闽产厚朴叶中厚朴酚、和厚朴酚提取工艺研究

目的 探讨闽产厚朴叶厚朴酚及和厚朴酚的提取工艺及其含量测定方法 . 方法 采用正交设计实验,以厚朴叶中的厚朴酚及和厚朴酚含量为考察指标,对影响厚朴叶厚朴酚及和厚朴酚提取率的因素进行探讨,采用HPLC法测定其含量. 结果 超声波提取法对厚朴叶的厚朴酚及和厚朴酚提取率最高;最佳工艺为:甲醇为溶剂,料液比1:75(g/mL),50℃,超声20 mn.并用HPLC建立了其含量测定方法 ,厚朴酚在10～60μg·mL<'-1>范围内线性良好,r=0.9996;和厚朴酚在20～120μ·mL<-1>范围内线性良好,r=0.9997,含量分别为0.09%和0.16%,两酚平均含量为0.25%. 结论 采用超声波提取法提取,HPLC进行含量测定,探作简便,稳定性好,结果 准确,适合用于厚朴叶厚朴酚及和厚朴酚的提取和含量测定.     

麻仁丸中厚朴酚与和厚朴酚测定方法的研究

目的建立麻仁丸中厚朴酚与和厚朴酚的提取工艺并对其方法学进行研究。方法采用单因素考察方法确定适宜的处理方法,HPLC测定厚朴酚与和厚朴酚的含量ODS柱(4.6×250mm,5um),流动相:甲醇一水(78∶22);检测波长294mm。结果麻仁丸中厚朴酚与和厚朴酚的提取方法为:以100%甲醇为溶剂,超声提取50 min。厚朴酚的线性范围为0.3436～1.718μg(r=0.9992),平均回收率为99.90%,RSD为2.38%(n=6);和厚朴酚的线性范围为0.3584～1.792μg(r=0.9995),平均回收率为99.42%,RSD为1.39%(n=6)。结论所建立的HPLC方法简便、重复性好,可作为麻仁丸中厚朴酚与和厚朴酚的含量测定方法。     

舒肝健胃丸质量标准研究

目的研究舒肝健胃丸的质量控制方法。方法采用薄层色谱(TLC)法对舒肝健胃丸处方中的香附、白芍、柴胡、延胡索进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法对厚朴中的厚朴酚与和厚朴酚进行含量测定,色谱柱为Hypersil ODS2 C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水-冰醋酸(60∶38∶2),检测波长294 nm,柱温35℃,流速1 m L/min,进样量10μL。结果 TLC鉴别专属性强,斑点清晰,且阴性对照无干扰;含量测定中,厚朴酚与和厚朴酚的回归方程分别为Y=12 335X-4 745.1(r=0.999 1),Y=1598.1X-3 569.4(r=0.999 3)。结果表明,厚朴酚与和厚朴酚分别在3.13~62.60μg/m L,1.995~39.900μg/m L范围内呈良好的线性关系;厚朴酚与和厚朴酚平均回收率分别为99.60%,98.54%。结论所建立的方法操作简便,专属性强,稳定、准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

山奈酚在大鼠肝亚细胞体系和培养的肝细胞中与葡糖醛酸和硫酸的结合物

作者用雄性Wistar大鼠肝亚细胞体系和培养的肝细胞,研究了山柰酚的体内代谢。山柰酚100/μmol/L 与大鼠肝微粒体共同培养60 min,另将50/μmol/L的山柰酚与大鼠培养的肝细胞共同培养60 min,处理后     

厚朴酚对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶的影响

目的：研究厚朴酚对花生四烯酸代谢酶活性的影响，以阐明其抗炎机理。方法：以大鼠胸腔白细胞为材料，分别用高效液相色谱法和放免方法测定白三烯B4(LTB4)、5-羟二十碳四烯酸(5—HETE)和6—酮前列腺素1α的生物合成。结果：在5．5～13.5μmol/L的浓度范围内，厚朴酚可剂量依赖性地抑制完整中性白细胞中LTB4的生物合成，在10～20μmol/L的浓度下可以抑制破碎细胞中5—脂氧合酶(5—LO)的酶活性。在浓度低于10μmol/L时，厚朴酚对破碎细胞中白三烯A4水解酶(LTA4-H)的活性没有明显的影响，但增加其浓度，则可以明显地抑制LTA4-H的活性。同时，厚朴酚在较高浓度下可以抑制破碎细胞中环乳化酶的活性。结论：厚朴酚可以抑制花生四烯酸的5—LO和环乳化酶代谢通路，这可能与其抗炎作用机理有关。     

