亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与强直性脊柱炎基因组DNA甲基化水平的相关性

目的 探讨我国湖南地区汉族人群亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与强直性脊柱炎(AS)基因组DNA甲基化水平的相关性。 方法 收集来自湖南地区200例人类白细胞抗原-B₂₇(+)AS患者(AS组)以及120名健康人(正常对照组)的外周血,其中200例AS患者的诊断符合美国1984年纽约标准。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术检测MTHFR基因C677T位点多态性,胞嘧啶延伸法检测DNA甲基化水平,ELISA检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度,特异免疫测定法检测红细胞叶酸浓度。 结果 AS组患者MTHFR基因位点C677TT基因型的比例明显高于正常对照组(17.0%比5.0%;χ²=9.874, P=0.002)。AS组的血浆Hcy浓度为(18.71±2.42)μmol/L,明显高于正常对照组的(10.97±2.93)μmol/L(t=24.402, P<0.001);其中,MTHFR基因位点C677CC和C677CT基因型组的血浆Hcy浓度分别为(18.31±1.94)(q=12.088, P=0.01)和(17.80±2.18)μmol/L(q=6.496, P=0.01),均明显低于C677TT基因型组的(21.70±1.80)μmol/L。AS组C677TT基因型基因组DNA甲基化水平明显低于正常对照组(t=5.655, P<0.001)和AS组的C677CC(t=11.514, P<0.001)及C677CT基因型(t=10.287, P<0.001)。结论 在湖南地区汉族人群中,MTHFR基因C677T位点的多态性与AS发病相关。MTHFR基因677位点T/T突变是AS组高Hcy血症的重要影响因素。MTHFR基因677位点T/T突变与AS基因组DNA低甲基化相关,DNA的低甲基化可能是AS发病的机制之一。     

硫化氢及一氧化氮气体信号分子在冠心病发病中的作用及其与冠脉病变类型的关系

目的研究硫化氢(H2S)及一氧化氮(NO)气体信号分子在冠心病患者中的变化及其与冠脉病变类型的关系,探讨其在冠心病发病中的病理生理意义。方法冠心病组40例,造影正常对照组17例,冠心病患者根据临床表现和辅助检查,分为稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组、急性心肌梗死组;根据冠脉造影结果,再分为单支病变组、双支病变组、三支病变组。采用硫敏感法测定所有研究对象血浆H2S含量,并用Greiss法测定血浆NO含量,分析不同亚型冠心病患者和对照者血浆H2S、NO含量的差异及H2S、NO与不同冠脉病变类型的关系。结果冠心病患者血浆H2S、NO含量为(26.10±14.27)、(44.25±9.71)μmol/L,远低于冠脉造影正常对照组的(51.74±11.94)、(53.94±4.36)μmol/L,两组比较差异均有统计学意义(P<0.01);在冠心病各常见亚型中,不稳定性心绞痛患者和急性心肌梗死患者血浆H2S含量分别为(23.60±14.41)μmol/L、(19.98±7.52)μmol/L,明显低于稳定性心绞痛患者的(38.41±14.53)μmol/L;急性心肌梗死患者血浆NO含量为(39.71±6.03)μmol/L,明显低于稳定性心绞痛患者的(44.25±9.71)μmol/L(P<0.05)。冠脉双支和多支病变组血浆H2S含量分别为(16.91±7.98)、(18.39±7.78)μmol/L,差异无统计学意义(P>0.05),但均明显低于单支病变组的(33.04±15.01)μmol/L(P<0.05);不同支数病变冠心病患者血浆NO含量差异无统计学意义(P>0.05)。冠脉血管有闭塞组其血浆H2S、NO含量明显低于单纯狭窄组(P<0.05)。结论 H2S与NO的代谢异常可能参与了冠心病的发病过程,其中血浆H2S含量的高低与冠脉病变类型相关。     

