慢性肾脏病5期患者桡动脉钙化相关因素分析

目前血管钙化(vascular calcification,VC)被认为是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者常见的并发症,血管钙化的程度是强有力的心血管病死率的预测因素[1]。血管钙化患者可出现血管顺应性降低、动脉舒张能力减弱、心脏后负荷增加、难以控制的高血压及脏器缺血等。因此,早期发现及预防CKD患者血管钙化,对于预防心血管事件的发生具有重要意义。     

Wnt/β-catenin信号通路在慢性肾脏病血管钙化中作用的研究进展

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者血管钙化(vascular calcification, VC)的发生率高、危害性大,具体发病机制仍未明确。近期研究发现Wnt/β-catenin信号通路参与VC的发生与发展,与慢性肾脏病矿物质和骨异常(chronic kidney disease-mineral and bone disorder,CKD-MBD)的骨-血管轴密切相关,并且在CKD病程中的调节出现异常,本文就Wnt/β-catenin信号通路在慢性肾脏病血管钙化中作用的研究进展做一综述。     

血管内皮细胞生长因子的家族成员及作用

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)又称血管通透性因子(vascular permeability factor,VPF)或血管调理素(vasculotropin),是一组功能强大且能产生多种效应的细胞因子[1].     

慢性肾病血管钙化的发病机制研究进展

血管钙化是慢性肾病（chronic kidney disease，CKD）患者并发心血管疾病的主要原因，钙磷代谢紊乱、脂肪因子、炎症、微生物菌群以及氧化应激等一系列因素引起的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）成骨样转化与凋亡、基质囊泡和凋亡小体的形成、钙调因子的失衡共同促进了CKD血管钙化的发生发展。本文就CKD血管钙化的发病机制作一综述，为CKD血管钙化的具体机制和治疗靶点的进一步研究提供依据。     

血管内皮生长因子在脑缺血再灌注损伤中的作用研究进展

<正>血管内皮生长因子又称(vascular endothelial growth factor,VEGF)血管调理素因子(vascutotropin)或血管通透因子(vascular permeability,factor),是内皮细胞产生的特异性促有丝分裂原,具有促进内皮细胞增生、迁移,增加血管通透性及加速新血管形成的作用~([1])。脑缺血后,VEGF不仅在慢性期能够促进血管     

机械牵张引起高张应变刺激小鼠血管平滑肌细胞钙化形成

目的探索机械牵张(mechanical stretch, MS)引起的高张应变对血管平滑肌细胞钙化的影响。方法选用小鼠主动脉平滑肌细胞MOVAS,应用定制的硅胶板牵张器,牵张20%幅度的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs）作为实验组,模拟高血压下的高张应变环境;将不进行牵张的VSMCs作为对照组。使用荧光定量PCR和Western印迹法检测细胞α-SMA、Runx2基因和蛋白的表达,荧光定量PCR检测骨钙素(osteocalcin）、骨桥蛋白（osteopontin）的表达,使用邻甲酚酞络合酮比色法定量检测两组细胞钙化沉积,使用对硝基苯磷酸盐法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性。结果在细胞维持贴壁生长的72h以内,随着牵张时间的增加,血管平滑肌细胞的α-SMA表达下降,Runx2、osteocalcin、osteopontin表达水平增加,钙化沉积和ALP活性增加。结论牵张后的高张应变可以诱导血管平滑肌细胞钙化形成。     

表没食子儿茶素没食子酸酯减轻大鼠血管平滑肌细胞钙化的实验研究

目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响.方法 制备β-甘油磷酸盐诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化模型.实验分为4组:对照组、钙化组、单纯EGCG组及EGCG干预组(又分为10-7、10-6、10-5和10-4mol·L-1的EGCG4个亚组).Von Kossa染色观察细胞钙化情况,生化试剂盒比色法测定钙含量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性.结果 VSMCs钙化组Von Kossa染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量黑色颗粒聚集;与对照组比较,钙化组VSMCs钙含量、ALP活性均有明显增加;10-7～10-4mol·L-1EGCG干预组VSMCs钙含量、ALP活性呈剂量依赖性有显著降低.结论 EGCG具有抑制VSMCs钙化的作用.     

VEGF在膀胱肿瘤中的作用与研究进展

血管内皮生长因子(vascular endotheliar growth factor,VEGF)又称血管通透因子(vascular permeability factor,VPF),是一种高度特异性的血管内皮细胞有丝分裂素,通过与其特异性受体(VEGFR)结合,引起一系列信号传导,刺激血管内皮细胞增殖和血管通透性增加,促进新生血管生成,在肿瘤的生长和转移中发挥重要作用.     