HPLC法测定平胃泡腾片中厚朴酚及和厚朴酚含量

目的：建立用高效液相色谱法测定平胃泡腾片中厚朴酚、和厚朴酚含量的方法。方法：以依利特C18（4．6mm&#215;200mm,5μm）色谱柱分离厚朴酚、和厚朴酚,流动相为甲醇-乙腈-水（31．5：30．0：38．5）,检测波长为294nm。结果：厚朴酚在48．60-468．00μg／mL（r=0.9993）范围内呈良好的线性关系;和厚朴酚在10．12~100．20μg／mI（r=0.9994）范围内呈良好的线性关系。厚朴酚平均加样回收率为101．79％,RSD为1．59％,和厚朴酚平均加样回收率101．90％,RsD为1．78％。结论：方法简便易行,稳定性较好,可于平胃泡腾片中厚朴酚、和厚朴酚的含量测定。     

HPLC法测定抱龙丸中厚朴酚及和厚朴酚的含量

[目的]建立HPLC法测定抱龙丸中厚朴酚及和厚朴酚的含量的方法.[方法]采用Agilent C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(78:22);流速1.0ml/min;检测波长294nm.[结果]厚朴酚的线性范围为0.02-0.26μg,r=0.9999,平均回收率为100.46%,RSD=1.00%;和厚朴酚线性范围为0.012-0.156μg,r=1,平均回收率为100.76%,RSD=1.37%.[结论]该方法结果准确,重现性好,可作为抱龙丸质量控制的定量方法.     

和厚朴酚对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖以及黑色素合成的影响

目的探讨和厚朴酚对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖以及细胞内黑色素合成的影响。方法体外培养小鼠B16细胞,MTT法检测和厚朴酚对B16细胞增殖的影响;DAPI染色法观察和厚朴酚对B16细胞细胞形态的影响;NaOH裂解法检测和厚朴酚对黑色素含量的影响。结果和厚朴酚浓度为51、0、204、0、80μmol/L作用B16细胞,在不同的用药时间122、4和48 h,和厚朴酚对B16细胞增殖的IC50分别为23.41、3.1和11.4μmol/L;同时和厚朴酚作用B16细胞12 h后,经DAPI染色,B16细胞呈现典型的凋亡形态;另外采用204、0、80μmol/L的和厚朴酚分别作用B16细胞,B16细胞内黑色素合成量也呈现降低的趋势。结论和厚朴酚能有效地抑制B16细胞增殖,且其抑制作用具有时间和浓度依赖性;药物作用后的B16细胞呈现凋亡形态并出现凋亡小体;和厚朴酚对B16细胞内黑色素合成也呈现抑制作用但不明显。     

和厚朴酚抑制内毒素诱导的人肾小球系膜细胞炎症因子表达的研究

目的：观察和厚朴酚（HNK）对内毒素（LPS）诱导人肾小球系膜细胞（HRMCs）炎症反应的抑制作用及其分子机制研究。方法：以MTS法检测和厚朴酚（0～160μmol/L）对人肾小球系膜细胞的毒性作用,确定合适的药物实验浓度。将系膜细胞与LPS（1μg/ml）及不同浓度的和厚朴酚（0～20μmol/L）共同培养24h后收集培养上清液和细胞,并提取细胞蛋白。ELISA法检测各组培养上清液中IL-1β、TNF-α、IL-18及TGF-β1的表达水平,免疫印迹Western blot法检测细胞NF-κB p65,IKK-α/β及IKB-α磷酸化、非磷酸化蛋白表达水平,探讨和厚朴酚的抗炎作用机制。结果：20μmol/L及以下的和厚朴酚浓度对系膜细胞无明显毒性作用,但40μmol/L及以上的浓度明显降低系膜细胞的增殖活力。LPS刺激可显著诱导系膜细胞炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-18及TGF-β1的产生。和厚朴酚（0～20μmol/L）剂量依赖性地抑制LPS诱导的炎症因子的表达。免疫印迹结果显示,和厚朴酚可显著抑制LPS诱导的系膜细胞NF-κB p65,IKK-α/β及IKB-α等信号分子蛋白磷酸化水平。结论：和厚朴酚能有效抑制LPS诱导的人肾小球系膜细胞炎性细胞因子的表达,其机制部分通过抑制细胞NF-κB p65、IKK-α/β及IKB-α等信号分子的磷酸化水平。     

