SD大鼠与C57小鼠5/6肾切除慢性肾功能衰竭模型的比较

目的 比较SD大鼠、C57小鼠建立5/6肾切除(5/6 nephrectomy, 5/6NX)慢性肾功能衰竭动物模型的异同, 选择合适的实验动物以供慢性肾功能衰竭的防治研究。方法 将60只SD大鼠和60只C57小鼠分别随机、平均分成5/6肾切除组和假手术组, 分别于术后4周、8周、12周三个时间点处死各组老鼠, 收集血清和肾组织供肾功能、α-SMA检测分析。结果 大、小鼠模型组成活率不存在差异(P>0.05), 大鼠5/6NX组血清肌酐及尿素氮值于8~12周出现稳定状态, 异于小鼠5/6NX组。结论 C57小鼠5/6肾切除慢性肾衰模型建立成功。5/6NX大、小鼠组均于术后出现进行性肾功能减退的表现, 然其疾病进程不尽相同, 临床应根据监测周期长短选择合适的实验动物以准确地反应疾病状态。     

尿毒净液治疗慢性肾功能衰竭药理作用的分子机制

目的：探讨尿毒净液对大鼠慢性肾功能不全模型的药理药效。方法：切除大鼠5/6肾脏构建大鼠慢性肾功能不全模型。将实验分为4组,每组10只大鼠。 A组,假手术组。 B组,空白对照组。 C组,尿毒净液组。 D组,洛丁新组。观察5周后大鼠同型半胱氨酸、Scr、Bun、HGB、钾、钙、磷、钠、氯等肾脏生化代谢指标变化,采用分子生物学方法检测相关基因DNA甲基化水平、mRNA转录水平,并进行病理切片观察肾脏组织变化。结果：与假手术组相比,慢性肾功能不全大鼠模型造模成功, Scr、Bun较假手术组明显升高,HGB明显下降（ P＜0．05）。5周治疗后,C组大鼠Scr水平较B、D组大鼠明显降低（ P＜0．05）,C、D组大鼠Bun水平较B组大鼠明显降低（ P＜0．05）,C、D组大鼠HGB水平较B组大鼠明显升高（ P＜0．05）,C组大鼠氯、钙、磷紊乱水平较B、D组改善显著。尿毒净液可以有效降低慢性肾功能衰竭血清中同型半胱氨酸浓度,恢复慢性肾功能衰竭大鼠DNA甲基化水平,有效降低肾小球硬化的主要介质TGF-β1的mRNA转录水平表达。 HE染色见A组大鼠肾小球、肾小管、肾间质为正常形态,B组肾小球出现局灶性肾小球纤维化、肾小球广泛萎缩或代偿性肥大改变。 C、D两组均局灶性肾小管萎缩、扩张、蛋白管型,多灶性肾小球萎缩、代偿性肥大,肾间质增生。结论：尿毒净液与洛丁新作用相仿,可改善慢性肾功能衰竭大鼠肾功能。     

大鼠慢性肾功能不全模型两种制作方式的比较

目的 比较大鼠肾大部切除与肾结扎两种方法制备的5/6肾切除慢性肾功能不全模型的异同.方法 雄性SD大鼠随机分为三组.A组行左肾2/3切除加右肾切除,B组行结扎左肾动脉2/3分支加右肾切除,C组为假手术组.分别于第二次手术后5周、9周及13周测血压,处死大鼠,留取24 h尿及肾组织.检测尿蛋白,肾组织切片染色.用半定量法评价肾小球硬化指数.结果 第5周时,B组大鼠的收缩压显著升高,而A组与C组相比无显著差异,第9周和13周A组和B组与C组大鼠相比,收缩压均显著升高.肾部分切除术后,尿蛋白随时间进行性增加.B组与A组相比,尿蛋白增加更为显著.A组和B组在各观察点均有不同程度肾小球硬化,B组较A组肾小球硬化程度重.结论 肾大部切除和肾结扎两种方法制备的大鼠5/6肾切除模型表现有所不同.     

羟苯磺酸钙治疗慢性肾功能衰竭的临床观察与实验研究

目的观察羟苯磺酸钙对慢性肾功能衰竭（肾衰）的治疗作用，探讨该药对肾脏的保护机制，从而初步评价其治疗慢性肾衰的应用价值。方法 临床观察部分：选取131例慢性肾衰患者，分为两组：①治疗组73例，在常规综合治疗的基础上加用羟苯磺酸钙胶囊0．5g．3次／d；②对照组58例，采用常规综合治疗，观察8周内两组患者肾功能的变化。动物实验部分：建立5／6肾切除大鼠慢性肾衰模型，设立假手术组、5／6肾切除组以及羟苯磺酸钙组，治疗12周后观察大鼠肾功能以及残肾组织病理改变。结果临床观察部分：治疗2周后，患者血肌酐（Scr）即明显降低，内生肌酐清除率（Ccr）上升，并维持至第8周；血尿酸（UA）治疗后明显降低。动物实验部分：12周后，与5／6肾切除组比较．羟苯磺酸钙组大鼠肾功能改善，残肾组织病理改变明显减轻。结论羟苯磺酸钙能够抑制肾脏纤维化的进展，改善肾脏功能，任慢性肾功能衰竭的治疗方面具有一定的应用价值。     

