铁蛋白标记抗体制备及其在免疫电镜中的应用

目的：应用铁蛋白标记技术对结肠癌细胞系ＣＣＬ２２９细胞膜表面抗原ＬＥＡ的分布进行电镜观察,研究其在免疫电镜中的应用。方法：利用铁蛋白二步法标记羊抗鼠ＩｇＧ抗体示踪ＣＣＬ２２９细胞表面ＬＥＡ抗原的分布。结果：在ＣＣＬ２２９细胞膜上有黑色铁蛋白颗粒存在,其颗粒大,反差强。结论;铁蛋白在膜表面抗原标记上有较广泛的应用,与其它电镜标记物相比具有很大的优越性。     

电子显微镜在病理诊断中的应用

电子显微镜是利用电子与固体样品作用时发出的信息,对样品进行微区观察。目前的电镜种类很多,包括透射电镜（TEM）、扫描电镜（SEM）、扫描隧道电镜、原子力电镜等,但应用于临床病理诊断中的主要是透射电镜和扫描电镜,前者注重观察组织和细胞内的超微结构,后者则用于观察组织和细胞的表面形貌。临床病理诊断为最终诊断,目前电镜诊断技术以其可以观察到亚细胞结构的变化广泛应用于现代临床病理诊断中,已成为病理诊断中一项重要的依据,特别是在传统的临床诊断手段无法确诊的病例中,电子显微镜发挥着重大的作用。     

改进电镜底片反差法的探讨

电镜底片的反差,是反映生物组织结构的不同部位对电子散射的程度[1],即由于电子密度的不同,所形成的影像密度反差。其电子密度高低,显示了影像深浅程度的差别。差别大为反差强,差别小为反差弱。一般电镜底片的反差常常偏弱,我们通常多用硬性反差的3号放大纸扩放。但另一些底片因影调平淡,反差低,最后难以获得满意的电镜照片,影响电镜照片展现超微结构资料和证据的价值。而使用放大机提高电镜底片反差的方法未见报道。本文通过暗室技术途径[2],利用放大机改进电镜底片反差,取得了满意的效果,现介绍如下。1　方　法1.1　先将原电镜底片(负)制…     

自制硅胶染色板改进超薄切片铅染色法的操作

在制备常规电镜生物标本时,常用铅染色液对超薄切片进行染色,以增加超微结构的反差。铅染色液为目前电镜技术中最常用的全能染色剂,它具有很高的电子密度。细胞的各种结构对它都有极大的亲和力。但是铅易与空气中的二氧化碳结合,产生碳酸铅沉淀而污染切片,造成切片制作的失败。     

垂体腺瘤功能的电镜及免疫电镜分类

应用电镜及免疫电镜技术对218例垂体腺瘤进行了观察分析,并根据瘤细胞超微结构及免疫细胞化学反应特点进行了分类。53例为多颗粒型或少颗粒型生长激素细胞腺瘤,78例少颗粒型腺瘤及3例多颗粒型腺瘤属泌乳素细胞腺瘤,11例为 ACTH 细胞腺瘤。5例为促性腺激素细胞腺瘤,主要由 FSH 或 LH 阳性细胞组成。16例肿瘤为生长激素及泌乳素细胞混合腺瘤。无功能肿瘤中包括嗜酸性干细胞瘤(4例),嗜酸细胞瘤(10例),未分化细胞腺瘤(38例)。部分有激素活性的腺瘤临床上也表现为无功能肿瘤。本文报道了这些肿瘤的超微结构及免疫细胞化学反应特点。     

透射电镜样品制备用硝酸铀替代醋酸铀染色方法的探讨

目的探讨透射电镜生物样品制备时,用硝酸铀乙醇溶液替代常规醋酸双氧铀乙醇溶液染色方法。方法在相同条件下,分别用硝酸铀乙醇溶液、硝酸铀水溶液和醋酸双氧铀乙醇溶液对同一样品切片染色,在电镜下观察、比较切片反差情况。结果硝酸铀乙醇溶液染色切片与醋酸双氧铀乙醇溶液染色切片反差基本相同,而硝酸铀水溶液染色切片反差弱。结论硝酸铀乙醇溶液可替代常规的醋酸双氧铀乙醇溶液染色。     

肝炎肝硬变过程中贮脂细胞和枯否细胞的定量观察

应用免疫组化等方法,对乙型病毒性肝炎不同病变阶段肝组织的贮脂细胞和柘否细胞进行了定量观察。结果显示,贮脂细胞数量以中度慢活肝时最多,而在轻微病变和肝硬变时较少;溶菌酶阳性枯否细胞随病变加重而逐渐减少,以中度慢活肝达到最低值.结合电镜及免疫电镜观察,我们认为贮脂细胞在肝炎肝硬变过程中起重要作用,并且受到枯否细胞的调控影响.     