RP-HPLC法测定香砂养胃软胶囊厚朴酚与和厚朴酚含量

目的:为控制香砂养胃软胶囊质量建立香砂养胃软胶囊含量测定方法.方法:RP-HPLC法测定样品厚朴酚、和厚朴酚含量,用Spherigel ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离厚朴酚与和厚朴酚,流动相:为乙腈-48 ml/L冰醋酸溶液(55∶45),检测波长:294 nm.结果:厚朴酚在0.120～0.960 μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率99.00%,RSD=1.06%(n=5);和厚朴酚在0.028～0.224 μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率98.56%,RSD=1.55%(n=5).结论:方法专属、灵敏、重现性好,为该制剂的质量控制提供有效的方法.     

高效液相色谱法测定氯霉素醇溶液中氯霉素的含量

目的研究高效液相色谱法测定氯霉素醇溶液中氯霉素的含量。方法采用高效液相色谱法,以EclipseXDB—C18（4．6mm×250mm,5μm）为色谱柱;流动相为0．01mol／L庚烷磺酸钠缓冲液（取磷酸二氢钾6．8g．用0．01mol／L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000mL,再加三乙胺5mL,混匀,用0．01mol／L磷酸调节pH值至2．5）-甲醇（68：32）;流速1．0mL／min,检测波长277nm,进样量10μL。结果氯霉素在60—160μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=17．79C＋17．13,r=0．9995;平均回收率为100．24％,RSD=1．26％。结论本方法简便快速,定量准确,结果稳定、重现性好,可用于氯霉素醇溶液中氯霉素的含量测定。     

金黄散洗剂的制备及质量标准研究

目的：制备金黄散洗剂并建立金黄散洗剂的质量标准。方法将姜黄等中药超微粉碎后加混悬剂制备成金黄散洗剂;采用薄层色谱法（TLC）对处方中黄柏、甘草和白芷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定金黄散洗剂中姜黄素、大黄素和厚朴酚的含量。结果制备的金黄散洗剂微粒细腻均匀,沉降缓慢,稳定性好;在选定的薄层色谱条件下色谱斑点清楚,分离效果较好;姜黄素、大黄素和厚朴酚的质量浓度分别在17.98～179.82μg·ml^-1（r=0.9999）、11.40～114.00μg·ml^-1（r=0.9999）和7.08～70.80μg·ml^-1（r=0.9999）内,与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率依次为101.66%、102.27%和102.40%,RSD依次为0.61%、0.87%和0.60%。结论本洗剂制备工艺简便,所建立的质量标准简单、准确,能有效地控制该制剂质量。     

反相高效液相色谱法测定血浆中利福喷丁的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中利福喷丁的浓度。方法以Kromasil 1850mm×4．6mm,5μm）为分析柱,甲醇：0．02mol／L,KH2P02（磷酸调pH5．2,65：35v／v）为流动相,流速为1．0ml／min,检测波长为335nm,利福平为内标,测定血浆中利福喷丁的浓度。结果在0．316～20．2μg/ml浓度范围内,利福喷丁和内标峰的面积比值与浓度呈良好的线性关系（r=0．9991）。利福喷丁高、中、低3个浓度的平均回收率分别为：103．80％,98．53％,102．65％;日内、日间RSD均小于10％。结论该方法简便、快速准确、重现性好,可用于药代动力学以及生物等效性研究。     

