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1.
目的 观察染砷小鼠大脑神经突触结构变化及相关基因表达.方法 30只昆明种小鼠,按体重分为3组,即对照组、1和4 mg/L染砷组,染毒60 d.应用电镜和基因芯片技术观察砷对小鼠大脑神经突触结构及相关基因表达的影响.结果 对照组小鼠大脑突触结构清晰,突触前膜、间隙和后膜特化带清晰,前突触中可见较多的突触小泡.染砷组小鼠大脑突触前膜、间隙及后膜轮廓清晰,突触前膜的突触小泡数量明显减少.基因芯片结果 显示,染砷组小鼠大脑突触相关基因差异表达共有10条.上调基因为依赖于钙-钙调蛋白的蛋白激酶Ⅳ(Camk4)、速激肽1(Tac1)、多巴胺受体D1A(Drd1a)和多巴胺受体D2(Drd2);表达下调的基因共有6条,分别为complexin蛋白2(Cplχ2)、钙通道α1A亚单位(Cacna1a)、谷氨酸受体互变异构NMDA2B(Grin2b)、亲代谢性谷氨酸受体7(Grm7)、肌萎缩性(脊髓)侧素硬化2(Als2)和亲代谢性谷氨酸受体2(Grm2).结论 亚慢性砷暴露对小鼠大脑突触结构及相关基因表达造成损伤性影响,提示大脑神经元突触可能是砷神经毒性作用靶部位.  相似文献   
2.
小鼠早期胚胎细胞超薄切片制备法   总被引:4,自引:0,他引:4       下载免费PDF全文
目的 探讨小鼠早期胚胎细胞超薄切片的制备方法,观察不同时期小鼠早期胚胎细胞的超微结构变化。方法 在体视显微镜下固定,清洗小鼠早期胚胎细胞,3%-4%琼脂预包埋,常规脱水,渗透,包埋,超薄切片后,透射电镜下观察。结果 准确性高,只需几个胚胎细胞即能做出超薄切片。结论 电镜下胚胎细胞超微结构保存良好。  相似文献   
3.
吕广艳  高船舟  曲淑贤  田晓光 《医学信息》2006,19(12):2195-2196
目的 分析电镜超薄切片污染产生的原因及消除污染的对策。方法 对样品制备及观察的每个环节逐一分析,对可能引起污染的各种因素采取有针对性的解决方法,严格按照透射电镜生物样品的制备要点进行操作。结果 消除了污染,保证了超薄切片的质量,电镜下拍出高质量的照片。结论 污染的原因是多方面、多因素的,只要工作中精益求精,基本上可以避免切片污染。  相似文献   
4.
本文介绍制备黏附聚集的整体血小板电镜样品。将抗凝血直接铺在覆有Formvar(聚乙烯醇缩甲醛)的铜网上,然后依次对样品进行温育、冲洗、固定、再冲洗、空气自然干燥后电镜观察。这种方法制作简单而且省时,在电镜下可见各种形态完好的血小板,圆形、树突形、扩展形度聚集形。  相似文献   
5.
透射电镜样品制备用硝酸铀替代醋酸铀染色方法的探讨   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的探讨透射电镜生物样品制备时,用硝酸铀乙醇溶液替代常规醋酸双氧铀乙醇溶液染色方法。方法在相同条件下,分别用硝酸铀乙醇溶液、硝酸铀水溶液和醋酸双氧铀乙醇溶液对同一样品切片染色,在电镜下观察、比较切片反差情况。结果硝酸铀乙醇溶液染色切片与醋酸双氧铀乙醇溶液染色切片反差基本相同,而硝酸铀水溶液染色切片反差弱。结论硝酸铀乙醇溶液可替代常规的醋酸双氧铀乙醇溶液染色。  相似文献   
6.
电镜诊断的快速制样方法   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
讨论用于临床诊断的透射电镜生物样品快速制样方法。对正常及病变组织进行前固定、漂洗、后固定、漂洗、脱水、浸透及包埋聚合、超薄切片、铀铅双染过程实验研究。从固定到聚合过程只需5h,组织和细胞的各种超微结构保存良好。  相似文献   
7.
