淫羊藿素对人肝癌Hep-G2细胞增殖、凋亡的影响及作用机制

【摘要】 目的 探讨淫羊藿素对人肝癌Hep-G2细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法体外培养人肝癌Hep-G2细胞;采用MTT比色法检测淫羊藿素对人肝癌Hep-G2细胞增殖的影响;将Hep-G2细胞分为：空白对照（Control)组、低剂量（2.5 μM/L)组、中剂量（5 μM/L)组和高剂量（10 μM/L)组;蛋白质印记检测增殖、凋亡相关蛋白Ki-67、Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达情况;克隆形成实验检测各组肝癌细胞增殖情况;流式细胞仪检测Hep-G2细胞凋亡情况。结果MTT结果显示淫羊藿素对肝癌Hep-G2细胞的IC50为5.38 μM/L;与空白对照组相比,低剂量组肝癌Hep-G2细胞Ki-67蛋白相对表达量、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量、Caspase-3蛋白相对表达量显著升高（均P<0.05）;与低剂量组相比,中剂量组肝癌Hep-G2细胞Ki-67蛋白相对表达量、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量、Caspase-3蛋白相对表达量显著升高（均P<0.05）;与中剂量组相比,高剂量组肝癌Hep-G2细胞Ki-67蛋白相对表达量、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量、Caspase-3蛋白相对表达量显著升高（均P<0.05）。结论淫羊藿素可以抑制肝癌Hep-G2细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达以及增强caspase-3的活性相关。     

灵芝酸A对人前列腺癌细胞DU-145细胞凋亡的影响

目的 初步探讨灵芝酸A对人前列腺癌细胞DU-145细胞凋亡的影响.方法 培养DU-145细胞,然后使用0、0.1、0.25以及0.5 mmol/L灵芝酸A进行诱导,处理DU-145细胞24 h后收集细胞然后提取总RNA;处理DU-145细胞48 h后收集细胞提取总蛋白;采用荧光定量PCR和Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3和LivinαmRNA水平和蛋白水平的表达变化.结果 采用灵芝酸A处理人前列腺癌细胞DU-145细胞能够显著上调Bax和Caspase-3 mRNA水平和蛋白水平的表达量(P<0.01),显著下调Bcl-2以及LivinαmRNA水平和蛋白水平的表达量(P<0.01),促进前列腺癌细胞DU-145细胞凋亡,并且随灵芝酸A剂量的升高细胞凋亡增加.结论 灵芝酸A能够促进DU-145细胞凋亡,可能是通过调节凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3和Livinα的表达发挥作用.     

肝细胞癌细胞凋亡、细胞增殖与病理组织学类型的关系

目的研究肝细胞癌细胞凋亡、细胞增殖及其与病理组织学类型的关系。方法经手术病理证实的6种组织学类型肝细胞癌57例,用TUNEL法检测凋亡细胞,用免疫组化检测各标本Bcl-2、Bax,P53,Ki-67和PCNA表达。结果透明细胞型和梁索型Ki-67蛋白表达较假腺样型、实体型和低(未)分化型低(P<0.05)。假腺样型Bcl-2蛋白较低(未)分化型低(P<0.05);Bax蛋白表达梁索型较实体型、低(未)分化型和硬化型高(P<0.05);透明细胞型较低(未)分化型高(P<0.05)。Bcl-2/Bax比值梁索型较假腺样型,硬化型和低(未)分化型低(P<0.05);透明细胞型较低(未)分化型低(P<0.05)。随病理分级的升高Ki-67和PCNA蛋白表达升高(P<0.05)。3级Bax蛋白表达较2级显著降低(P<0.05)。细胞凋亡与Bax蛋白表达显著正相关,与Ki-67蛋白表达和Bcl-2/Bax蛋白表达比值显著负相关(P<0.05)。Ki-67蛋白表达与PCNA和P53蛋白表达显著正相关(P<0.05),与细胞凋亡和Bax蛋白表达显著负相关(P<0.05)。P53蛋白表达与PCNA和Ki-67蛋白表达显著正相关(P<0.05),与Bcl-2/Bax蛋白表达比值显著负相关(P<0.05)。Bcl-2蛋白表达与Bcl-2/Bax蛋白表达比值显著正相关(P<0.05),与PCNA蛋白表达显著负相关(P<0.05)。Bax蛋白表达与细胞凋亡显著正相关(P<0.05),与Ki-67、PCNA蛋白表达和Bcl-2/Bax蛋白     