Hep-2细胞及人喉鳞状细胞癌组织同步辐射成像研究及其影响因素的初步探讨

探索一种观察细胞形态结构的新实验技术和方法,了解Ｈｅｐ２细胞和人喉鳞癌组织的形态结构特点并探讨影响该实验技术的因素,以便不断完善。方法①取培养４８ｈ后的Ｈｅｐ２细胞（培养的人喉鳞癌细胞株）,直接滴片法将细胞悬液滴在ＰＭＭＡ上,以同步辐射装置产生的软Ｘ射线作光源进行ＳＸＣＭ成像研究。②选择经病理确诊的喉鳞癌患者,术中取组织石蜡包埋切片,捞在１００目电镜栅网上,进行ＳＸＣＭ成像研究。③取部分喉癌组织,环氧树脂包埋超薄切片,１００目电镜栅网捞取,ＳＸＣＭ成像研究。结果①ＳＸＣＭ技术观察Ｈｅｐ２细胞,可清楚地显现细胞膜和核膜表面有很多皱褶,凹凸不平,而光镜下无法看清这种结构特点。②ＳＸＣＭ技术在观察活细胞生理状态下的形态结构时具有比光镜独特的优点;它不需要脱水、固定、染色等一系列准备工作;在观察干组织样品时与光镜达到同样的效果。③实验在进行人喉鳞癌组织电镜超薄切片ＳＸＣＭ成像时,因切片太薄,未能成功。结论ＳＸＣＭ成像与电镜的比较研究是本系列课题下一步重点研究方向之一。影响ＳＸＣＭ技术因素的多样化,尚需进一步探索,不断完善。     

兔骨髓细胞环核苷酸磷酸二酯酶在电镜下的细胞化学显示

环核苷酸磷酸二酯酶是一类水解酶。它能使环核苷酸水解,从而经生化反应和细胞化学反应定位于组织细胞内。据文献报导,此酶中的c35AMPase已定位于多种组织。但是,c35GMPase在电镜下的细胞化学显示报导尚少。我室就c35AMPase和c35GMPase在电镜下做了细胞化学显示。结果报告如下: 材料和方法 1、抽取正常家兔骨髓,用预冷的骨     

电子显微镜照片制作方法探讨

电镜已被广泛应用于工业、农业、生物医学及其它各个领域 ,因此 ,电镜技术工作就显得尤为重要。当研究人员在镜下发现有意义信息时 ,需要对信息进行照像 ,然后由电镜技术人员进行底片冲洗 ,同时制作电镜照片。所以说 ,最终检验电镜技术的好坏 ,一般取决于电镜照片的质量。1对于一张片子薄厚均匀、反差适中的超薄切片 ,我们在冲洗底片时 ,一般采用的显影液为 D— 76微粒显影液 ,定影液为 F— 5坚膜酸性定影液 ,制作出的照片效果比较理想。2对于一张反差较弱 ,片子偏薄的超薄切片 ,拍照后如果按正常的显影、停显、定影冲洗出的底片仍是弱的 ,…     

提高电镜图像反差的几点体会

如何提高电镜图像的反差的确是一个重要而又不易把握的问题。本文就工作中的经验和体会,谈谈通过其它途径和方法来提高电镜图像反差的几点体会。1样品的染色1．l染色剂的选择在常用的几种染色剂中,尽量选择原子序数较大亲合力较强的染色剂为宜。首选钢92铅82次选饿76钨74锰25。1．2染液PH值选择一般重金属在PH值增加时被水解成多核离子,最后以氢氧化物或含水的氧化物形成沉淀在组织上而使得反差增强。加氢氧化铝（PHS．匕）染色远较单碱基醋酸铅（PH70）的染色要深。在铀染色中,低PH值时醋酸双氧钢溶液只含有本结合的双氧铀离子,…     