目的 探讨谷氨酸信号通路在恶性黑素瘤发病中的作用机制.方法 取对数生长期恶性黑素瘤WM451LU细胞,分为6组,①阴性对照组加入100μl的PBS液;②MK801组加入100 μmol/L NM-DAR非竞争性拮抗剂MK801;③CPCCOEt组加入10 μmol/L代谢型谷氨酸受体1(mGluR1)非竞争性拮抗剂CPCCOEt;④MAP2组加入腺病毒-微管相关蛋白2a(Ad-MAP2a);⑤MK801+MAP2组加入100 μmol/L MK801和Ad-MAP2a;⑥CPCCOEt+MAP2组加入10 μmol/L CPCCOEt和Ad-MAP2a.用Western印迹观察转染Ad-MAP2a载体后WM451LU细胞中离子型谷氨酸受体甲基-D-天冬氨酸受体2A(NMDAR2A)的变化.并通过细胞迁移、侵袭实验分别研究上调MAP2表达与MK-801、CPCCOEt分别或共同作用下,肿瘤细胞的迁移及侵袭性的变化.同时进行了裸鼠恶性黑素瘤动物模型的体内研究,比较上述药物的体内抑瘤作用.结果 Western印迹发现,转染Ad-MAP2a的WM451LU细胞NMDAR2A表达降低.体外迁移实验结果显示,MAP2组发生迁移的细胞为(117.04±2.76)个/高倍视野(HP),MK801组(107.64±6.50)个/HP,CPCCOEt组(97.36±4.79)个/HP,MK801+MAP2组(43.28±3.02)个/HP,CPCCOEt+MAP2组(30.76±3.97)个/HP,与阴性对照组(152.3±5.75)个/HP比较,P值均<0.01.体外侵袭实验结果显示,MAP2组发生侵袭的细胞数为(102.56±3.81)个/HP,MK801组(98.21±5.52)个/HP,CPCCOEt组(118.23±7.96)个/HP,与阴性对照组(178.43±8.75)个/HP相比,P值均<0.05;MK801+MAP2组(43.89±5.08)个/HP,CPCCOEt+MAP2组(58.45±6.88)个/HP,与阴性对照组相比,P值均<0.01.裸鼠体内研究发现,用药第15天时,MAP2组肿瘤体积为(224.02±46.19)mm3,MK801组(160.33±33.91)mm3,MK801+MAP2组(91.49±21.48)mm3,CPCCOEt组(202.30±52.37)mm3,CPCCOEt+MAP2组(111.13±69.81)mm3,与阴性对照组(342.70±60.92)mm3比较,P值均<0.01.结论 体外阻滞恶性黑素细胞的谷氨酸信号通路可抑制恶性黑素细胞的迁移及侵袭;体内阻滞恶性黑素细胞的谷氨酸信号通路可抑制恶性黑素瘤的增殖,并可使肿瘤细胞的形态发生变化.