PTEN基因调控Raf-1磷酸化对前列腺癌PC3细胞凋亡的影响

目的探讨PTEN基因表达通过调控Raf-1磷酸化对前列腺癌PC3细胞凋亡的影响。方法 FTS和MK2206 2HCl分别抑制Ras和AKT,PTEN基因过表达和干扰后检测Raf-1磷酸化水平并观察前列腺癌PC3细胞光镜下形态变化、MTT检测细胞活力、流式细胞仪测定细胞凋亡率以及Western blot检测Bax、Bcl-2、Caspase-8、Caspase-9、 Caspase-12和Caspase-3表达水平,分析PTEN基因的不同表达和Raf-1磷酸化水平与PC3细胞凋亡的关系。结果与对照组相比,PTEN基因过表达后,Raf-1磷酸化水平降低,PC3细胞变形、体积缩小、细胞核固缩,细胞活力降低,细胞凋亡率增加,凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12、Caspase-3以及促凋亡蛋白Bax表达量增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量降低(P<0.01); PTEN基因干扰表达减低后,Raf-1磷酸化水平增强,PC3细胞形态和数目变化无显著差异,细胞活力和细胞凋亡率变化无显著差异,凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12、Ca... 更多     

合并前列腺炎的良性前列腺增生组织中Ki-67，Bcl-2，Bax和caspase-3表达及意义

目的:通过检测单纯良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)与合并前列腺炎的BPH患者中Ki-67,Bcl-2,Bax和caspase-3蛋白表达差异,探讨炎症与BPH发生发展的关系.方法:收集58例行经膀胱前列腺摘除手术的BPH患者的前列腺标本,常规HE染色后观察其合并前列腺炎情况,其中单纯BPH 16例,合并前列腺炎的BPH 42例.采用免疫组化和Western免疫印迹技术研究Ki-67,Bcl-2,Bax和caspase-3在前列腺组织中的表达情况.结果:合并前列腺炎的BPH患者Ki-67和Bcl-2表达有显著升高(P＜0.05),caspase-3表达显著下调(P＜0.05),但Bax的表达无明显变化(P＞0.05).结论:前列腺炎促进BPH细胞Ki-67和Bcl-2蛋白表达,减少caspase-3蛋白激活,提示炎症可能参与了BPH的发生发展过程.     

miR-34a调节人卵巢颗粒细胞凋亡

目的: 探讨miR-34a对人卵巢颗粒细胞的作用及其机制。方法: 体外培养人卵泡颗粒细胞,分为模拟物转染组、抑制物转染组、模拟物阴性对照转染组、抑制物阴性对照转染组,分别转染miR-34a模拟物、miR-34a抑制物、模拟物阴性对照和抑制物阴性对照,另设空白对照组不做任何处理;实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-34a、Bcl-2、Bax、生存素、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax、生存素、Caspase-3、剪切体Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果： miR-34a模拟物转染明显下调Bcl-2 mRNA表达水平,降低Bcl-2、生存素蛋白表达,并增加Bax、Caspase-3蛋白表达,促进人颗粒细胞凋亡;miR-34a抑制物转染作用则与之相反;然而,miR-34a模拟物和抑制物转染对Bax、生存素、Caspase-3 的mRNA水平均无明显影响。结论： miR-34a可通过调控凋亡相关的蛋白与基因的表达,促进人颗粒细胞凋亡。     