HPLC法测定盐酸左旋多巴甲酯的含量研究

目的：建立高效液相色谱法测定盐酸左旋多巴甲酯含量的方法。方法：采用Agilent Eelipse XDB-C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱;流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾（20：80）（用磷酸调节pH=3.5）;流速：1.0ml/min;检测波长：280nm;柱温：20℃。结果：盐酸左旋多巴甲酯在25.65～256.50μg范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.9999）;平均回收率为98.39%,RSD=1.34%。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于盐酸左旋多巴甲酯的质量控制。     

丙泊酚对离体兔气管黏膜上皮纤毛运动的影响

目的观察不同浓度的丙泊酚对体外培养的兔气管黏膜上皮细胞纤毛运动的影响,探讨一氧化氮（NO）在丙泊酚影响纤毛运动中的作用。方法无菌条件下从健康新西兰兔获取离体气管标本,分离上皮组织培养7～8d后观察。以Hank平衡盐溶液（HBSS）将丙泊酚的终浓度分别稀释为1、10、20、50、100、200μg/ml。将组织块随机分为8组,前7组分别加入HBSS（P0）和上述6种浓度的丙泊酚（P1、P2、P3、P4、P5、P6）,第8组（P7）在加入0.1mmol/L的一氧化氮合酶（NOS）总抑制剂——L-NMMA后再以200μg/ml丙泊酚处理。在加药前（T0）,加药后1min（T1）、5min（T2）、10min（T3）、20min（T4）、30min（T5）,采用高速数码摄像系统采集纤毛摆动图像,通过IPLabV3.65软件分析,计算纤毛摆动频率（ciliarybeatfrequency,CBF）,分别进行组内和组间对比。结果①P0组、P1组和P2组的CBF值在各时点与各自的基础值比较均无明显变化;P1组和P2组的CBF值与P0组相应时间点相比无明显变化;②P3组CBF在T1时点比基础值和P0组T1时点值明显升高（P〈0.05）;在随后的各个观察时点与基础值及P0组相应时间点比较无明显变化;③P4、P5、P6组加药后各个观察时点的CBF均明显高于基础值和P0组各时点值（P〈0.05）;④P7组加药后各时点的CBF值与基础值相比均无明显变化。结论50μg/ml以上浓度的丙泊酚可促进纤毛摆动,50、100、200μg/ml浓度的丙泊酚可能通过促进NO合成和释放而加速离体纤毛运动。     

HPLC法测定脑力宝胶囊中维生素B1的含量

目的建立脑力宝胶囊中维生素B1的高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）测定法,并用于脑力宝胶囊的维生素B1的含量测定。方法用C18柱（4．6mm×150mm,5μm）为色谱柱,流动相为0．05mol／L。庚烷磺酸钠（冰醋酸调pH=3）-甲醇（50：50）,检测波长240nm。结果维生素B1进样量在0．416-2．08μg范围内呈良好线形关系,相关系数为0．9993,平均加样回收率为99．1％,RSD=2．9％（n=6）。结论该法操作简便,结果准确可靠,可用于脑力宝胶囊的质量控制。     

HPLC法测定复方四嗪利血平片中氢氯噻嗪的含量

目的：建立高效液相法测定复方四嗪利血平片中氢氯噻嗪含量的方法。方法：采用Diamonsil-C18（6．0mm×150mm,5μm）色谱柱;流动相：甲醇-水-磷酸盐缓冲液（30：66：4）（0．05mol／L磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH至3．0）;检测波长：272nm;流速：1．0ml／min。结果：氢氯噻嗪在0．0896-0．0896μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999）,平均回收率为98．92％,RSD=0．60％（n=6）。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于复方四嗪利血平片中氢氯噻嗪的质量控制。     

巨幼细胞贫血所致黄疸分析

目的分析巨幼细胞贫血（MA）患者的血清胆红素浓度改变。方法选择47例经骨髓象检查确诊的初诊MA患者,另选取41例无贫血健康人员作为对照组。结果MA组、对照组直接胆红素（DBil）均数分别为（9．07±4．43）μmol／L及（3．614±1．29）μmol／L,P〈0．0001;两组间接胆红素（IBil）中位数分别为18．950μmol／L、7．340μmol／L,P=0．0000。MA患者中,37例（78．72％）总胆红素（TBil）〉17．μmol／L,13例（27．66％）TBil〉34．2μmol／L,30例（63．83％）DBil〉6．8μmoL／L,最大值为19．42μmoL／L,36例（76．60％）IBil〉14．0μmol／L,最大值为98．07μmol／L。37例伴黄疸MA患者中,4例（10．81％）DBiL／TBil〈0．20,33例（89．19％）DBil／TBil为0．20～0．50。结论MA患者中,近3／4者TBil升高,近3／10呈显性黄疸,近9／10者MA黄疸类似肝细胞性黄疸,需与肝病相鉴别。     