慢性阻塞性肺疾病和支气管哮喘患者血浆及痰液P物质的测定

目的 检测在慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支气管哮喘患者血浆和痰液中P物质(SP)的含量及探讨其作用。方法 收集了26例COPD、20例哮喘和12例健康者的血浆及诱导痰标本,采用放射免疫分析法检测SP的浓度。结果 COPD组血浆及痰液SP浓度分别为(7.9±2.6)和(53.8±12.5)pmol/L,明显高于对照组的(3.6±1.7)和(6.2±2.3)pmol/L,(P<0.01);哮喘组血浆及痰液SP浓度分别为(8.3±3.1)和(46.9±10.2)pmol/L,也明显高于对照组(P<0.01);COPD和哮喘组间SP浓度无显著性差异(P>0.05)。结论 SP可能参与了COPD和哮喘的发病过程。     

冠心病患者血浆尾加压素Ⅱ的临床研究

目的 探讨血管活性物质尾加压素Ⅱ(UⅡ)在冠心病患者体内的表达及其变化。方法 采用放射免疫法测定50例冠心病患者及20例健康体检者的血浆UⅡ的水平。结果 (1)健康对照组静脉血浆UⅡ含量为3.70±1.30 pg/ml,冠心病患者的血浆UⅡ含量为1.61±1.02 pg/ml,两者有统计学差异(P=0.000)。冠心病患者中稳定性心绞痛者血浆UⅡ含量为2.62±1.20 pg/ml,不稳定心绞痛者UⅡ含量为1.39±0.80 pg/ml,急性心肌梗死者UⅡ含量为1.04±0.45 pg/ml,3组之间有显著性差异(P=0.004)。(2)冠心病患者中冠脉血管有闭塞组静脉血浆UⅡ含量为1.29±1.02 pg/ml,单纯狭窄组UⅡ含量为1.76±1.00 pg/ml,两者无统计学差异(P=0.131)。(3)经皮腔内冠状动脉成型术(PTCA)及支架植入术后,出现再狭窄患者组血浆UⅡ含量为2.28±0.94 pg/ml,而其他病人的血浆UⅡ含量为1.40±0.96 pg/ml,两者有统计学差异(P=0.008)。(4) PTCA治疗前后,股动脉血浆UⅡ的含量分别为1.18±1.14、2.22±1.77 pg/ml,两者有统计学差异(P=0.001)。结论 UⅡ可能参与了冠心病的发病;在PTCA治疗后出现支架内再狭窄中可能起作用。     

活性氧促使L6成肌细胞的分化

目的 探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响。方法 MTT法检测H₂O₂对L6细胞活力的影响;观察H₂O₂引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平。结果 在较短的处理时间内(1h),低浓度的活性氧(50μmol/LH₂O₂)有利于细胞的生长(P<0.05);H₂O₂处理12h后,50和150μmol/L的H₂O₂能够诱导成肌细胞分化的标记分子-myogenin基因的表达,形态学研究结果表明H₂O₂能够诱导肌管的形成,促使成肌细胞的分化。结论 活性氧可能是细胞内诱导细胞生长与分化的信号分子。     

姑息性肾动脉成形术用于严重冠心病合并肾动脉狭窄老年患者

目的 探讨对严重冠心病合并肾动脉狭窄的老年病人姑息性单纯行肾动脉成形术及支架植入术(PTRA)的可行性。方法 选取2000年7月~2003年7月间严重冠心病合并肾动脉狭窄的未行冠脉搭桥及经皮冠脉成形术且单纯行PTRA治疗的病人共34例(男23人、女11人),并对病人心肾功能、心脏超声心动图观察左室射血分数(LVEF)以及SF-36调查表内容进行17~53个月[平均(35.0±9.3)月]的随访。结果 随访中心绞痛发作次数由每周(14.0±3.9)次发展为6.5±3.3次(P<0.01),LVEF从(40.2±10.4)%发展为(45.3±7.8)%(P<0.05);SF-36调查表中评分总分由56.5±8.0好转为80.1±16.8(P<0.01),评分中的健康和日常活动、自我感觉、总的健康情况部分也有明显好转(P<0.01)。结论 严重冠心病合并肾动脉狭窄病人,如病人按目前条件不能行冠脉搭桥或冠脉成形术,姑息性单纯行PTRA是必要且可行的方法。     