血管平滑肌细胞与血管钙化机制的研究进展

血管钙化是动脉粥样硬化、糖尿病、慢性肾脏疾病及衰老等疾病的共同病理表现,是导致心血管疾病高患病率和高病死率的直接因素。近年来,研究认为血管钙化是一个与骨形成相似的主动过程。最近的一些研究表明,衰老的血管平滑肌细胞(VSMCs)在血管钙化的形成中起着重要的作用,而VSMCs向成骨样细胞表型转换可能是导致血管钙化的主要原因。     

血液透析患者血清骨钙素水平及其与血管钙化的关系

目的 观察血液透析患者血管钙化的发生情况,探讨血清骨钙素水平与血管钙化的关系.方法 采用酶联免疫吸附法测定血清骨钙素水平;X线片检测腹主动脉、股动脉及桡动脉部位血管钙化,计算血管钙化积分;检测患者的一般生化指标;对各参数的相互关系进行统计分析.结果 入选30例血液透析患者及15例健康对照者,X线片显示血液透析患者中19例(63.3％)有不同程度、不同部位的血管钙化.轻度钙化11例(占发生钙化人数的57.9％),中度钙化5例(占发生钙化人数的26.3％),重度钙化3例(占发生钙化人数的15.8％),正常对照组无人发生血管钙化.有血管钙化者血清骨钙素水平明显高于无血管钙化者(P＜0.05);中、重度血管钙化的血液透析患者血清骨钙素水平明显高于无钙化或轻度钙化患者(P＜0.05).多元线性回归分析显示血清骨钙素水平是血管钙化积分的独立影响因素.结论 血液透析患者普遍存在血管钙化,血清骨钙素水平是血管钙化的独立影响因素.     

血维生素K水平与慢性肾脏病血管钙化相关性研究

目的 探讨血维生素K水平与慢性肾脏病(CKD)血管钙化的相关性.方法 选取2015年2月至2017年2月四川省医学科学院·四川省人民医院收治的CKD患者80例为研究对象,按是否合并血管钙化分为钙化组(n=50)和对照组(n=30),对比两组血钙(Ca)、血磷(P)、钙磷乘积(Ca×P)、碱性磷酸酶(ALP)和骨保护素(OPG)水平,检测其血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)、甲状旁腺激素(PTH)、成纤维生长因子23(FGF-23)、基质-γ-羧基谷氨酸蛋白(MGP)、维生素K2水平及血管钙化评分,分析影响CKD患者血管钙化的危险因素,同时对比不同血管钙化程度患者血清K2及上述指标水平,分析血清K2与血管钙化指标的相关性.结果 钙化组血清P、Ca×P、ALP、OPG高于对照组(P<0.05),而血Ca低于对照组(P<0.05);钙化组血清hs-CRP、IL-6、PTH、FGF、MGP和血管钙化评分高于对照组,血清K2水平较对照组低(P<0.05);Logistic回归分析显示,血Ca、MGP、hs-CRP、FGF-23、K2水平是影响CKD患者血管钙化的独立危险因素(P<0.05);血管重度钙化组与轻中度钙化组比较,血清Ca、K2降低,MGP、hs-CRP、FGF-23升高(P<0.05);相关分析显示,CKD患者血K2水平与血清Ca呈正相关,与MGP、血管钙化积分、FGF-23呈负相关(P<0.05).结论 CKD患者存在的血管钙化与血维生素K水平有关,血维生素K2是影响CKD患者血管钙化的独立危险因素.     

慢性肾病大鼠血管钙化与骨代谢标志物的相关性研究

目的研究慢性肾病(CKD)大鼠血管钙化与血清骨代谢标志物的相关性。方法将36只雄性SD大鼠随机分为对照组(18只)和CKD血管钙化组(18只)。钙化组予以腺嘌呤联合高磷饲料,对照组予以生理盐水和普通饲料。实验第2、4、6周末处死大鼠,留取主动脉行Von Kossa染色和钙含量检测钙化程度,留取血、尿检测尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和骨代谢标志物:钙(Ca)、磷(P)、1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)、甲状旁腺素(PTH)、骨源性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OC)、总Ⅰ型前胶原氨基末端肽(tPINP)、β-Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(β-CTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)及24 h尿蛋白定量(24 h-Upro)。结果对照组各时间点主动脉Von Kossa染色均未见黑色物质沉积,CKD血管钙化组随时间进展黑色物质沉积逐渐增多。与对照组相比,CKD血管钙化组BUN、Scr、24 h-Upro、主动脉钙含量升高(P<0.05);Ca、1,25(OH)2D3、PTH、tPINP、β-CTX、TRACP-5b降低(P<0.05),P、Ca*P升高(P<0.05),BALP、OC升高(P>0.05);经二元logistic回归发现血清Ca*P升高、PTH和TRACP-5b降低是血管钙化的独立危险因素。根据主动脉钙化程度,将CKD血管钙化组进一步分为轻中度钙化(2 W和4W)和重度钙化(6 W)两个亚组。与轻中度钙化组相比,重度钙化组BUN、Scr、主动脉钙含量升高(P<0.05),24 h-Upro升高(P>0.05);Ca、P、1,25(OH)2D3、tPINP、TRACP-5b升高(P>0.05),Ca*P、PTH、BALP、β-CTX升高(P<0.05),OC降低(P<0.05);进行血管钙化严重程度的危险因素分析发现血清Ca*P升高和OC降低是血管钙化严重程度的独立危险因素。相关性分析显示血清Ca*P、PTH、BALP、β-CTX水平与血管钙化程度呈正相关,OC与血管钙化程度呈负相关。结论 CKD大鼠血管钙化与骨代谢密切相关,检测血清骨代谢标志物有助于评估血管钙化的发生和判断血管钙化的严重程度及进展。     