M 期细胞选择性电镜取材法与观察

从细胞形态学的角度观察整个细胞的增殖周期,唯有分裂期(M 期)细胞变化显著,是细胞形态学研究中极受重视的观察目标。为了能对 M 期细胞进行有选择地电镜观察,作者在“选择性 M 期细胞同步培养法”的启发下,加以改进、简化,建立了单层培养细胞选择性 M 期细胞的电镜取材新方法,收效良好,基本达到了电镜下大量观察 M 期细胞超微结构的目的,现将具体方法介绍如下。     

电镜细胞化学半薄切片的制作及观察

在电镜半薄切片标本上可以观察到细胞各部分的整体结构,也是电镜细胞化学研究手段之一。现将我们在制做及观察半薄切片的体会简介如下:     

树突状细胞和巨噬细胞对外源性抗原内吞路径的比较研究

目的 观察并比较小鼠树突状细胞（ＤＣ）和巨噬细胞对外源性抗原的内吞路径的差异,方法 制备小鼠骨髓ＤＣ和腹腔巨噬细胞,然后让ＤＣ和巨噬细胞与辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）－５ｎｍ胶体金共孵育１０分钟后再培养０～１２０分钟,进行酸性磷酸酶细胞化学反应和组织相容性抗原（ＭＨＣ）Ⅱ免疫胶体金标记,最后在电镜下观察５ｎｍ胶体金的细胞内运行路径。结果 ＤＣ内吞ＨＲＰ５－ｎｍ胶体金１０分钟后再培养３０分钟,大部分５ｎ     

电镜技术在非何杰金氏淋巴瘤针吸细胞学的应用

应用透射电镜和扫描电镜观察非何杰金氏淋巴瘤(NHL)14例。组织学分型:B 细胞性淋巴瘤8例.T 细胞性淋巴瘤6例。介绍了如何制作针吸细胞电镜标本,并讨论这种电镜观察技术的优缺点以及 T 细胞起源的瘤细胞和 B 细胞起源的瘤细胞在透射电镜、扫描电镜下的特点。     

TNFα导致肝星状细胞激活的观察

目的 :通过电镜观察 ,探讨TNFα和肝星状细胞激活的关系。方法 :采用体外培养大鼠HSC ,将细胞分为对照组和TNFα组 ,收集细胞制作电镜标本 ,在透射电镜下观察HSC的形态学的改变。结果 :电镜下见TNFα组细胞体积增大 ,可见粗面内质网数量明显增多 ,线粒体、内质网呈轻度扩张 ,呈明显激活样改变。结论 :TNFα对HSC有增殖激活的作用     

超薄切片的漂浮染色法及避免污染要点

超薄切片的漂浮染色法及避免污染要点高美钦福建医科大学病理解剖学教研室（福州３５０００４）关键词显微切片术染色法在电镜技术中，制取一张优良的超薄切片除了应具备厚薄适中、平整、无刀痕和颤痕之外，还必须干净，结构反差好，这对提高电镜观察效率及拍片质量，起了...     

对人细胞桥粒的超微结构及其发生来源的探讨

电镜的问世对细胞连接的超微结构提供了较为详尽的描述。但对其发生形式还缺乏明确的阐述。尤其是细胞连接形式之一的细胞桥粒为什么会在某些疾病时出现在细胞内部,据作者所知,迄今尚无人研究。所以观察疾病时桥粒的变化对了解其发生来源亦不无裨益。     

介绍一种游离细胞电镜样品的制作方法

标本制备是电镜技术的重要组成部分,它的好坏对整个实验有很大影响。在研究观察游离细胞的形态时,如何对这些微小样品进行包埋、切片,是电镜工作者比较关心的问题。本文仅以血细胞为例,介绍一种制备     

人食管鳞癌的超微结构研究——人食管鳞癌的初步电镜观察

在电镜观察35例人正常食管上皮的基础上,本文对13例手术切除食管癌的超微结构进行了研究。根据电镜观察,光镜I～Ⅲ级鳞癌细胞及其间质在超微结构上具有不同的特点。 I级鳞癌癌巢在电镜下司分为5型癌细胞。即癌巢外层细胞、癌巢中层细胞、