血清褪黑素、谷胱甘肽与帕金森氧化应激的相关性

目的 探讨帕金森病(PD)患者血清中非酶类抗氧化物褪黑素、谷胱甘肽含量的变化及其与疾病严重程度、认知功能障碍、睡眠障碍的关系。方法 选取2017年9月至2018年2月住院PD患者50例,另选取年龄、性别相匹配的50例健康对照者。采用 H-Y(修正)分级量表对PD患者病情严重程度进行评估,采用蒙特利尔认知评估量表北京版对患者的认知功能进行评估,采用匹兹堡睡眠质量指数对患者的睡眠状况进行评估。使用酶联免疫吸附法检测血清褪黑素(MLT)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平,并对结果进行比较分析。结果 PD组血清MLT水平明显高于健康对照组[(84.12±6.58)pg/ml比(46.29±9.73)pg/ml,P=0.000];血清GSH水平明显低于健康对照组[(21.07±12.05)μmol/L比(77.73±39.90)μmol/L,P=0.000]。血清MLT水平与H-Y分级呈正相关(r=0.537,P=0.000),血清GSH水平与H-Y分级呈负相关(r=-0.596,P=0.000)。PD组患者血清MLT、GSH二者水平呈负相关(r=-0.842,P=0.000)。具有睡眠障碍PD患者的MLT水平明显高于无睡眠障碍组[(85.79±6.45)pg/ml比(78.84±3.54)pg/ml,P=0.001];PD有认知功能障碍组的GSH水平明显低于无认知功能障碍组[(17.47±10.67)μmol/L比(26.09±12.23)μmol/L,P=0.011]。结论 PD患者血清MLT水平较正常人升高,而GSH水平较正常人减低,二者均与PD严重程度相关,同时两项指标之间呈负相关。具有睡眠障碍的PD患者血清中MLT水平较高,合并认知功能障碍的患者GSH水平较低。     

静脉盐负荷对高血压盐敏感者肾脏PGI2及TXA2的影响及盐敏感性高血压的胰岛素抵抗

目的 观察急性静脉盐水负荷对高血压盐敏感者肾脏PGI₂及TXA₂的影响及盐敏感性高血压的胰岛素抵抗情况。方法 测定53例已确定盐敏感性的高血压患者急性盐水负荷前后24h尿6-酮PGF₁α及TXB₂的排泄量,并在受试者中进行葡萄糖耐量及胰岛素释放试验。结果 静脉盐水负荷后,盐敏感者24h尿6-酮PGF₁α的排泄量明显较盐不敏感者为低[(316±57)vs(371±68)pg/min,P<0.01],负荷后的减少幅度前者明显高于后者[(197±99)vs(136±101)pg/min,P<0.01]。而盐负荷后盐敏感者尿TXB₂的排泄量及负荷后的增加幅度均明显较盐不敏感者为高[(394±32)vs(359±44)pg/min,P<0.01;(80±47)vs(47±45)pg/min,P<0.01]。盐敏感者空腹及糖负荷后各时点血糖、血胰岛素水平均显著高于盐不敏感者(P<0.05),而胰岛素敏感性指数则明显低于盐不敏感者(0.013±0.003vs0.018±0.004,P<0.01)。结论 急性静脉盐水负荷对高血压盐敏感及盐不敏感者肾脏PGI₂及TXA₂代谢的影响有明显差异,使高血压盐敏感者肾源性PGI₂减少而TXA₂增加,此异常可能与盐敏感性高血压的发病有关;盐敏感者胰岛素抗性较盐不敏感者高。     