LRPPRC对前列腺癌细胞凋亡的影响

目的：分析富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)和抗凋亡蛋白Bcl-2在前列腺癌组织的表达及LRPPRC对前列腺癌细胞凋亡的影响。方法：应用免疫组化法检测198例前列腺癌组织中LRPPRC和Bcl-2的表达;分析LRPPRC和Bcl-2表达的相关性;分析LRPPRC和Bcl-2表达与预后的关系;应用siRNA LRPPRC转染前列腺癌细胞下调LRPPRC水平,观察对细胞增殖、凋亡和Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的影响。结果：前列腺癌和前列腺增生组织LRPPRC的表达率分别为61.6%(122/198)和18.0%(18/100)(P＜0.001);Bcl-2的表达率分别为49.5%(98/198)和45.0%(45/100)(P=0.539)。LRPPRC和Bcl-2的表达有显著正相关性(r=0.179,P=0.012)。LRPPRC和Bcl-2同时高表达的患者无疾病进展生存和总生存期均显著降低(P＜0.001)。下调LRPPRC表达可抑制前列腺癌细胞增殖,促进前列腺癌细胞凋亡,降低Bcl-2蛋白的表达,使caspase-3活化增多,对Bax表达无显著影响。结论：前列腺癌组织LRPPRC表达显著增高;LRPPRC与抑制凋亡有关;LRPPRC在前列腺癌中的作用机制与抗凋亡蛋白Bcl-2有关。     

脐带间充质干细胞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)抑制人卵巢癌SKOV3细胞增 殖及促进其凋亡的作用。方法：采用Transwell共培养观察UC-MSCs向卵巢癌细胞靶向归巢的作用;MTT 实验检测UCMSCs 条件培养基抑制SKOV3细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测其凋亡率;实时PCR检测与SKOV3细胞增殖 和凋亡相关基因Ki-67,Bax,Bcl-2的表达。结果：UC-MSCs体外向SKOV3细胞靶向归巢。MTT 结果显示UC-MSCs条件 培养基明显抑制SKOV3细胞的增殖(P<0.01)。Annexin V-FITC/PI双染法提示75%条件培养基组的凋亡率明显高于对照 组(P<0.05)。实时PCR发现增殖相关基因Ki-67的表达明显下降(P<0.01),凋亡相关基因Bcl-2的表达明显降低(P<0.01), Bax的表达明显增加(P<0.01)。结论：UC-MSCs体外能向卵巢癌细胞靶向归巢,通过调节增殖相关基因Ki-67的表达, 抑制SKOV3细胞增殖;通过调节凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达,促进SKOV3细胞凋亡。     

hsa-miR-23a-3p靶向TGFβ2对急性淋巴细胞白血病CEM/C1细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响

目的:探究hsa-miR-23a-3p靶向转化生长因子β2(TGFβ2)对急性淋巴细胞白血病细胞株CEM/C1增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响.方法:将CEM/C1细胞随机分为4组:Control组、mimic组、pcDNA-TGFβ2组和mimic+TGFβ2组,采用Li-pofectamine 2000分别转染mimic对照、miR-23a-3p mimic、TGFβ2过表达质粒及共转染miR-23a-3p mimic+TGFβ2过表达质粒.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-23a-3p、TGFβ2表达;荧光素酶报告实验验证miR-23a-3p与TGFβ2的靶向关系;克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭;微管形成实验检测细胞微管形成的结节数;Western blotting法检测 Ki67、Survivin、Caspase-3、Bax、Bcl-2、VEGF 蛋白表达.结果:与 Control 组相比,mimic 组miR-23a-3p表达、细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达量和Bax/Bcl-2比值升高,TGFβ2mRNA表达、克隆形成率、微管形成结节数及Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,侵袭细胞数减少(均P＜0.05),pcDNA-TGFβ2组与mimic组各指标变化相反(均P＜0.05);与pcDNA-TGFβ2组比较,mimic+TGFβ2组克隆形成率、微管形成结节数和Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量及Bax/Bcl-2比值升高,侵袭细胞数减少(均P＜0.05).荧光素酶报告实验证实miR-23a-3p和TGFβ2存在靶向关系.结论:hsa-miR-23a-3p通过靶向下调TGFβ2表达抑制人白血病细胞增殖、侵袭、细胞骨架重组,促进细胞凋亡.     

增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达.将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor 转染MIA PaCa-2 细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化.结果 与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织.同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍).结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中 miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关.     

