Caco-2细胞单层研究淫羊藿黄酮类成分的吸收转运

目的 研究淫羊藿黄酮类成分在Caco-2细胞模型中的吸收转运。方法 采用超高压液相法测定药物浓度,计算表观渗透系数(Papp),研究淫羊藿黄酮5个主要成分淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ在Caco-2细胞模型中的双向转运。结果 淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的吸收渗透系数(P _AB)较小,分别为5.91×10^-7、3.22×10^-7、2.76×10^-7、4.23×10^-7 cm/s,宝藿苷Ⅰ相对较大,为1.46×10^-6 cm/s;5个化合物的分泌渗透系数(P _AB)都比其相应的吸收渗透系数要大,其中宝藿苷Ⅰ的分泌渗透系数是其吸收渗透系数的9.8倍。结论 淫羊藿黄酮类成分的肠道吸收较差,可能存在肠道转运蛋白的外排机制,其中三糖苷(朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C)的吸收要小于二糖苷(淫羊藿苷),二糖苷的吸收要小于单糖苷(宝藿苷Ⅰ)。     

HPLC法制备巫山淫羊藿中的淫羊藿属苷A和朝藿定C对照品

目的 研究制备型高效液相分离纯化巫山淫羊藿中淫羊藿属苷A和朝藿定C的条件。方法 巫山淫羊藿粗提物经大孔吸附树脂和硅胶柱色谱得朝藿定C与淫羊藿属苷A的混合物,进行HPLC制备色谱分离,以乙腈-水（24∶76）为流动相,收集相应流分浓缩至干,甲醇溶解,滤过,滤液蒸干即得。结果 该法所得产品极易结晶,用面积归一化法定量,质量分数大于98.0%,经紫外、红外、核磁共振确定结构,与文献数据基本一致。结论 本法简便快捷,可获得高纯度的淫羊藿属苷A和朝藿定C,解决在常规柱色谱法制备朝藿定C对照品中存在的不易结晶和纯度不够的问题,产品可用作分析用对照品。     

淫羊藿药材的UPLC指纹图谱研究

[目的]建立淫羊藿药材超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱分析方法。[方法]采用Agilent 1290超高效液相色谱仪,以CORTECS^® C₁₈（2.1 mm×100 mm,1.6 μm）色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,进样量为1 μL,检测波长为270 nm。[结果]12个不同批次淫羊藿药材有21个共有峰,其中有6个已知峰,分别为木兰花碱、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷I,不同批次的样品与标准指纹图谱相似度均在0.911以上。[结论]本实验建立的UPLC指纹图谱分析方法稳定、精密度高,可应用于淫羊藿药材的质量控制和评价。     

基于淫羊藿苷测定及HPLC指纹图谱分析的淫羊藿药材质量差异评价

目的 建立客观评价淫羊藿药材质量差异的方法。方法 采用高效液相色谱法,Kromasil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(23∶77),体积流量1 mL/min,检测波长270 nm,进样量10 μL,建立不同产地、不同品种淫羊藿药材不同生长部位(茎与叶)的HPLC指纹图谱,并测定其不同生长部位中淫羊藿苷的量。结果 淫羊藿药材不同生长部位(茎与叶)的HPLC指纹图谱和淫羊藿苷的量存在差异,从其叶和茎的特征指纹图谱中分别提取出19和10个共有峰,且叶中淫羊藿苷的量是茎中的4～8倍;叶与叶、茎与茎之间的化学特征存在差异,叶与茎化学特征差异最显著。结论 建立的淫羊藿苷测定方法和指纹图谱的精密度、稳定性、重现性好,可表征淫羊藿药材质量的差异性,为淫羊藿药材的质量研究和建立淫羊藿药材的商品规格提供参考依据。     

不同品种、产地淫羊藿多糖的含量测定

[目的]测定不同品种不同产地淫羊藿多糖的含量。[方法]采用苯酚-硫酸法。[结果]不同品种淫羊藿多糖含量结果相差较大,其中朝鲜淫羊藿含多糖量稍高。[结论]淫羊藿不同品种产地多糖的含量相差不大。     