绿茶对实验大鼠血管钙化的影响

目的观察饮用绿茶对大鼠血管钙化的影响及其可能机制。方法用肌注维生素D3和灌胃尼古丁诱导大鼠血管钙化模型。实验分为对照组、钙化组、低剂量和高剂量绿茶干预组。Von Kossa染色,原子吸收分光光度法测定钙含量,放射免疫分析法测定血浆、血管骨钙素(osteocalcin,OC)、血管紧张素Ⅱ(angiotensin II,AngⅡ)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性。结果钙化组大鼠血管染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量黑色颗粒聚集;与对照组相比,主动脉钙含量、ALP活性、OC和AngⅡ含量均有明显增加;采用50g/L和100 g/L绿茶防治大鼠均可抑制血管钙化,且高剂量时效应强于低剂量;与钙化组相比较,血管组织钙化指标均下降,而主动脉AngⅡ含量亦有减少。结论饮用绿茶可能部分通过拮抗血浆和血管组织局部的AngⅡ系统效应而产生抑制大鼠血管组织钙化的作用。     

补骨脂酚启动自噬减轻β-GP诱导的小鼠主动脉中膜钙化

目的：在选定的36种中药单体中筛选能够启动细胞自噬的药物;探究补骨脂酚对小鼠血管平滑肌细胞自噬的影响以及对血管平滑肌细胞钙化的影响。方法：从中草药中提取的黄酮类化合物以不同浓度处理人脑胶质瘤细胞(human glioma cells,U87)72 h,用MTT法得到药物对U87细胞的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀),并以小于IC₅₀浓度的条件下以不同浓度梯度处理U87细胞,观察U87细胞GFP-LC3(微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated protein light chain 3,LC3)的荧光信号和Western blot检测自噬指标LC3从而观察细胞自噬活动激活情况,以筛选出能够启动自噬的药物。后续选取补骨脂酚进行进一步实验,探究药物启动自噬后对血管平滑肌细胞钙化的影响。使用β-GP构建小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化模型,分为对照组(C-CTR组)和钙化组(C-CAL组),并通过...     

内质网应激在高糖所致血管平滑肌细胞钙化中的作用与机制

目的：探讨内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激在高糖引起的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用与机制。方法35 mmol/L D-葡萄糖(高糖)处理 VSMCs,模拟糖尿病状态,观察高糖能否引起 VSMCs 的 ER 应激和 VSMCs 表型转化(收缩型转变为成骨样细胞),观察 ER 应激的抑制剂对VSMCs 钙化的效应,采用比色法、o-cresolphthalein 法和 western blot 观察碱性磷酸酶活性、钙沉积和骨分化转录因子(Runx2)等指标。结果应用35 mmol/L D-葡萄糖分别处理 VSMCs 3 d 或7 d,可引起 VSMCs 的 ER 应激蛋白表达上调、碱性磷酸酶活性增加、钙沉积和骨分化标志蛋白增多;苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)预处理在抑制 VSMCs 的 ER 应激的同时,能阻断高糖所致 VSMCs 钙化(表现为碱性磷酸酶活性、钙沉积和骨分化标志蛋白下降)。结论高糖能激活 VSMCs 的 ER 应激,继而引起 VSMCs 凋亡和钙化,提示 ER 应激在高糖引起的VSMCs 钙化中起着重要作用。     