Abstract:
Objective To investigate the action mechanism of glutamate-mediated signaling pathway in malignant melanoma. Methods WM451LU melanoma cells in log phase were classified into 6 groups, negative control group treated with PBS (100 μl), MK801 group treated with the non-competitive N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist MK-801 (100 μmol/L), CPCCOEt group treated with non-competitive metabotropic glutamate receptor 1 (mGluR1) antagonist CPCCOEt, MAP2 group transfected with adenovirus vector containing microtubule associated protein 2a (Ad-MAP2a), MK801 + MAP2 group treated with MK801 of 100 μmol/L and transfected with Ad-MAP2a, CPCCOEt + MAP2 group treated with CPCCOEt of 10 μmol/L and transfected with Ad-MAP2a. Western blot was performed to detect the expression of an ionotropic glutamate receptor, i.e., N-methyl-D-aspartate receptor type 2A (NMDAR2A) in WM451LU cells transfected with Ad-MAP2a. Scratch motility assay and cell invasion assay were conducted in vitro to detect the changes in migration and invasion ability of WM451LU cells after treated with Ad-MAP2a, MK-801, CPCCOEt alone or in combination. In vivo study was carried out to compare the inhibitory effect of the above treatments on melanoma. Results Western blot revealed a decrease in the expression of NMDAR2A in WM451LU cells after transfected with Ad-MAP2a. The scratch motility assay showed that the number of migrating cells per high power field was 117.04 ± 2.76 in MAP2 group,107.64 ± 6.50 in MK801 group,97.36 ± 4.79 in CPCCOEt group, 43.28 ± 3.02 in MK801 + MAP2 group,30.76 ± 3.97 in CPCCOEt + MAP2 group,significantly different from that in the negative control group (152.3 ± 5.75,all P < 0.01 ). Cell invasion assay demonstrated that the average number of invading cells per high power field in the negative control was significantly higher than that in MAP2 group, MK801 group, CPCCOEt group, MK801+MAP2 group and CPCCOEt + MAP2 group (170.43 ±8.72 vs. 98.26 ± 3.84, 97.22 ± 5.54, 112.23 ± 7.21, 42.89 ± 5.06, 58.25 ± 6.68, P < 0.05, 0.05, 0.05, 0.01and 0.01, respectively).A significant decrease was observed in the average volume of experimental melanoma in mice of MAP2 group, MK801 group, MK801 + MAP2 group, CPCCOEt group and CPCCOEt + MAP2 group compared with the negative control group (224.02 ± 46.19 mm3, 160.33 ± 33.91 mm3, 91.49 ± 21.48 mm3,202.30 ± 52.37 mm3, 111.13 ± 69.81 mm3 vs. 342.70 ± 60.92 mm3, all P < 0.01 ). Conclusions To block the glutamate signaling pathway in vitro can inhibit the invasion and migration of melanoma cells, and to block the pathway in vivo can inhibit the growth of malignant melanoma and alter the morphology of melanoma cells.  相似文献   
8.
前列腺增生并发尿潴留膀胱壁病理电镜观察   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:观察前列腺增生症(BPH)并发尿潴留膀胱逼尿肌功能变化。方法:对10例BPH并慢性尿潴留患者实施前列腺摘除术时取膀胱平滑肌组织进行透射电镜观察,同时用1例外伤性膀胱破裂及1例膀胱异物患者的膀胱平滑肌组织作对照。结果:BPH并慢性尿潴留患者的膀胱平滑肌显示出下列病变,即平滑肌细胞肥大,排列紊乱,细胞间连接结构减少,其中以胞突连接为主,细胞内线粒体肿胀,胞膜有高电子密度沉积物,脱落细胞胞浆成分散  相似文献   
9.
电子显微镜技术现已广泛用于科研、医学领域,用于临床诊断。对于疾病的治疗提供可靠的依据。我们电镜室工作人员主要负责电镜制样工作,但是取材是由研究生和科研人员亲自操作,标本取好后,放入2.5%戊二醛固定后送到我们电镜室。在取材过程中出现的问题最多,如果方法不正确将导致实验结果失败,所以电镜取材是整个样品制备过程中的关键步骤之一。研究生肩负着建设国家的重任,是国家的栋梁,培养研究生是我们当老师的责任。下面是如何指导研究生电镜取材和取材过程中出现的一些问题及怎样解决做一介绍,介绍如下:  相似文献   
10.
[目的]探讨培养平滑肌细胞透射电镜制样方法。[方法]将平滑肌细胞培养在3.5 cm的塑料培养皿上,连同培养皿一起进行固定、脱水、浸透,然后将培养皿切开,一部分倒扣包埋,另一部分切成小条,放入胶囊中包埋,聚合后超薄切片,透射电镜横向和纵向观察细胞的超微结构。[结果]完整保存了细胞生存状态时的超微结构;在倒扣包埋后横向切片中,细胞内有大量线粒体、内质网、微管、微丝等;纵向切片中,可见细胞连接和细胞突起。[结论]利用原位包埋超薄切片技术可以对贴壁细胞进行制样,在电镜下观察贴壁细胞超微结构。  相似文献   
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