 h尿液中SOD酶活力和MDA含量的影响则无显著性差异;各组大鼠随着饲养天数的增加尿液中SOD酶活力有所回
升,MDA含量有所下降。结论DBP、DEHP单独和联合染毒均能在短期内对大鼠肾脏造成显著的氧化损伤,且联合染毒效应
更高。
     

石墨烯纳米磁颗粒固相萃取液相色谱质谱联用仪联用法对四环素类药物检测研究

目的建立石墨烯纳米磁颗粒固相萃取—液相色谱质谱联用对四环素类药物的检测方法。方法取石墨烯、无水硫酸亚铁等试剂,在一定条件下合成石墨烯纳米磁颗粒,对畜禽产品的提取液中四环素类药物进行富集、除杂质、洗脱,进入液相色谱质谱仪进行测定。结果将待测物匀浆于p H=4. 5的提取液中,石墨烯纳米磁颗粒吸附3 min,磁铁吸附,弃去提取液,用5%甲醇水溶液除杂质,用纯甲醇洗脱,上机测定,回收率达到90%以上,检出限达到0. 2 mg/kg以下,与HLB固相萃取小柱前处理方法比较,检测结果接近。结论石墨烯纳米磁颗粒固相萃取—液相色谱质谱法测定畜禽产品中的4种四环素类药物,与传统HLB小柱方法相比,无需离心机、无需过柱装置、操作简便、成本更低,具有广阔的应用前景。     

碱性药物治疗三聚氰胺所致婴幼儿泌尿系结石临床观察

目的观察碱性药物治疗三聚氰胺所致婴幼儿泌尿系结石的疗效。方法102例肾结石婴幼儿均有含三聚氰胺婴幼儿奶粉喂养史。男85例,女17例。年龄2个月～3岁,平均10个月。其中合并输尿管结石24例,合并尿道、膀胱结石10例。其中因少尿、尿闭、伴有发热者14例,伴呕吐6例,伴血尿5例。经B超检查诊断为泌尿系结石者88例。肾结石直径0.5～1.5cm;输尿管结石0.5～1.0cm。本组患儿34例合并有单侧或双侧肾积水。实验室检查：尿液红细胞增多,尿中有白细胞或结晶者35例;高血钾症9例,最高达9.42mmol/L;血肌酐（Cr）升高者14例,340μmol/L～1100μmol/L,平均750μmol/L;高尿酸血症患儿15例,尿酸最高1263ummol/L;血尿素氮（BUN）异常14例,范围26.1mmol/L～48.32mmol/L,平均32.3mmol/L,所有患儿尿PH值〈6.5,平均5.5。治疗方案：①立即停用含三聚氰胺婴幼儿奶粉②88例单纯应用碱性药物（碳酸氢钠）进行治疗,口服碳酸氢钠,给药30mg/（kg·d）分两次,持续2～6周③合并肾衰者14例在全麻下平卧位行输尿管镜下碎石、溶解石,术中给予5%碳酸氢钠30ml肾盂灌洗后,于输尿管内留置双“J”管引流尿液。术后给予100～150mg/（kg·d）碳酸氢钠加入5%葡萄糖250ml配制成1.5%的碳酸氢钠溶液静滴,1次/日,共1周,后改为口服碳酸氢钠,给药30mg/（kg·d）分两次,持续2～6周,至症状缓解或消失。④在给予碱性药物治疗期间,每天化验尿常规1次,测定尿液PH值。1周～2周复查B超1次,观察婴儿泌尿系结石变化情况。结果①临床治愈：经2周～2月的治疗,14例因少尿、无尿、血尿、呕吐、水肿等就诊者上述症状均在治疗1～2周后消失,影像学检查结石消失57例。实验室检查：14例患儿手术后24h之内很快出现多尿,平均出现多尿期时间术后12h,多尿期持续时间24h～72h,尿量约800～2500ml/24h,术后48h～96h尿量逐渐恢复正常,术后1～5天血尿素氮（BUN）?     

IL-17对肺成纤维细胞的增殖、转化和胶原合成作用

摘要：目的探讨IL-17对博来霉素诱导肺纤维化形成中的肺成纤维细胞增殖、转化、胶原合成作用。方法用5 mg/kg博来霉素
气管内注入的方法诱导肺纤维化形成,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中表达的变
化,选择表达IL-17RmRNA最佳时间的肺成纤维细胞进行原代培养、鉴定。使用四氮唑蓝比色法检测不同浓度的IL-17对肺成
纤维细胞的增殖。使用RT-PCR 和Western Blotting 检测肌成纤维细胞标志物α-SMA以及I 和III 型胶原的表达。结果（1）
IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中明显升高,在第14天表达最高。（2）不同浓度IL-17能够促进肺成纤维细胞的增殖,最佳
浓度为50 ng/ml。（3）IL-17促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加。（4）IL-17促进肺成纤维细胞I和III型胶原合成。结论IL-17具
有促进小鼠肺纤维化形成中肺成纤维细胞增殖、转化和胶原的合成作用,可能在肺纤维化形成中起重要作用。