紫杉醇和吉西他滨对激素非依赖性前列腺癌的作用

目的 观察紫杉醇(PA)协同吉西他滨(GE)对前列腺癌细胞系PC-3的体内外作用,并探讨其可能的作用机制。方法 应用光镜形态学、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了10^-6、10^-7、10^-8 mol/L浓度PA和10^-7、10^-8、10-9 mol/L浓度GE在体外单药或协同对前列腺癌细胞系PC-3的作用、对细胞DNA含量及cyclin D1表达的影响。观察PC-3细胞荷瘤裸鼠单独及协同使用PA和GE前后的体质量、肿瘤质量、血清PSA和肿瘤PSA免疫组化的变化。结果 10^-8 mol/L以上浓度GE作用48 h,可增强10^-7 mol/L以上浓度PA对前列腺癌PC-3细胞系的生长抑制[抑制率≥(50.8±4.2)%,P<0.05],增强诱导凋亡作用[凋亡率≥(22.9±2.3)%,P<0.05],下调Cyclin D1的表达[表达率≤(9.6±1.6)%],与阳性对照组cyclin D1表达率(25.5±4.1)%相比差异有显著性(P<0.01)。GE使PA所致的G₂/M期细胞周期阻滞比例由(70.3±9.7)%减至(38.2±4.2)%,部分地逆转了其G₂/M期细胞周期阻滞(P<0.01)。协同治疗前后裸鼠体质量无明显变化,但肿瘤质量(3.2.±0.5 g)、血清PSA[(51±14) ng/ml]和肿瘤PSA免疫组化的表达率[(30±3.7)%]在协同治疗组显著低于其他组(P<0.05或0.01)。结论 PA和GE可以在体内外协同增强对前列腺癌细胞系PC-3的生长抑制和诱导凋亡作用,显示了PA和GE协同用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性,并部分地解释了其作用机制。     

糖尿病大鼠阴茎海绵体硫化氢含量及其合成酶表达的变化

目的 观察糖尿病大鼠及非糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中硫化氢(H₂S)含量及胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)表达的差异。 方法 将Wistar大鼠随机平均分为两组,一组高脂饲料喂养8周后,注射链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病大鼠模型(糖尿病组),另一组普通饲料喂养(对照组)。继续喂养12周后分离两组大鼠海绵体组织,检测海绵体组织内源性H₂S的生成;采用RT- PCR法检测两组海绵体组织中CSE mRNA的表达;采用Western blotting法检测两组CSE蛋白的表达。 结果 糖尿病组内源性H₂S浓度较对照组显著降低(P<0.01);糖尿病组海绵体组织中CSE mRNA和CSE蛋白的表达量均较对照组显著降低(P<0.01)。 结论 糖尿病大鼠阴茎海绵体H₂S含量显著降低,其机制可能与CSE mRNA及蛋白水平表达减少有关。     

血浆氧化三甲胺及其前体物质浓度与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关系

目的 探索血浆中氧化三甲胺（trimethylamine N-oxide,TMAO）及其前体物质的浓度与冠状动脉粥样硬化性心脏病（以下简称冠心病）（coronary heart disease,CHD）的关系。方法 选取首都医科大学附属北京天坛医院心内科可疑CHD患者88例,根据冠状动脉造影结果将患者分为CHD组和对照组。利用高效液相法测患者血浆TMAO及其前体物质胆碱、肉碱、三甲胺乙内酯和三甲氨基丁内盐的浓度,分析两组患者血浆TMAO浓度及其前体物质与CHD的关系。结果 CHD组患者血浆TMAO浓度明显升高,差异有统计学意义[（6.20±3.57）μmol/L vs （3.90±2.26） μmol/L,P<0.05];两组血浆中胆碱、肉碱、三甲胺乙内酯和三甲氨基丁内盐浓度差异均无统计学意义（P>0.05）。多因素Logistic回归分析,血浆TMAO浓度与CHD有关联（OR=1.35,P<0.05）,血浆TMAO浓度升高,CHD的危险性增加。结论 血浆中TMAO的浓度与CHD密切相关,而与TMAO前体物质浓度无显著相关性。     