淫羊藿茎叶中5种黄酮类成分分析及质量评价

目的 测定不同品种和产地淫羊藿茎叶中朝藿定A、B、C、宝藿苷I、淫羊藿苷5个黄酮类成分的量,分析结果差异,并依照《中国药典》2010年版进行质量评价。方法 建立HPLC方法,色谱条件为Hedera^TM ODS-2 C₁₈柱（300 mm×4.6 mm,5 μm）,乙腈（A）-水（B）梯度洗脱,0～8 min,17% A;8～32 min,27% A;60～70 min,85% A;70～80 min,90% A。检测波长270 nm。结果 5种黄酮类化合物在48.0～2 197.5 μg线性关系良好,r值均大于0.999 0（n＝8）;平均回收率为97.8%～100.35%,RSD为1.37%～2.48%（n＝6）。27批淫羊藿叶中有20批淫羊藿苷的量低于《中国药典》规定,16批淫羊藿茎中只有4批检出淫羊藿苷。结论 淫羊藿中各黄酮量随品种、部位和产地不同而不同,药用部位叶中的量是茎的10倍至数10倍,品种差异是各黄酮量变化的主要因素。     

淫羊藿属9种淫羊藿叶中朝藿定C和淫羊藿苷量的考察

淫羊藿属Epimedium L．药用植物，在我国有29种，产于川陕者14种，具有多方面的药理活性。《中国药典》作为淫羊藿药材的有5种，分别为淫羊藿、朝鲜淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿，笔者在进行淫羊藿成分系统分离研究的基础上，对采集的川陕豫产9种习惯人药的淫羊藿品种，将其叶中的主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的量进行了考察，结果表明大部分品种朝藿定C量大于淫羊藿苷。     

淫羊藿苷和淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响

目的 研究淫羊藿苷及淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探讨雌激素受体（ER）与其作用机制的关系。方法 用不同浓度的淫羊藿苷和淫羊藿素处理雌激素受体呈阳性的乳腺癌T47D细胞系后,MTT法检测T47D细胞增殖,流式细胞术检测T47D细胞周期的变化,Western blotting法检测T47D细胞ERα和ERβ蛋白表达。结果 淫羊藿苷和淫羊藿素浓度为1×10^?9～1×10^?6 mol/L,能显著促进T47D细胞增殖,且该作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780（1×10^?6 mol/L）所拮抗。与对照组相比,淫羊藿苷和淫羊藿素1×10^?7 mol/L使S期T47D细胞比例明显增加,增殖指数显著升高,但该作用可被ICI 182.780抑制。淫羊藿苷和淫羊藿素1×10^?7 mol/L还可显著增加ERα、ERβ蛋白表达（P＜0.01）。结论 淫羊藿苷和淫羊藿素均可显著促进T47D细胞增殖,该作用可能是通过上调胞内ERα、ERβ蛋白表达介导的。     

灵芝-淫羊藿菌质总多糖量动态变化的初步研究

目的 探讨灵芝-淫羊藿菌质发酵的工艺及总多糖的动态变化。方法 选取4个灵芝菌株,以淫羊藿为培养基质进行固体发酵,并利用苯酚-硫酸法测定灵芝-淫羊藿菌质的总多糖量。结果 灵芝-淫羊藿菌质总多糖量明显高于对照培养的灵芝多糖量（P＜0.05）;对灵芝和淫羊藿发酵组合的多糖量进行动态变化研究,发现灵芝菌种A-淫羊藿菌质的发酵终点确定为21 d,灵芝菌种B、C和D的发酵终点确定为28 d。结论 与对照培养灵芝及未发酵的淫羊藿相比,灵芝对淫羊藿发酵可提高总多糖量3～13倍,效果良好。     

HPLC同时测定仙灵骨葆胶囊中朝藿定C、淫羊藿苷、补骨脂素和异补骨脂素

目的 建立HPLC同时测定仙灵骨葆胶囊中朝藿定C、淫羊藿苷、补骨脂素和异补骨脂素的方法。方法 RP-HPLC法测定,色谱柱为Spherisorb C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,乙腈-水梯度洗脱,体积流量1 mL/min,检测波长250 nm,柱温25 ℃。结果 朝藿定C在0.505～5.050 μg（r＝0.999 99）,淫羊藿苷在0.245～2.450 μg（r＝0.999 99）,补骨脂素在50.05～500.50 ng（r＝0.999 99）,异补骨脂素在0.047～0.470 μg（r＝0.999 99）与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.7%、98.2%、98.4%、98.0%,RSD分别为1.6%、2.0%、1.7%、2.5%。结论 本方法分析时间短且重现性和稳定性较好,可作为仙灵骨葆胶囊的质量控制方法。     