山楂叶总黄酮对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制的研究

目的探讨山楂叶总黄酮(flavone mixture of crataegus leaves,FMCL)对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其分子机制.方法用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,用流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率,用Western blot 法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3P20蛋白及用RT-PCR法检测Bcl-2、Bax mRNA表达量的变化.结果与模型组比较FMCL 100μg/ml剂量组PC12细胞凋亡率下降,Bcl-2蛋白及mRNA表达量明显升高,而Bax、Caspase-3P20蛋白及Bax mRNA表达量明显降低(P<0.05或P<0.01),且在一定范围内存在剂量依赖关系.结论山楂叶总黄酮可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因及蛋白的表达从而抑制Caspase-3活化有关.     

miR-34a-5p过表达靶向抑制MET对肝癌细胞HepG2恶性增殖、侵袭和肿瘤形成的影响

目的 探究miR-34a-5p过表达对肝癌细胞HepG2恶性增殖、侵袭和肿瘤形成的影响.方法 荧光素酶实验检测miR-34a-5p与MET靶向关系.构建MET pcDNA载体过表达MET,将miR-34a-5p与pcDNA-MET单独或联合转染HepG2,将细胞随机分为4组:Control、mimic、MET和mimic+MET组进行后续实验.克隆形成法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell检测细胞侵袭、Western blot检测Ki67、PCNA、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平;构建肝癌裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分为Control组和mimic组,检测裸鼠30 d肿瘤体积变化和第30天肿瘤重量,通过免疫组化方法检测Ki67阳性表达率、TUNEL染色细胞凋亡.结果 结果表明,miR-34a-5p和MET存在直接靶向作用关系.与Control组相比较,mimic组细胞克隆形成率降低(P<0.05),Ki67、PCNA蛋白水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高(P<0.05),侵袭细胞数降低(P<0.05).MET组细胞克隆形成率升高(P<0.05),Ki67、PCNA蛋白水平升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值降低(P<0.05),侵袭细胞数升高(P<0.05);与MET组相比较,mimic+MET组细胞克隆形成率降低(P<0.05),Ki67、PCNA蛋白水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高(P<0.05),侵袭细胞数降低(P<0.05);裸鼠成瘤实验中,与Control组相比较,mimic组第25、30天肿瘤体积降低(P<0.05),肿瘤组织重量降低(P<0.05),Ki67阳性细胞数降低(P<0.05),肿瘤组织细胞凋亡率升高(P<0.05).结论 miR-34a-5p过表达靶向MET抑制抑制HepG2增殖、侵袭并促进细胞凋亡,抑制肝癌裸鼠移植瘤肿瘤的生长.     

紫草素对人大肠癌HT29细胞化疗增敏作用研究

目的:研究紫草素对人大肠癌HT29细胞奥沙利铂化疗增敏作用及其机制。方法:体外培养并取对数生长期人大肠癌HT29细胞,设紫草素(0.5 mg·L^-1)、奥沙利铂(25 mg·L^-1)、联合[紫草素(0.5 mg·L^-1)+奥沙利铂(25 mg·L^-1)]组,并设空白对照组。给药干预48 h后,CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、激活型Caspase-3的表达。结果:较空白对照组,紫草素组人大肠癌HT29细胞处于G0/G1期比例升高且G2/M期比例降低(P<0.05;P<0.01),Bax蛋白表达量升高且Bcl-2表达量降低(P<0.05;P<0.01)、Bax/Bcl-2值升高(P<0.01),激活型Caspase-3蛋白表达量升高(P<0.01)。较奥沙利铂组,联合组人大肠癌HT29细胞增殖率明显降低(P<0.05);细胞凋亡率显著升高(P<0.01);处于G0/G1期细胞比例升高而G2/M期比例降低(P<0.05;P<0.01);Bax、激活型Caspase-3蛋白表达量升高且Bcl-2表达量降低(P<0.05;P<0.01),Bax/Bcl-2值显著升高(P<0.01)。结论:紫草素具有提高人大肠癌HT29细胞奥沙利铂化疗敏感性的作用,机制可能与紫草素阻滞细胞周期进程、调节凋亡相关蛋白表达而促进HT29细胞凋亡有关。     