可溶性内皮糖蛋白在抗磷脂综合征患者的血清水平及临床意义

目的: 检测可溶性内皮糖蛋白(soluble endoglin,s-Eng)在抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)患者的血清水平并分析其潜在临床意义。方法: 采用酶联免疫吸附试验方法检测139例APS患者[原发性APS患者64例,继发于系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的APS患者75例]、44例不符合APS诊断的单纯SLE患者、37例原发性干燥综合征(primary sjogren syndrome,pSS)患者、23例白塞病(Behcet’s disease,BD)患者、22例系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)患者、22例持续抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,aCL)阳性但无法诊断SLE或APS者(单纯aCL阳性组)及87例健康对照(health control,HC)的s-Eng血清水平,分析APS患者外周血s-Eng水平与其临床及实验室表现的关系。数据分析采用 t检验、方差分析、Mann-Whitney U 检验、Pearson’s χ ²检验。 结果: (1)APS患者血清s-Eng水平[(10.15±4.64) mg/L]显著高于其他风湿病患者[单纯SLE(5.55±2.51) mg/L,pSS(5.32±2.34) mg/L,BD(4.58±1.53) mg/L, SSc(7.11±4.18) mg/L]、单纯aCL阳性组[(5.17±2.00) mg/L]及HC组[(5.04±1.11) mg/L],P均小于0.001。原发性APS患者与继发于SLE的APS患者血清s-Eng水平差异无统计学意义[(9.83±5.15) mg/L vs. (10.42±4.18) mg/L,P =0.12]。单纯aCL阳性组血清s-Eng水平与HC组差异无统计学意义[(5.17±2.00) mg/L vs.(5.04±1.11) mg/L, P>0.05]。(2)以正常对照者血清s-Eng的 \stackrel{\text{-}}{x} ±3s作为诊断APS的cut-off值,将APS患者血清s-Eng≥8.37 mg/L设为s-Eng阳性组,对应的敏感性为0.772,特异性为0.928;约登指数为0.700。(3)s-Eng阳性组患者出现动脉血栓事件、病态妊娠比例显著高于s-Eng阴性组患者[分别为46/81 vs. 19/58, P<0.05; 29/65 vs. 10/44, P<0.05];s-Eng阳性组患者的血小板水平显著低于s-Eng阴性组患者(72.00×10 ⁹/L vs. 119.00×10 ⁹/L, P<0.001)。(4)s-Eng阳性组患者抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,aCL)阳性的比例(93.83% vs. 37.93%, P<0.001)及抗体滴度(61.70 U/mL vs. 15.45 U/mL,P<0.001)均高于s-Eng阴性组。抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体阳性的比例(61.73% vs. 43.10%, P<0.05)及抗体滴度(33.48 U/mL vs. 17.40 U/mL,P<0.05)也均高于s-Eng阴性组。 结论: s-Eng在APS患者血清中异常升高,其有可能为APS的诊断及风险预测提供一个血清学标志的补充。     

血浆硫化氢在急性胰腺炎损伤中的作用

目的 探讨血浆硫化氢(H2S)在急性胰腺炎损伤中的作用.方法 30例正常人和103例急性胰腺炎患者用分光光度法检测血浆硫化氢的浓度,同时,急性胰腺炎患者作上腹部CT扫描并按CT严重指数计分分级(CTseverity index,CTSI),根据临床表现APACHEⅡ评分和CT严重指数计分分级,分为急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)34例,急性轻症胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)69例.结果 急性胰腺炎组血浆H2S显著高于正常人组(77.13±11.25 μmol/L,vs 45.08±9.86 μnol/L,P＜0.05),重症急性胰腺炎组与轻症组有显著差异(77.13±11.25 μmol/L vs 51.87±14.43 μmol/L,P＜0.05).急性胰腺炎组血浆H2S与急性胰腺炎CT严重指数积分呈正相关(r =0.639,P＜0.05).结论 急性胰腺炎患者血浆H2S与急性胰腺炎炎症损伤程度有关,并可能是引起急性胰腺炎损伤的重因素之一.     