制川乌白芍合煎微波提取工艺研究

目的 优选微波法提取制川乌配伍白芍中有效成分乌头总生物碱和芍药苷的工艺条件。方法 采用单因素结合正交设计法,优选出65%乙醇为提取溶媒,进一步考察了微波功率、微波辐射时间、乙醇体积分数及料液比4个因素,用紫外可见分光光度法测定乌头总生物碱,采用HPLC法测定芍药苷,并以其量及浸膏得率作为评价指标。结果 以65%乙醇为提取溶媒,在微波功率800 W,微波辐射时间为0.5 h,固液比为1∶10时乌头总生物碱和芍药苷的提取量最高且浸膏得率最低。结论 微波提取时间短,有效成分提取率高,此方法是一种有发展潜力的工艺。     

微肥配比对附子生长的影响

目的 研究微肥配比对附子生长及产量的影响。方法 以毛茛科植物乌头为试验材料,采用均匀设计,研究不同的锌、硼、铁、锰配比下附子的生长及产量状况。结果 锌、硼、铁、锰配比为4∶1∶1∶2是促进附子生长和提高附子产量的最佳配比。该配比条件下,附子的株高和叶干质量较对照有所降低,茎粗、须根数、须根长、子根体积及茎、须根、母根干质量均比对照有所增加,且显著或极显著高于其他肥料配比,其中须根和母根干质量较对照处理分别增加了24.5%和25.9%。相关性分析表明,株高与附子单株产量呈显著负相关,而须根、母根干质量与单株产量呈显著正相关。结论 从促进营养器官生长而提高附子产量的角度来说,锌、硼、铁、锰（4∶1∶1∶2）为最佳配比。     

pH区带逆流色谱法分离制备荷叶中生物碱

目的 建立对荷叶生物碱进行分离的pH区带逆流色谱方法。方法 溶剂系统为叔丁基甲醚-甲醇-水（4∶1∶5）,上相添加三乙胺（10 mmol/L）作为固定相,下相添加盐酸（5 mmol/L）为流动相进行洗脱,在主机转速800 r/min、体积流量1.5 mL/min、检测波长254 nm条件下进行分离制备。结果 从2.18 g荷叶提取物中一次分离得到N-去甲荷叶碱110 mg、O-去甲荷叶碱420 mg、荷叶碱310 mg和莲碱190 mg 4种生物碱,质量分数均大于98%;各化合物通过HPLC、MS和¹H-NMR进行了化学结构鉴定。结论 pH区带逆流色谱法是一种快速高效的分离纯化荷叶生物碱的方法。     

荷叶中荷叶碱的浸提动力学模型研究

[目的]考察温度、溶剂量、溶剂种类对荷叶碱浸提动力学过程。[方法]基于Fick第一定律建立浸提动力学模型将不同提取条件对荷叶碱浸提动力学的影响进行拟合与预测。[结果]温度升高,浸提速率及浸提量增大,且随温度升高,其对浸提量影响减小。提取体积增大,荷叶碱平衡提取量增大,但浸提达到平衡的时间延长。不同溶剂提取过程中,存在浓度交叉,试验范围内以70%乙醇提取率最高。不同溶剂下荷叶中荷叶碱浸提动力学符合一级一项浸提动力学模型。[结论]采用数字模型定量描述浸提过程功能成分质量浓度随时间变化的规律,其对于揭示不同因素对浸提动力学效果的影响及优化浸提工艺等具有重要指导意义。     

Optimization of Microwave-assisted Extraction of Polyphenols from Enteromorpha prolifra by Orthogonal Test

Objective To optimize microwave-assisted extraction of polyphenols from Enteromorpha prolifra. Methods Based on single-factor tests, an efficient microwave-assisted extraction (MAE) technique was developed to extract bioactive polyphenols from E. prolifra through orthogonal (L16(4)5) test. Results The highest yield (0.923 ± 0.013) mg/g was obtained when microwave power, solvent to raw material ratio, irradiation time, ethanol concentration, and extraction cycles were 500 W, 25 mL/g, 25 min, 40%, and 3, respectively, which was higher than that of Soxhlet extraction with methanol for 6 h, ultrasound-assisted extraction with 40% ethanol for 1 h twice and heat reflux extraction with 40% ethanol for 2 h twice. Conclusion This finding indicates that MAE is a superior technique for the extraction of polyphenols due to less impurity, higher time efficiency and yield.     