呼吸道合胞病毒通过调控miR-409-3p/SIRT1通路促进支气管上皮细胞凋亡与炎症因子表达

目的 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制.方法 体外培养HBECs,分别转染miR-409-3p抑制剂、SIRT1过表达载体或共转染miR-409-3p抑制剂与SIRT1小干扰RNA后,采用RSV感染进行转染,然后RT-qPCR法检测细胞中miR-409-3p和SIRT1 mRNA表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot检测细胞中Ki-67、p21、Bcl-2和Bax蛋白表达,试剂盒法检测细胞培养上清液中IL-6和TNF-α表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证SIRT1和miR-409-3p调控关系.结果 RSV感染促进HBECs细胞中miR-409-3p的表达(P＜0.05),而抑制SIRT1表达(P＜0.05),降低HBECs细胞增殖活性及细胞中Ki-67和Bcl2的蛋白表达(P＜0.05),促进HBECs凋亡及细胞中p21和Bax的蛋白及IL-6和TNF-α表达(P＜0.05).沉默miR-409-3p或过表达SIRT1可提高RSV感染的HBECs增殖活性及细胞中Ki-67和Bcl2的蛋白表达(P＜0.05),而抑制细胞凋亡率、p21和Bax的蛋白及IL-6和TNF-α表达(P＜0.05).miR-409-3p靶向负调控SIRT1表达.沉默SIRT1逆转了沉默miR-409-3p对RSV感染的HBECs增殖、凋亡及炎性因子IL-6和TNF-α表达的影响(P＜0.05).结论 呼吸道合胞病毒通过调控miR-409-3p/SIRT1通路促进支气管上皮细胞凋亡与炎症因子表达.     

纳米雄黄对卵巢癌细胞COC1凋亡的影响

目的 探讨纳米雄黄对卵巢癌细胞COC1的凋亡作用.方法 0.6 μmol/L浓度的纳米雄黄作用于COC1细胞,于不同时间收集的细胞.倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞中Bax、Bcl-2和Caspase-3的mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平.结果 0.6μmol/L浓度的纳米雄黄作用于COC1细胞48 h后出现显著的凋亡形态改变;纳米雄黄显著的促进细胞凋亡,并随着纳米雄黄处理COC1细胞时间的延长凋亡率显著性增加(P＜0.05);随着纳米雄黄处理间的延长COC1细胞中的Bax和Caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著增加(P＜0.05),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论 纳米雄黄对COC1细胞有显著的促凋亡作用,其作用机制可能与升高Bax和Caspase-3的表达和降低Bcl-2的表达有关.     

miR-223在甲型流感病毒诱导的肺上皮细胞炎症中的作用机制

目的 探究microRNA-223(miR-223)对甲型流感病毒(IAV)诱导的肺上皮细胞(human bronchial epithelial cells,BEAS-2B)炎症反应、氧化应激和凋亡的作用机制.方法 RT-qPCR检测流感患者和正常受试者血清中miR-223和NOD样受体蛋白3(NLRP3)mRNA的表达量,并检测不同时间的IAV处理对miR-223和NLRP3表达量的影响;CCK-8实验检测肺上皮细胞BEAS-2B的细胞活力;Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测BEAS-2B细胞的凋亡水平;Western blot 实验检测凋亡相关蛋白 Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2的表达水平;活性氧(ROS)指示剂DCFH-DA检测ROS的水平.结果 miR-223在流感患者血清中的表达量低于正常受试者;IAV抑制miR-223并促进NLRP3 mRNA的表达,且具有时间依赖性(P＜0.05);过表达miR-223可有效降低IAV诱导的BEAS-2B的细胞凋亡率和炎症因子的水平(P＜0.05);此外,过表达miR-223还可以缓解IAV诱导的BEAS-2B的氧化应激(P＜0.05);进一步的实验提示,miR-223抑制TLR4和p65的表达,并抑制NLRP3炎症小体的表达(P＜0.05).结论 miR-223能够缓解IAV诱导的肺上皮细胞的氧化应激和凋亡,减轻细胞损伤,其作用机制是通过抑制TLR4/NF-κB信号通路并抑制NLRP3炎症小体的活化来实现的.     