排毒双调综合疗法抗大鼠慢性肾功能衰竭肾纤维化的实验研究

目的：观察排毒双调综合疗法对大鼠慢性肾功能衰竭肾纤维化的疗效及其与单一疗法的比较，并探讨其作用机理。方法：采用大鼠5／6肾切除动物模型，通过检测实验大鼠观察排毒双调综合疗法对实验性慢性肾功能衰竭大鼠的治疗作用。结果：与单一疗法比较，排毒双调综合疗法能明显改善实验大鼠的体质状况，阻抑实验大鼠体重的减轻，降低血清BUN、SCR的含量，抑制TGF－β在肾组织的表达，减轻慢性肾功能衰竭肾纤维化的程度。结论：排毒双调综合疗法对慢性肾功能衰竭肾纤维化有减轻、缓解作用，较单一疗法效果为佳；其作用机制与抑制TGF－β在肾组织的过度表达有关。     

丹参对5/6肾切除大鼠肾组织转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨中药丹参对慢性肾功能不全大鼠肾脏TGF-β1表达的影响.方法 以大鼠5/6肾切除作为慢性肾功能不全动物模型,术后一周随机分为未治疗组、丹参组、苯那普利组及假手术组.于手术后第12周处死大鼠,留取肾组织.用免疫组化法观察转化生长因子β1(TGF-β1)在肾组织的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织TGF-β1 mRNA相对含量.结果 5/6肾切除大鼠于肾小管及肾小球均见TGF-β1染色阳性,与未治疗组相比,丹参组和苯那普利组大鼠染色较轻,半定量积分低,有显著性差异.RT-PCR结果显示5/6肾切除大鼠TGF-β1 mRNA水平显著高于假手术组,丹参组和苯那普利组TGF-β1 mRNA水平较未治疗组降低.结论 丹参抑制慢性肾功能不全大鼠TGF-β1的上调.     

NSF干预5／6肾切除大鼠模型肾纤维化的实验研究

目的：研究NSF对5／6肾切除大鼠模型肾纤维化干预作用及机制。方法：取SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、NSF组,通过对大鼠实施5／6肾切除手术建立大鼠慢性肾功衰模型;治疗组自二次术后第31d起给药,连续30d。检测大鼠血清生化指标Urea、Crea,残余肾组织病理情况及纤维化相关指标：残余肾组织中纤维连结蛋白（FN）、转化生长因子Bl（TGF-β）,血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）的变化。结果：NSF组与模型组比较：Urea、Crea明显降低（P〈0．05）,肾脏病理改变较轻,肾组织FN和TGF-β的表达明显降低（P〈0．05）,血清TNF-α表达也明显降低（P〈0．05）。结论：NSF可能通过下调TNF-α的表达,降低肾脏中纤维化调节因子TGF-β含量,从而抑制FN增生,控制或延缓肾纤维化进展,发挥对慢性肾功能衰竭的治疗作用。     

骨髓间充质干细胞对5/6肾切除大鼠肾损伤的保护作用

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对5/6肾切除大鼠肾损伤的保护作用,初步探讨其延缓慢性肾衰竭(CRF)进展的可能作用机制。方法将雄性SD大鼠BMSCs用Hoechst33342标记后注入受体雄性SD大鼠体内。40只受体雄性SD大鼠随机分为四组(每组n=10):假手术组、模型组(5/6肾切除+培养液注射)、贝那普利组(5/6肾切除+贝那普利灌胃)、干细胞组(5/6肾切除+BMSCs移植)。造模后第60天观察肾功能改变;应用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)浓度,采用免疫组化法检测肾组织VEGF的表达,并观察Hoechst33342标记的BMSCs在受体大鼠肾脏的分布情况。结果 5/6肾切除后60 d可见标记的BMSCs定位于肾组织中。贝那普利组和干细胞组肾功能明显好于模型组(P<0.05);干细胞组血清和肾组织中VEGF表达均高于模型组(P<0.05)。结论 BMSCs可向损伤的肾脏迁移,促进机体分泌VEGF,增加VEGF蛋白在肾脏表达,从而改善肾功能。     

六味地黄丸对大鼠5/6肾切除肾功能的影响

目的探讨六味地黄丸对大鼠5/6肾切除肾功能的作用。方法采用大鼠5/6肾切除模型及细胞立体形态学技术,观察大鼠残肾肾功能的动态变化及其可能的作用机制。结果六味地黄丸具有降低5/6肾切除大鼠BUN、肌酐水平及提高肾小球滤过率(GFR)的作用,与模型组相比差异具有显著性意义(P<0.05);形态学研究显示,造模8周时六味组残肾肾小球的体积较大,肾间质纤维化程度较模型组轻;细胞形态学研究显示,六味组肾小球的面数密度NA参数小于模型组,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论六味地黄丸具有改善5/6肾切除大鼠残肾肾功能的作用,其改善残肾肾功能的作用与六味地黄丸提高肾小球的体积密切相关。     

骨髓间质干细胞体外增殖及诱导分化成肌样细胞实验研究

目的比较SD大鼠、Wistar大鼠和C57BL/6J小鼠骨髓间质干细胞在体外的增殖及在体外将骨髓间质干细胞诱导分化成肌样细胞的情况。方法体外分离成年SD大鼠、Wistar大鼠和C57BL/6J小鼠的骨髓干细胞,培养增殖,用5-氮杂胞苷诱导分化,使其向肌细胞定向分化。结果SD大鼠和Wistar大鼠的原代骨髓间质干细胞约10 d可达90%以上融合,平均3 d左右传代,C57BL/6J小鼠的骨髓间质干细胞在1周内可迅速增殖,1周后基本处于停滞状态,且细胞集落很少,难传代。SD大鼠的骨髓间质干细胞在含5-氮杂胞苷、两性霉素B和5%马血清的分化培养基作用下,可以分化为肌肉特异性抗原desmin和-αsarcomeric actin染色阳性反应的肌样细胞。结论不同种系的骨髓干细胞在体外用相同的培养基培养,可以具有截然不同的增殖能力;5-氮杂胞苷可以促使骨髓干细胞定向分化为肌样细胞。