绿茶末中茶多酚的微波辅助提取

目的：研究在微波辐射下提取茶多酚的最佳工艺。方法：采用正交试验法对微波功率、微波辐射时间、乙醇体积分数、料液比等影响因素进行了研究。结果：绿茶末的微波辅助提取茶多酚的最佳工艺：微波功率为中高火，微波辐射时间为3min，乙醇体积分数为70％，料液比为1：15，茶多酚的收率为14．6％。结论：该提取工艺可有效提取绿茶末中的茶多酚。     

乌药总生物碱提取工艺的优选及镇痛作用的研究

目的 优选乌药总生物碱（TALR）的提取工艺并研究其镇痛作用。方法 采取乙醇回流法提取,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数影响,进行L₉(3⁴) 正交试验设计,以乌药总生物碱的紫外吸收峰最大吸光度A值为指标进行优选。镇痛实验取最佳提取方法所得TALR的不同浓度水溶液ig给予小鼠后,采用醋酸小鼠扭体法研究TALR的镇痛作用。结果 优选工艺为：加入14倍量95%乙醇提取1 h,酸溶碱沉得TALR,因其A值远高于其他工艺,故判断此法所得TALR质量分数相对最高。药理实验表明TALR可显著减少小鼠扭体次数。结论 优选工艺简单可行,质量分数较高;TALR具有较强的镇痛作用。     

探头式超声提取三七有效成分的工艺研究

目的采用单频探头式超声（25kHz）技术对三七有效成分进行提取。方法选择乙醇体积分数、物料粒径、提取固液比、提取温度、提取时间5个因素进行正交实验。结果影响三七药材中人参皂苷Rg1的提取率的因素依次为：乙醇体积分数〉物料粒径〉固液比〉提取时间〉提取温度,优化工艺参数为：乙醇体积分数95％,物料粒径80～100目,固液比1：15,提取时间40min,提取温度40℃。在此条件下,人参皂苷Rg1的提取率是69．38％。结论本研究将为三七工业化生产工艺参数的选择提供实验依据。     

不同醋制工艺对三棱有效成分群溶出的影响

目的 研究不同醋制工艺对三棱中的总黄酮、总生物碱、有效Al³⁺ 3类药效物质基础提取率及提取比率的影响。方法 采用L₉(3⁴) 正交试验设计,从醋酸质量浓度、醋制比例、醋浸时间、炒制温度4个因素方面,比较不同醋制工艺条件下,醋三棱的80%甲醇浸膏提取率,总黄酮、总生物碱、有效Al³⁺ 提取率与提取比率的差异。结果 与三棱生药相比,使用少量乙酸的醋制工艺提高了醋三棱80%甲醇浸膏提取率,醋炒可以有效提高醋三棱的总黄酮、总生物碱与有效Al³⁺ 的提取率与提取比率,总黄酮的提取率与提取比率受炒制温度影响显著,而总生物碱的提取率与提取比率则受醋酸质量浓度的影响显著。含大量乙酸的醋制工艺可明显降低醋三棱80%甲醇浸膏提取率,但可提高80%甲醇浸膏中总生物碱与有效Al³⁺ 的提取比率。结论 醋制工艺对醋三棱中不同药效物质群的提取率与提取比率有显著影响,将三棱应用于不同适应症时,适宜对症适当改变醋制工艺。     

不同施肥处理对宽叶羌活产量及品质的影响

目的 探讨施肥对宽叶羌活产量及品质的影响,为优质高产栽培提供理论依据。方法 通过N和P的不同配方施肥进行大田试验,根据《中国药典》中的测定方法,对宽叶羌活产量、浸出物的量和挥发油的量进行测定。结果 不同的施肥配方对宽叶羌活产量、浸出物的量和挥发油的量都有很大影响,其中处理N₂P₂最高,较对照(CK)分别增加了43.33%、17.95%、43.48%。施肥量的不同对单株也有一定的影响,在根质量和根粗方面,也均以处理N₂P₂较好,各处理与对照之间在根粗方面均达到了显著性差异。结论 氮肥和磷肥的施用量及配比对宽叶羌活产量及品质有较大的影响,但是不合适的施肥会降低其的产量和品质。