高水碘摄入对成人空腹血糖影响的探讨

Objective:To investigate the blood glucose level in different iodine status, then explore the impact of excess-iodine-intake on fasting blood-glucose. Methods:Adults were chosen from Haixing County in Cangzhou, Hebei. Llimosis morning-urinary and venous blood were collected to measure the levels of urinary iodine. Chemilu-minescent immunoassay was used to perform free triiodothyronine (FT₃), free thyroxine (FT₄), and sensitive thyroid-stimulating hormone (sTSH) in serum. Fasting blood-glucose was also measured by glucometer. Results:The median of water iodine in the excess-iodine-intake area (841.4 μg/L) was higher than that in the control area (12.79 μg/L, P<0.05). For adults’ urine iodine, the excess-iodine-intake area was higher(P<0.05), with the value of 1 137.3（646.8～1 450.8）μg/L vs 216.6（146.5～366.9）μg/L. The level of FT₃ in the excess-iodine-intake area was lower (P<0.05), with the value of （4.72±0.48） pmol/L vs （4.96±0.36）pmol/L. No significant difference was found in the FT₄ level in the areas. The median of sTSH in the excess-iodine-intake area was higher than that in the control area, with the value of（3.07±2.17）μIU/ mL vs （2.30±1.07） μIU/mL . And the prevalence of thyroid disease in the excess-iodine-intake area was higher, with 43(22.75%) vs 8(10.13%). No significant difference in the level of the fasting blood-glucose was found in the areas (P>0.05). Age and FT₄ were found positively correlated with fasting blood-glucose by correlation analysis（r=0.258,P<0.001; r=0.154,P=0.013）, while the others were not related. Conclusion:Difference in fasting blood-glucose in water-iodine-excess area and the control area does not exist. Yet further study should be taken in a larger population-based epidemiological investigation to confirm the effects of excess-iodine-intake on glucose.      

经皮腔内冠脉介入术对冠脉循环中肾上腺髓质素及肿瘤坏死因子的影响

目的 探讨经皮腔内冠脉介入术对冠脉循环中肾上腺髓质素(ADM)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的影响。方法 33例冠心病患者分别于冠脉造影前后即刻、球囊扩张(PTCA)后即刻、支架置入后即刻、术后10 min采集冠状静脉窦血,同时采集股动脉血,采用放免法测定ADM、TNF-α浓度。结果 冠脉造影前后ADM及TNF-α无明显变化(P>0.05);PTCA后即刻冠状窦内ADM和TNF-α明显升高(P<0.01);支架后即刻ADM有上升趋势(P>0.05);术后10 min ADM降至术前水平。结论 冠脉造影对冠脉循环血管活性物质基本不影响;PTCA及支架术后冠脉循环中ADM和TNF-α升高,可能与球囊损伤内皮、支架对管壁的机械压迫及刺激有关,两者可能参与了PTCA及支架术后急性闭塞、再狭窄的调节。     

短波与激光疗法治疗膝骨关节炎的疗效比较

目的:比较短波疗法与激光疗法治疗膝骨关节炎(KOA)的疗效,优化膝骨关节炎发作期物理因子治疗方案。方法:膝骨关节炎患者48例,随机分为短波组和激光组,每组24例,均口服扶他林,并进行全关节活动度牵伸和床边等长股四头肌训练,激光疗法组应用激光治疗,短波治疗组应用短波治疗。比较治疗15次后,WOMAC评分的疼痛、僵硬和功能障碍的变化。结果:15次治疗后短波治疗组患者较治疗前WOMAC评分的疼痛项（10.58±3.98 vs 3.54±2.15,P<0.05）、僵硬项（3.17±1.69 vs 1.17±0.87,P<0.05）和功能障碍项（33.54±12.96 vs 20.67±11.98, P<0.05）均明显改善。15次治疗后,激光治疗组较治疗前的WOMAC评分的疼痛项（10.50±3.53 vs 7.04±2.14, P<0.05）和功能障碍项（29.38±11.93 vs 21.29±7.89,P<0.05）均较治疗前有明显改善;僵硬项（2.79±1.96 vs 1.92±1.44, P>0.05）无明显改善。15次治疗后,短波治疗组和激光治疗组相比,WOMAC评分中疼痛项差值改变（6.96 vs 3.46, P<0.05）具有统计学意义,僵硬项差值（2 vs 0.88,P<0.05）具有统计学意义。结论:短波疗法缓解膝骨关节炎发作期疼痛、改善僵硬的疗效明显优于激光疗法,这可能与短波的穿透深度较深有关,提示软骨下骨病变是KOA的重要病理机制之一。     