精神分裂症患者血清同型半胱氨酸水平及临床意义

目的探讨精神分裂症患者血清同型半胱氨酸（Hcy）水平及临床意义。方法选择2013年8月1～31日北京市昌平区中西医结合医院（以下简称＂我院＂）精神分院收治的符合国际疾病分类（ICD）精神分裂症诊断标准的患者803例作为观察组,另选择我院同期健康体检者289名作为对照组。两组采用循环酶法进行血清Hcy浓度测定,并进行统计学分析。结果观察组803例精神分裂症患者血清Hcy水平高于正常范围的有570例,高同型半胱氨酸血症的发生率为70.98%;对照组289名体检人群中血清Hcy水平高于正常范围的有107例,高同型半胱氨酸血症的发生率为37.02%;观察组高同型半胱氨酸血症发生率高于对照组（χ^2=22.836,P〈0.01）;观察组患者血清Hcy水平为（21.69±11.33）μmol/L,对照组血清Hcy水平为（16.84±11.14）μmol/L,两组比较差异有统计学意义（t=10.362,P〈0.01）。观察组男、女患者血清Hcy水平分别为（24.71±11.64）、（18.30±9.10）μmol/L,均明显高于对照组[（17.45±10.93）、（14.90±9.92）μmol/L],差异均有统计学意义（t=12.036、5.284,均P〈0.01）。结论精神分裂症患者中存在有明显的Hcy代谢异常,但Hcy代谢失衡与精神分裂症关系的生物学机制需要进一步研究。     

2 型 糖尿病患者血清高敏 C 反 应蛋白 、胱抑素 C 及 同型半胱氨酸的表达及其临床意义

目的 探讨2型糖尿病患者血清高敏C反应蛋白、胱抑素C及同型半胱氨酸的表达及其临床意义。方法 2011年3月～2013年12月收入北京京煤集团总医院的120例2型糖尿病患者（糖尿病组）按是否合并糖尿病肾病分为单纯糖尿病组（56例）和糖尿病肾病组（64例）。选择同期110例健康体检者作为对照组。对研究对象行血清高敏C反应蛋白、胱抑素C及同型半胱氨酸的检测．并进行统计学分析。结果 糖尿病组血清高敏C反应蛋白、胱抑素C、同型半胱氨酸及血肌酐浓度分别为（3．56±1．45）mg／L、（1．05±0．23）mg／L、（17．79±2．35）μmol／L、（88．19±10．06）μmol／L,对照组分别为（1．06±0．28）mg／L、（0．76±0．36）mg／L、（8．89±2．35）μmol／L、（66．88±15．34）μmol／L,两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。单纯糖尿病组患者血清高敏C反应蛋白、胱抑素C、同型半胱氨酸及血肌酐浓度分别为（2．50±1．64）mg／L、（0．85±0．23）mg／L、（15．70±4．05）μmol／L、（65．19±10．06）μmol／L,糖尿病肾病组分别为（7．35±4．34）mg／L、（2．49±0．36）mg／L、（20．20±8．05）μmol／L、（150．30±30．23）μmol／L,两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。糖尿病患者血浆同型半胱氨酸与血肌酐、高敏C反应蛋白、胱抑素C均呈正相关（r=0．605、0．840、0．601,P〈0．05）;高敏C反应蛋白与血肌酐、胱抑素C呈正相关（r=0．521、0．672,P〈0．05）;血肌酐与胱抑素C呈正相关（r=0．593,P〈0．05）。结论 2型糖尿病患者血清高敏C反应蛋白、血清胱抑素C及血浆同型半胱氨酸能反映糖尿病患者早期的肾损害,为临床判定糖尿病肾病比较敏感的指标,可为临床对糖尿病肾病的早期诊断提供帮助。