醛固酮促进大鼠血管钙化的可能机制

目的:在大鼠血管钙化模型上,探讨醛固酮(aldosterone,Aldo)在血管钙化中的作用及其可能机制。方法:肌注维生素D3和灌胃尼古丁(VDN)诱导大鼠血管钙化,运用von Kossa染色、原子吸收测定钙含量、45Ca2+沉积及碱性磷酸酶(ALP)活性测定判断血管钙化程度,半定量RT-PCR方法测定骨桥蛋白(OPN)mRNA水平;放射免疫法测定血浆和血管组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和Aldo含量。结果:VDN处理组大鼠血管von Kossa染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量棕黑色颗粒聚集;主动脉钙含量较对照组高5.8倍(P<0.01);血管组织45Ca2+聚积和ALP活性分别较对照组高3倍和2.5倍(P<0.01);血管OPN mRNA表达明显上调58%(P<0.01);AngⅡ和Aldo含量分别较对照组高58%和80%(P<0.01)。运用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)和Aldo受体阻断剂可明显改善上述指标变化,与单纯VDN处理组大鼠相比较,VDN+captopril组主动脉钙含量、45Ca2+聚积及ALP活性分别较单纯钙化组低37%、59%和62%(均P<0.01)。而VDN+spironolactone组分别低32%、44%和60%(均P<0.01)。血管OPN mRNA水平亦较单纯钙化组低30%和29%(P<0.01)。结论:VDN诱导的血管钙化大鼠血管组织AngⅡ和Aldo生成增加,ACEI和Aldo受体阻断剂明显减轻血管钙化,提示Aldo促进血管钙化并参与钙化发生。     

脂质体携载精氨酸对大鼠钙化血管精氨酸/NO途径的影响

目的:观察钙化血管精氨酸/NO途径的改变和脂质体携载精氨酸对血管钙化及精氨酸/NO途径的影响。方法:维生素D3注射制备大鼠血管钙化模型,检测血管钙含量、血浆精氨酸和亚硝酸盐含量、血管环磷酸鸟苷(cGMP)含量、血管一氧化氮合酶(NOS)活性及血管精氨酸水平。结果:钙化组大鼠血管钙含量较对照组升高7.5倍(P<0.01),血浆NO生成减少,血管cGMP水平降低,血管NOS活性增高(P<0.01),但精氨酸含量明显减少(-19.1%,P<0.01)。脂质体携载精氨酸治疗后血管钙含量较钙化组降低51.2%(P<0.01),血浆NO生成增加,血管cGMP含量增加5.1%(P均<0.05),血管精氨酸含量增加15.7%(P<0.05)。结论:给予脂质体携载精氨酸治疗可以减轻大鼠的血管钙化程度,改善钙化血管L-Arg/NOS/NO/cGMP途径紊乱,提示脂质体携载精氨酸对防治动脉粥样硬化等疾病的血管钙化可能具有潜在临床意义。     

维持性血液透析患者的血管钙化情况及危险因素分析

目的了解维持性血液透析患者的血管钙化情况,探讨其危险因素。方法收集90例维持性血液透析患者的临床资料,拍摄骨盆、双手X线片,计算血管钙化评分,测量血压水平,检测钙、磷等血生化指标和全段甲状旁腺素(iPTH)水平,多元Logistic回归分析血管钙化的危险因素。结果 90例维持性血液透析患者中60例(66.7%)存在不同程度的血管钙化,38例(42.2%)存在中重度钙化。60岁以上、男性、糖尿病、最长透析间期24h尿量<200ml患者发生中重度钙化的危险分别是<60岁、女性、非糖尿病、24h尿量≥200ml患者的2.80、2.62、4.68、3.00倍。中重度钙化患者的每日服用钙剂剂量、校正血钙、钙磷乘积水平较高,P<0.05。以血管钙化评分为因变量,多元Logistic回归分析结果显示,高水平的钙磷乘积、碱性磷酸酶与血管钙化的发生呈正相关,透析频率与血管钙化呈负相关。结论维持性血液透析患者普遍存在血管钙化,老龄、男性、糖尿病、残余肾功能丧失、钙磷乘积、碱性磷酸酶、透析频率低是血管钙化的相对危险因素。     

法尼醇X受体在终末期肾病血管钙化中的作用

目的 探讨法尼醇X受体(FXR)在终末期肾病(ESRD)患者桡动脉组织中的表达及其与血管钙化之间的关系.方法 免疫组织化学染色观察正常桡动脉组织(n=5)和ESRD患者桡动脉组织(n=15)中FXR、CD68、Runx2表达,茜素红染色判断血管钙化,分析FXR阳性表达与CD68、Runx2、血管钙化之间的关系.结果 正常桡动脉无钙化,15例患者11例出现血管钙化,钙化主要集中在血管中膜;FXR主要表达在血管平滑肌细胞,ESRD患者桡动脉FXR阳性表达积分较正常组织升高(P ＜0.01);FXR阳性表达积分与CD68阳性细胞积分无相关性,但与血管钙化积分、Runx2阳性细胞表达积分以及血低密度脂蛋白胆固醇和三酰甘油水平呈负相关(相关系数分别为-0.77、-0.68、-0.71和-0.62,均P＜0.05);钙化积分与血磷、超敏C-反应蛋白(sCRP)及甲状旁腺激素(iPTH)呈正相关(相关系数分别为0.82、0.56和0.64,均P＜0.05).结论 ESRD患者桡动脉FXR阳性表达较对照组升高,FXR可能参与了血管钙化的发生.