姜黄素对肾癌ACHN细胞增殖与凋亡的影响及作用机制

目的 研究姜黄素对肾癌ACHN细胞增殖与凋亡的影响,并探讨其中的作用机制。方法不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L)姜黄素作用于ACHN细胞不同时间(12、24、48 h)后,利用CCK-8检测细胞增殖活性的改变;应用Annexin-V/PI双标染色后上流式细胞仪检测细胞凋亡变化;Real-time PCR测定Notch1基因表达量的变化;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3和Notch蛋白表达情况。结果CCK-8结果表明,姜黄素作用后ACHN细胞增殖速度减慢（P<0.05）,且抑制作用呈时间及浓度依赖性;流式检测结果显示姜黄素作用后ACHN细胞凋亡增加（P<0.05）;Real-time PCR检测结果显示Notch1基因表达增加,且表达量呈时间及浓度依赖性(P<0.05);Western blot检测发现随着姜黄素浓度的增加,Bcl-2蛋白表达下降,Bax、Caspase-3、Notch1蛋白表达增加。结论姜黄素能够抑制肾癌ACHN细胞的增殖并诱导其凋亡,其过程可能通过调节Notch1基因的表达,抑制抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达,促进凋亡因子Bax蛋白表达,从而激活促凋亡因子Caspase-3,继而引发凋亡反应。     

长链非编码RNA NORAD在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖能力的影响

目的 研究长链非编码RNA DNA损伤诱导的非编码RNA (NORAD)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法 RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及miRNA的表达改变,根据表达量确定候选LncRNA;q RT-PCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中候选NORAD的表达;免疫荧光检测分析肺癌组织中细胞增殖核抗原Ki-67的表达;通过线性回归分析肺癌组织中NORAD与Ki-67的表达相关性。生物在线软件联合miRNA测序结果,并通过荧光素酶检测分析NORAD与miR-26b-5p、miR-654-5p结合情况。将A549细胞分成空白对照组(Control)、si-NORAD组、miR-26b-5p mimics、miR-654-5p mimics、si-NORAD与miR-26b-5p mimics联合组、si-NORAD与miR-654-5p mimics联合组,利用EdU检测细胞增殖能力、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡、蛋白印迹(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白(Bad、Bcl-2、Cleaved Caspase-3)的表达。结果 NORAD...     

草乌甲素对人肝星状细胞LX-2增殖及凋亡的影响

目的研究草乌甲素(bulleyaconitine A,BLA)对肝星状细胞LX-2增殖、凋亡以及相关凋亡蛋白表达的影响。方法体外培养LX-2细胞,分别给予不同BLA浓度处理24 h后采用CCK8法检测BLA对LX-2细胞的抑制率;流式细胞术检测LX-2细胞凋亡的情况;Western blot法检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达量。结果 BLA对LX-2细胞有明显抑制作用,BLA能使LX-2细胞处于S期、G2/M的细胞明显减少,差异均有统计学意义(t=9.71、4.88,P0.05),处于G1期的细胞显著增多,差异有统计学意义(t=9.71,P0.05);使Bax、Caspase-3蛋白表达量增加,Bcl-2表达降低。结论 BLA可能通过促进Bax、Caspase-3表达,抑制Bcl-2表达抑制LX-2细胞增殖,促进其凋亡。     

细胞凋亡相关因子与急性呼吸窘迫综合征的研究进展

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发病机制尚不明确，可能与炎症反应、氧化/抗氧化失调有关。细胞凋亡逐渐成为本学科研究的重点。细胞凋亡的调控主要是Bcl-2、Bax以及Caspase-3蛋白，通过检测ARDS患者体内相关蛋白的表达，可以对其发病机制进行研究和探讨。本文查阅相关文献，从Bcl-2及其同源体促凋亡的Bax基因及凋亡通路因子Caspase-3进行综述，阐明与ARDS的相互关系。