Rasfonin抑制骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移

目的: 研究真菌次级代谢产物rasfonin对骨肉瘤143B细胞增殖与迁移能力的影响。方法: 以骨肉瘤细胞系143B为模型,利用3-(4,5-二甲基) -5-(3-羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物检测法[3-(4,5-dime-thylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt, MTS]观察rasfonin对细胞活性的影响,以二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组为对照,采用rasfonin (3 μmol/L和6 μmol/L)处理12或24 h,观察143B细胞活性的变化;采用克隆形成实验检测rasfonin对细胞集落形成能力的影响,以DMSO组为对照,采用rasfonin (3 μmol/L)处理1周,对比两组克隆形成数目。划痕实验及侵袭实验检测rasfonin对细胞侵袭迁移能力的影响,以DMSO组为对照,采用rasfonin (3 μmol/L)处理24 h,对比两组的伤痕愈合率及侵袭细胞数。以DMSO组为对照,透射电子显微镜观察rasfonin(3 μmol/L)处理4 h后细胞内自噬体含量的变化。蛋白免疫印迹的方法检测rasfonin对p62蛋白(sequestosome 1)、微管相关蛋白1轻链3融合蛋白(microtubule associated protein 1 light chain 3 fusion protein, LC3)及聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶[poly (ADP-ribose) polymerase-1, PARP-1]表达的影响。结果: 在12和24 h,随着rasfonin浓度的升高,骨肉瘤143B细胞的细胞活性均逐渐降低,3组间差异有统计学意义(12 h: F=31.36, P<0.01; 24 h: F=67.07, P<0.01),任意两组间比较差异也均有统计学意义(P<0.01)。3 μmol/L的rasfonin可以显著抑制143B细胞的集落形成能力(P<0.01)。Rasfonin处理后,143B细胞在24 h内的伤痕愈合比率明显低于DMSO对照组(33.91%±0.83% vs. 65.11%±0.94%, P<0.01);同样24 h内穿过覆盖有Matrigel的基底膜的细胞数明显低于DMSO对照组[(21.33±1.45)个vs.(49.33±2.40)个, P<0.01]。Rasfonin处理4 h后骨肉瘤143B细胞中自噬体增多,p62水平降低,LC3-Ⅱ累积,自噬抑制剂氯喹存在条件下LC3-Ⅱ累积更为明显,并且随着rasfonin浓度的提高PARP-1的切割增多。结论: Rasfonin既可以抑制骨肉瘤143B细胞的增殖迁移,还可以引起细胞的自噬与凋亡,这些结果为rasfonin作为骨肉瘤新的治疗药物提供了初步的实验基础。     

血清β2-微球蛋白与系统性红斑狼疮疾病活动度及其肾脏损害的相关性

目的:探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清β2-微球蛋白水平与疾病活动度及其肾脏损害的相关性及临床意义。方法:采用放射免疫法测定107例SLE 患者血清β2-微球蛋白水平,观察其与病情活动指标及肾脏损害的相关性。结果:SLE疾病活动期患者血清β2-微球蛋白水平显著高于缓解期患者[(4.76±3.00) mg/L]vs[(2.45±1.17) mg/L],狼疮肾炎组患者血清β2-微球蛋白水平显著高于非狼疮肾炎组[(3.92±2.85) mg/L]vs[(2.63±1.25) mg/L],分别比较差异具有统计学意义（P<0.05）;血清β2-微球蛋白水平与SLE疾病活动性指数（SLEDAI）、24 h尿蛋白呈正相关（分别为r =0.632,r =0.229,P<0.05）。结论:血清β2-微球蛋白与系统性红斑狼疮疾病活动及其肾脏损害相关。